沙丁胺醇单克隆抗体的制备及其免疫学鉴定

采用混合酸酐法合成SAL-BSA和SAL-OVA,用紫外法和凝胶电泳法鉴定,使用细胞融合技术建立沙丁胺醇杂交瘤细胞株,通过体内诱生腹水法大量制备沙丁胺醇高亲和力单克隆抗体。结果显示,所免疫的小鼠抗体效价均达到10-4;融合后筛选出的3株杂交瘤细胞单抗亚型均为IgG1,细胞培养上清间接ELISA效价为1∶2.5×102~1∶1.02×103,用4D3E7细胞株制作的腹水效价为1∶5.12×105,对SAL的IC50为1.35μg/L,除与瘦肉精有10.8%交叉外,与其他β2-受体激动剂的交叉反应均小于0.2%。且具有较好的特异性。试验获得了高效价、敏感、特异的SAL mAb,为动物性食品中SAL残留的免疫学检测奠定了基础。     

6种微藻生长及脂肪累积对氮含量变化的响应

研究了绿色巴夫藻、米氏凯伦藻、球等鞭金藻、三角褐指藻、海水小球藻、衣藻的生长及脂肪累积对氮含量变化的响应。试验结果表明,6种微藻生长及总脂对不同氮含量均有一定程度的响应。微藻生长,绿色巴夫藻、米氏凯伦藻、球等鞭金藻3种微藻响应明显,绿色巴夫藻以氮含量100%组生长最快,第10d时,比氮含量40%组快512%,比氮含量20%组及60%组分别快62%、61%;米氏凯伦藻氮含量80%组生长最快,第10d达到最高值,超出其他试验组约60%;球等鞭金藻氮含量80%组最快,第10d生长量超过100%试验组67%;三角褐指藻、海水小球藻、衣藻响应程度小于其他微藻。总脂积累,三角褐指藻氮含量80%组总脂含量最高,达细胞干质量的80.77%,是氮含量100%组2.5倍;绿色巴夫藻氮含量60%组最高,达细胞干质量的73.68%,是氮含量100%组3.4倍;其他4种微藻在降低氮含量后,总脂均超过细胞干质量的30%。三角褐指藻在生物柴油制备方向极具开发前景。     

2010─2019年莱州湾夏季蟹类群落年际变化及其影响因子

根据 2010─2019年夏季底拖网调查资料, 对莱州湾蟹类群落结构特征年际变化及其影响因子进行相关研究, 包括群落的种类组成、优势种、物种多样性和群落聚类分析等, 运用冗余分析分析影响蟹类群落年际变化的环境因子。结果表明: 2010─2019 年夏季共捕获蟹类 16 种, 蟹类种数年间波动较大, 减少趋势明显, 2011 年种类数最多, 为 14 种, 2017 年最少, 为 7 种, 优势种每年 2~4 种。生物量和尾数呈先减少后增加的变化趋势, 多样性指数在 2014─ 2015 年明显下降。10 年间蟹类群落共分为 4 组, 组 A 为 2010 年, 组 B 为 2011 年、2014 年和 2015 年, 组 C 为 2012 年、 2013 年、2018 年和 2019 年, 组 D 为 2016 年和 2017 年。PERMANOVA 分析结果显示, 各组间差异显著(P＜0.01)。 SIMPER 分析表明, 各组特征种为日本蟳(Charybdis japonica)、三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)和隆线强蟹 (Eucrate crenata)等, 分歧种主要为日本关公蟹(Dorippe japonica)、日本蟳、绒毛近方蟹(Hemigrapsus penicillatus) 和隆线强蟹等。冗余分析表明, 对蟹类群落年际变化影响较大的因子是底层叶绿素、底栖生物生物量和厄尔尼诺指数。本研究通过对蟹类群落年间动态变化的调查, 旨在为三疣梭子蟹增殖放流工作提供科学依据。     

黄渤海主要作业类型渔具的渔业资源利用

为了解黄渤海主要捕捞渔具对渔业资源的利用状况,2009年对张网、拖网和刺网等渔具类型的主要渔具种类开展了渔获结构和捕捞能力调查。结果表明,黄渤海的渔业生产以秋汛为主,张网、拖网和陷阱类渔具网目尺寸小,渔获选择I生差,大量捕捞小黄鱼0带鱼、蓝点马鲛和银鲳等传统经济鱼类当年发生的补充群体,幼鱼比例高。相比而言,刺网的网目尺寸大,渔获选择性强,渔获质量好,幼鱼比例低。建议将黄渤海渔具准入的最小网目尺寸暂定为5．5cm,待今后渔业资源结构发生变化和渔获上岸监管体系完善后再作分类调整。     

旋毛虫肌幼虫ES Ag单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的获得能够用于制备旋毛虫病快速检测试纸条的EsAg的单克隆抗体。方法应用旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原（ESAg）免疫诱导Balb／c小鼠,使小鼠产生较强的免疫应答,将免疫小鼠的脾细胞与NS0瘤细胞融合,利用Es45、ES49抗原通过间接ELISA对大量杂交瘤细胞培养上清的筛选,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的4株杂交瘤细胞。结果ES45和ES49（分子质量分别为45ku,49ku）分别被Ts-2D4、Ts-4C5和Ts-4H6、Ts-2G8单克隆抗体识别,与猪肺丝虫（Metastrongylus pudendotectus．MP）、囊虫（Cysticercus cellulosae,CC）、细颈囊尾蚴（Cysticercus tenuicollis,CT）、蛔虫（Ascaris suum,AS）、弓形虫（Toxoplasma gondii,TG）、住肉孢子虫（Sarcocystis miescheriana,SM）抗原反应测试表明,4株单抗与参试抗原均无交叉反应,所有单抗上清ELISA平均效价为1：1120,腹水ELISA平均效价为1．1×10^6,亲和力常数的平均值为6．12×10^9 L／mol。以金标免疫吸附试纸条原理为基础,利用制备的单抗成功研制了旋毛虫病快速检测试纸务,操作快速、无需设备及试剂,可以作为旋毛虫病的实时监测工具。结论ESAg单抗用于制备旋毛虫病快速诊断试纸条是理想的试剂。     

苯巴比妥残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

苯巴比妥（Phenobarbital,PB）具有镇静、催眠等作用,在肉用畜禽生产中常被用作饲料添加剂,但PB存在神经、骨髓、致畸、致癌等毒性作用,其残留严重危害人们的身体健康,我国和世界上多数国家都严禁PB用作饲料添加剂.目前,国外已开发出PB残留检测的ELISA试剂盒,如德国DadeBehring公司等,国内尚未见报道.本研究应用杂交瘤技术在制备出PB单克隆抗体（mAb）基础上,成功研制出PB残留检测阻断EILSA试剂盒（PB-Kit）,并对其性能进行了测定,现报告如下.     

饲料中添加苯甲地那铵对肉仔鸡骨骼肌发育的影响

试验旨在研究苦味剂——苯甲地那铵（denatonium benzene, DB）对肉仔鸡骨骼肌发育的调控作用，为酚酮类苦味植物提取物在家禽饲料中的应用提供参考依据。试验选用240只1日龄雄性黄羽肉仔鸡，随机分为4个处理：对照组（玉米-豆粕型基础日粮），LDB、MDB组和HDB组分别在基础日粮中添加5、20 mg/kg和100 mg/kg DB，饲喂周期为8周。结果表明：日粮中添加DB显著降低肉仔鸡的体重和胸肌重（P<0.05）。各DB组总蛋白含量较对照组均显著降低（P<0.05）;MDB组和HDB组血清谷丙转氨酶和尿酸水平显著高于对照组（P<0.05）。此外，DB组胸肌肌纤维直径较对照组显著降低（P<0.05）。同时，HDB组显著上调胸肌中苦味受体信号通路相关基因（ggTas2r7、PLCβ2、IP3R3）和蛋白分解相关基因（Atrogin-1和MuRF-1）的m RNA表达水平。总之，日粮中添加DB激活肉仔鸡骨骼肌苦味受体信号通路，促进蛋白质水解进程，抑制骨骼肌发育。