抗“腐皮综合症”刺参体腔液指标变化的初步研究

对用“腐皮综合症”致病菌灿烂弧菌（Vibrio splendidus）感染刺参的7个体腔液指标进行了测定。结果显示：1）抗病刺参和易感刺参体腔液吸光值和颗粒细胞浓度在第10天差异显著（P〈0．05）。2）抗病刺参和易感刺参总细胞浓度和透明细胞一淋巴样细胞浓度在第5天差异显著（P〈0．05）。3）抗病刺参体腔液碱性磷酸酶活力在试验各天均保持较高水平,且在第10天与易感刺参有显著差异（P〈0．05）;易感刺参体腔液酸性磷酸酶活力在第5天明显高于抗病刺参（P〈0．05）,之后各天迅速降低,并显著低于抗病刺参（P〈0．05）。4）抗病刺参和对照组刺参超氧化物歧化酶活力各天始终无显著蒡异（P〉0．05）．抗病刺参和易感刺参在第10天蒡异昂著（P〈0．05）．     

一株条斑紫菜丝状体黄斑病致病菌病原学研究

采集山东省日照市岚山区藻类养殖合作社某紫菜育苗场的患有黄斑病的条斑紫菜(Pyropia yezoensis)丝状体,经2216E、TSB和TCBS 3种培养基体外培养,筛选获得优势菌株PZ201809121102,通过革兰氏染色、电镜负染观察、16S rDNA鉴定、生理生化分析、药物敏感性等技术方法对菌株进行鉴定分析,...     

刺参养殖池塘一种小头虫的分类鉴定及遗传多样性分析

为明确刺参养殖池塘大量出现的一种潜在敌害生物种类以及不同养殖区域的遗传关系, 本研究采用形态学和分子生物学方法确定了小头虫的种类, 并基于 18S rDNA、CO I 和 ITS 基因序列, 对山东东营和青岛两个地理群体的遗传多样性及遗传结构进行解析, 结果显示, 虫体外观呈红色, 长 7.94~25.27 mm, 宽 0.65~0.94 mm, 头部呈圆锥状或钝圆形; 胸部九个胸节, 前七胸节具毛状刚毛; 雄体在第八、九胸节具有钩状生殖棘; 雌体在腹部具成对的卵巢; 身体背部圆形, 腹部较扁平, 后腹部无鳃; 尾部末端具肛门。基于线粒体 CO I 基因系统发育树和序列比对, 发现其与 Capitella teleta 聚为一支且序列相似性为 99.11%。结合形态学特征及 CO I 基因分析结果, 确定山东刺参养殖池塘的小头虫为 C. teleta。不同地区小头虫的遗传进化分析结果显示, 中国山东 C. teleta 和韩国 C. teleta 以及日本 C. teleta 的亲缘关系最近, 进一步说明刺参养殖池塘中的小头虫为 C. teleta。东营和青岛小头虫群体的遗传多样性和AMOVA分析结果显示, 东营群体遗传多样性高于青岛群体, 两个地理群体的亲缘关系较远, 两个群体存在一定程度的遗传分化。研究结果明确了刺参养殖池塘中小头虫的种类以及不同养殖区域小头虫群体的遗传关系, 为构建刺参健康养殖技术提供了科学依据。     

仿刺参硫酸软骨素合酶1基因克隆及灿烂弧菌感染后的表达特征模式分析

硫酸软骨素在生物体应对病毒和细菌感染中起着重要作用, 为研究硫酸软骨素合酶 1 (chondroitin sulfate synthase-1, ChSy-1)在仿刺参(Apostichopus japonicus)受到灿烂弧菌(Vibrio splendidus)感染后的作用, 本研究开展了仿刺参 ChSy-1 基因(AjChSy-1)全长序列克隆和结构及系统进化分析, 并采用荧光定量 PCR 技术测定了该基因在刺参不同组织中的表达差异及灿烂弧菌感染下的表达模式。结果显示, AjChSy-1 基因 cDNA 全长为 2756 bp, 其中, 5′-UTR 长度为 194 bp, 3′-UTR 为 228 bp, ORF 为 2334 bp, 编码 777 个氨基酸。AjChSy-1 基因编码的蛋白含有糖基转移酶保守性 DXD 基序、β3-糖基转移酶基序及 β4-糖基转移酶基序等结构。刺参基因组比对发现在 chr13 染色体上存在 2 个 AjChSy-1 基因拷贝。系统进化分析表明, 刺参 AjChSy-1 编码蛋白与玉足海参(Holothuria leucospilota) 和棘冠海星(Acanthaster planci)的蛋白亲缘关系较近, 与斑马鱼(Danio rerio)、智人(Homo sapiens)等脊椎动物的蛋白亲缘关系较远。荧光定量 PCR 显示, AjChSy-1 基因具有广泛的组织表达特性, 其中, 体腔细胞中表达量最高, 体壁、性腺(雄性和雌性)和纵肌次之。在响应灿烂弧菌侵染过程中, 随灿烂弧菌侵染时间增加, 体壁中 AjChSy-1 表达量呈现先上升后下降的趋势, 在第 3、6、9 天分别为对照组的 1.79、2.06、3.12 倍, 对发病期抗病群体和易感群体中该基因的检测结果表明, 易感群体体壁该基因表达量显著低于抗病群体(P＜0.05), 表达量降低 11.4%。推测该基因可能在刺参应对灿烂弧菌中发挥免疫防御作用, 相关研究结果为解析刺参 AjChSy-1 基因功能以及抗病分子调控机制提供了参考数据。     

基于vhhP2基因的SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌方法的建立

根据哈维氏弧菌(Vibro harveyi)溶血素基因vhhP2的保守序列设计特异性引物, 建立了SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌的方法。构建含vhhP2基因的重组质粒作为标准品, 进行SYBR Green I实时定量PCR, 在Tm为60℃时, 扩增产物的熔解曲线仅有一个特异峰, 扩增所得标准曲线为y= –3.331x+37.48, 相关系数为0.998, 扩增效率为1, 最低可检测到7个拷贝。实验结果表明该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性, 对哈维氏弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。

     

秋、冬季节刺参养殖池塘浮游细菌数量变化规律的研究

应用平板稀释涂布培养计数法和荧光显微镜计数法,对秋、冬季(2008年9月～2009年2月)刺参养殖池塘水体中的浮游细菌数量变化规律进行了分析。结果表明,吖啶橙染色直接计数法(AODC)测得细菌总数的变化范围是1.0×106～2.1×107个/ml,活菌直接计数法(DVC)测得活菌总数的变化范围是4.0×105～5.7×106个/ml。异养细菌平板计数法(HPC)测得异养细菌数量为0.6×102～1.7×105CFU/ml。TCBS平板培养的弧菌数量在6.6×103CFU/ml以下。从时间分布看,刺参养殖池塘水体中浮游细菌数量最高值出现在10月份,最低值出现在1月份,秋季细菌数量显著高于冬季(P0.01)。从空间分布看,水体底层细菌数量显著高于表层(P0.05)。利用SPSS13.0软件对所得到的数据进行统计分析表明,同一样品不同计数方法获得的细菌总数数值之间存在显著的相关性(P0.01)。     

裂壶藻对刺参生长、免疫及消化酶的影响

以初始平均体重为(12.5±2.0)g的刺参为研究对象,在室内玻璃钢桶内进行了56 d饲喂实验。以基础饲料为对照组(A),研究基础饲料中分别添加0.5%(B)、1.25%(C)、2.0%(D)的裂壶藻对刺参生长、免疫及消化酶的影响。结果表明,C组、D组可显著提高刺参的特定生长率(SGR)(P0.05)。C组和D组刺参体腔液碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、吞噬活性、肠道淀粉酶均显著高于对照组(P0.05)。C组的体腔液呼吸爆发活性和肠道蛋白酶活性显著高于对照组(P0.05)。B组的AKP、LZM、肠道淀粉酶活性均显著高于对照组(P0.05)。饲料中添加裂壶藻各处理组刺参成活率均为100%。实验结果表明,1.25%-2.0%裂壶藻添加量可显著提高刺参的生长速度和免疫酶活性;饲料中添加1.25%裂壶藻能够显著增加刺参肠道的蛋白酶、淀粉酶的消化活性:裂壶藻有作为刺参营养添加剂的应用前景。     

基于文献计量的果园生草栽培技术研究进展

为深入探究果园生草栽培技术的研究进展及热点方向,利用可视化软件VOSviewer和CiteSpace对CNKI和Web of Science果园生草相关研究文献(1990—2022年)进行统计与分析。结果表明：1)果园生草相关研究的发文量整体上呈现波动增长趋势,学科研究主要集中在园艺学、环境学和生态学方面,最具代表性的期刊是Journal of Ecology、Plos One、Science of the Total Environment和《西北农林科技大学(自然科学版)》;2)国际合作方面,中国同美国和澳大利亚等国有密切交流,且与美国相关机构的学者合作联系最为密切;果园生草研究机构相对分散,中国科学院和西北农林科技大学开展了大量的果园生草研究,对我国果园生草技术的发展做出了积极的贡献;3)果园生草多采用控制模拟试验方法,以生草覆盖实践为研究基础,研究主题由早期侧重于草种选择,过渡到杂草病虫害防除再到更加注重果园综合效益。综上,国内果园生草的研究方向主要集中在果园草种选择、病虫害防除、土壤理化特性、果树提质增效和果园生态效应方面,而国外果园生草逐渐倾向于自然生草和果实品质层面。     

茶文化下情境教育学理论在高校书法艺术教育中的运用

茶文化本身具有宁静致远特征,这与书法艺术教育不谋而合.二者都有利于加强对学生道德情操的培养.因此,情景教育学理论在应用时应加强对茶文化的融入,这样才能有效提升高校书法艺术教育的深度和广度.本文将分析情景教育学理论概述,并讲述高校书法艺术教育的作用,还会阐述茶文化下情景教育学理论,在高校书法艺术教育中的应用,期望有效提升...     

弧形筛及生物净化池净化陆基工厂化海水养殖废水的效果

为了研究陆基工厂化海水养殖废水理想的净化工艺,对山东省烟台市1个大型海水养殖厂的“弧形筛＋4级生物净化池”的废水净化系统进行了各项水质指标的定量检测。结果表明：系统对悬浮物与无机氮和无机磷的去除效果明显;经该系统处理后,养殖废水的溶解氧、pH值、电导率、温度和盐度在排放前已经达到自然海水的常规值;系统中的细菌总量和弧菌总量依废水流入的次序,在各级净化池之间呈现了下降趋势;净化池中底栖单胞藻则体现了丰富的生物多样性。利用废水净化池进行刺参养殖,还可创造显著的经济效益。研究结果证明,该套系统易于建造、废水处理能力强,是一种适合中国国情的理想的陆基工厂化海水养殖废水处理模式。