ES抗原(TspⅡ)表达质粒的构建

利用限制性内切酶从 ＴｓｐⅡｐｕｃ１９质粒上切取含 Ｅ Ｓ抗原的基因片段 ＴｓｐⅡ,插入到含有 Ｓ Ｐ６ 启动子和 Ｓ Ｖ４０启动子的表达载体 Ｐ Ｓ ＶｓｐｏｒｔⅠ中,从而构建了 Ｅ Ｓ抗原（ ＴｓｐⅡ）的表达质粒。     

链霉素快速检测试纸的研制及其性能测定

以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定。结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100%,与其他抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100%;检测试纸在10 min内显示结果。     

猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备猪流感病毒(SIV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(MAb),采用差速离心法纯化H1N1和H3N2亚型SIV后交叉免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过建立的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法进行筛选。获得3株能稳定分泌抗NP蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为16D5、18G8和20C4,将它们诱导小鼠产生的腹水IPMA效价分别为1×10~(-6)、1×10~(-6)和1×10~(-5)。亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链为κ链。3株单克隆抗体特异识别H1N1、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒,并且与猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒无交叉反应。Western blot检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清均在56 ku附近出现一条特异性的蛋白质条带,说明针对SIV的NP蛋白制备了3株单克隆抗体。综上,成功制备了针对SIV NP蛋白的3株单克隆抗体,可识别不同亚型的SIV。     

河南省猪伪狂犬病的流行动态及防制研究

对河南省１９ 个猪场发病仔猪的检测发现,许多被检仔猪存在ＰＲＶ 感染,发病猪场占全省猪场的９ ．６ ％ ,其ＰＲＶ 阳性检出率平均为３４ ．５ ％ ,占被检发病仔猪的３５ ．８ ％ ,并呈快速上升趋势。对３ 个ＰＲＶ 污染猪场采取了综合控制措施,取得了较好的效果,为养猪场控制此病提供了可靠的方法。     

金芩蓝口服液中连翘苷含量测定方法的改进

改进金芩蓝口服液中连翘苷的含量测定方法。通过对超声溶剂及超声时间的比较,优选出供试品的制备方法。结果显示金芩蓝口服液中连翘苷含量测定的供试品溶液的制备方法为以50%甲醇为溶剂、超声10 min。说明该方法快速简便、精密度高、稳定性、重复性好,可用于金芩蓝口服液中连翘苷的含量测定。     

金芩蓝口服液对鸡风热犯肺证的疗效研究

为探讨金芩蓝口服液对人工诱导和自然发病鸡风热犯肺证的治疗效果,以H9N2 AIV与脂多糖(LPS)为诱导因素人工建立鸡风热犯肺证,通过发病率、死亡率、临床症状等指标进行中兽医辨证来考察模型的建立情况;通过肛温变化、治愈率、有效率和无效率等指标考察金芩蓝口服液对人工诱发鸡风热犯肺证的疗效;将蛋鸡养殖场自然发病的600只200日龄的风热犯肺证患鸡随机分为两组,分别采用金芩蓝口服液与双黄连口服液进行治疗,观察记录采食情况和产蛋率,并计算治愈率、有效率、无效率和死亡率。结果显示,采用H9N2 AIV与LPS混合感染配合热应激的方式成功建立鸡风热犯肺证的动物模型;金芩蓝高剂量组治愈率和总有效率分别为90%、95%,金芩蓝中剂量组治愈率和总有效率为85%、95%,与模型对照组相比,皆具有极显著的统计学意义(P<0.01);而自然发病的鸡风热犯肺证病鸡,经金芩蓝口服治疗,治愈率达89%,总有效率达96.3%。结果表明,金芩蓝口服液可有效的治疗鸡风热犯肺证。     

浅析玉米大垄双行覆膜种植技术

玉米大垄双行技术是将过去的两垄(垄距60~65cm)合成一大垄,在垄上种两行玉米,小行间距40cm,大行间距80cm或90cm;也可不合成大垄,直接按40cm小行距偏心播种,播种后即形成大小垄。形成了大垄之内适合加密、大垄之间宜于耕作、行距宽窄相间、利于通风透光的良性田间态势。其优势是通风透光,形成垄垄是边行,棵棵是地头,有利于光合作用,有利于田间作业。     

浅淡农村变电所的防雷保护

变电所是多条输(配)电线路的交汇点,也是农村电网的枢纽点。变电所的雷害事故往往会导致设备破坏及大面积停电,所以必须采取有效的防雷措施,以保证电气设备的安全运行。变电所发生雷电过电压有2个来源:①雷电直击变电所;②沿架空电力线路入侵的雷电过电压波。下面分别谈一下针对这2种情况的保护对策。     

猪乙脑病毒分离株CSF.XZ2D在BHK21细胞上的传代培养及E基因序列分析

为了解河南省规模化猪场日本乙型脑炎病毒(JEV)流行株的特征及其遗传基因的稳定性,将猪乙脑病毒分离株CSF.XZ-2D在BHK-21细胞上进行连续传代培养,并对其E基因的遗传稳定性进行了研究。结果表明,经连续传代25次后病毒E基因趋于稳定,氨基酸位点E271(E→V)和E278(V→L)传代后发生稳定点突变。与JEV毒力相关的部分位点如E107、E138、E176、E177和E315遗传稳定性较高,经连续传代后均未发生突变,与SA14-14-2相应位点完全一致。但是,另外一些位点的遗传稳定性较差,如E279和E312分别出现K→M→K和K→R→K→R的反复突变。这些突变是否与JEV的宿主细胞适应性及毒力变化相关有待进一步研究。     

可阻断IBDV感染的抗CEF膜蛋白单克隆抗体的筛选

 【目的】利用细胞融合技术及细胞免疫组化方法,筛选可特异性阻断鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）感染的抗鸡胚成纤维细胞（CEF）膜蛋白单克隆抗体,为进一步研究IBDV的CEF受体奠定基础。【方法】用CEF细胞免疫Balb/c小鼠,经细胞融合获得杂交瘤细胞上清。单层CEF用杂交瘤细胞上清孵育2 h后接种IBDV,病毒感染后固定细胞,先后与F22-EA6-Biotin及Streptavidin-HRP进行反应,最后用AEC染色,显微镜下计数,统计感染细胞减少的百分率以判定单抗上清阻断IBDV感染的效果。【结果】利用细胞组化的方法,共计检测了768株杂交瘤细胞上清,6株（1A5、1H11、2B12、3G1、4D10和4B8）显示有阻断IBDV感染的效果,其中4B8可完全阻断IBDV对CEF的感染,该单抗针对的CEF膜蛋白很有可能是IBDV的细胞受体。【结论】筛选到的抗CEF膜蛋白的单抗可以阻断IBDV感染CEF,表明所建立的方法具有较高的敏感性和特异性。这些单抗可以用于进一步研究IBDV的CEF细胞受体。