过氧化氢对日本对虾幼虾的急性毒性试验

通过急性毒性试验测定过氧化氢对日本对虾幼虾的96hLC50为32.7mg/L,以应用系数0.1计算其安全应用浓度为3.27mg/L,获得相关数据可作为H2O2施用时的参考。     

刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备与特性分析

为获得刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体并初步分析单抗特性,提取刺激隐核虫幼虫膜蛋白,免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合,以间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞。通过ELISA方法检测单克隆抗体的亚类及效价;通过SDS-PAGE和western blot分析单抗特异性结合的蛋白,并以串联质谱方法对所识别条带进行鉴定;采用免疫荧光法分析单抗的抗原结合位点和特异性。结果得到3株能稳定分泌刺激隐核虫幼虫膜蛋白抗体的细胞株(5D11AG5、5H9BG3、6E11CE7)。这3株细胞株产生的抗体亚型均为IgM,ELISA效价分别为1∶3200、1∶25600、1∶51200。单抗5D11AG5和单抗5H9BG3株能够识别~35kDa的刺激隐核虫幼虫膜蛋白线性抗原表位,单抗5D11AG5所识别的蛋白与数据库中刺激隐核虫表面抗原蛋白、嗜热四膜虫微管蛋白(tubulin)的肽段具有较高覆盖率。免疫荧光结果显示单抗5D11AG5和单抗5H9DG3识别部位主要在虫体表面近胞口的前端,而单抗6E11CE7识别虫体表面外膜。刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备,为刺激隐核虫功能性蛋白的筛选、纯化和功能分析提供了条件。     

多抗技术对多种鱼类血清免疫球蛋白的研究

亲和层析纯化鳜鱼血清免疫球蛋白,制备针对鳜鱼血清免疫球蛋白的兔多克隆抗体,采集常见经济鱼类血清25种,利用优球蛋白法纯化血清,通过间接ELISA的方法筛选与兔抗鳜鱼Ig反应的鱼类血清,结合变性还原条件与非变性非还原条件下的蛋白印迹试验显示:制备的兔抗鳜鱼Ig识别鲈形目中鳜鱼、加州鲈鱼、卵形鲳鲹、尼罗罗非鱼、花鲈、红罗非...     

大黄鱼副溶血弧菌的分离、鉴定及致病力分析

于2000年7月,从福建省宁德地区东吾洋海区患败血病的大黄鱼体内分离到1种优势菌,根据人工感染证实为病原菌,其半数致死剂量为1.0×107 cfu*ml-1;经43项形态、生理、生化特性测定,鉴定为副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus.其主要特性为革兰氏阴性,弧状,极生单鞭毛,氧化酶阳性,发酵型,精氨酸双水解酶、尿素酶为阴性,赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶为阳性,VP为阴性,吲哚为阳性、不产生H2S,利用葡萄糖、甘露醇产酸,不利用肌醇、蔗糖,神奈川溶血活性(KP)为阴性,对O/129等高度敏感.     

PCR法筛选大黄鱼微卫星DNA

构建大黄鱼部分基因组DNA文库。以M13通用引物和根据微卫星核心序列所设计的引物，用PER法直接对文库进行扩增，获得15个PER阳性克隆，对阳性克隆测序。测序结果说明，6个阳性克隆中含有微卫星核心序列，用Primer3引物设计软件对侧翼序列进行微卫星引物设计。用6对引物扩增大黄鱼基因组，PER结果经6％聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，其中2对引物能得到稳定的扩增。     

赤点石斑鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析

赤点石斑鱼血清免疫球蛋白经饱和硫酸铵沉淀,Sephrose-4B柱提纯后免疫BALB/c小鼠.经细胞融合和抗体分泌细胞筛选,获得2株抗石斑鱼免疫球蛋白的单克隆抗体,分别命名为Mab-8D6和Mab-2D3,两株单抗的亚级份均为IgG1,腹水抗体的ELISA效价为106,对纯化的石斑鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为62 ng,...     

创伤弧菌ISCOMs疫苗对欧洲鳗鲡细胞免疫的影响

应用创伤弧菌ISCOMs疫苗对欧洲鳗鲡进行腹腔注射免疫,免疫后35 d进行攻毒试验,结果表明,经免疫的欧洲鳗鲡相对存活率达75%,证实创伤弧菌ISCOMs疫苗具有较好的免疫保护性。对创伤弧菌ISCOM疫苗免疫后的欧洲鳗鲡细胞免疫水平的淋巴细胞进行转化试验,检测结果分析表明,试验组与对照组的淋转指数差异不显著,推测该疫苗诱导的免疫保护方式可能与细胞免疫保护无密切相关性。     

福建养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)RAPD标记及多态性调查

运用DNA随机扩增多态检测(RAPD)技术和4种OPV引物,对采自福建平潭和罗源的3份养殖大黄鱼样品进行遗传多样性分析。在检出的39个位点中,14个位点显性频率为1,可作为筛选大黄鱼物种标记的参考位点。样品多态位点检出率平均48.2%。样品平均杂合度(H)分别为0.251 5、0.275 5和0.257 5。2004年采自平潭和罗源的两份样品在部分已知位点存在明显的基因型频率差异,显示网箱群体之间可以出现某种程度的遗传分化。     

养殖花鲈(Lateolabrax maculatus)肠道菌群的多样性分析

为探究养殖花鲈(Lateolabrax maculatus)肠道菌群的结构特征,采用Illumina Hiseq2500高通量测序技术,对福建宁德三都澳网箱养殖花鲈的肠道内容物及肠壁菌群16S rDNA V3-V4区进行测序.肠道内容物和肠壁样品分别获得456和293个OTUs(operational taxonomi...     

网箱养殖大黄鱼"白肝病"防治初探

2000年4至9月，宁德地区网箱养殖大黄鱼出现大面积，大规模死亡，其主要症状为肝脏严重失血，肝组织受损，呈黄白色，并伴有烂鳃等症状，根据临床表现、检查诊断、，并结合治疗效果。本文将该病初步命名为“白肝病”现结合该病的防治，及对其产生的可能原因作初步探讨。