猪卵母细胞体外成熟的发育潜力及核移植重构胚构建方法的研究

为了提高猪体细胞核移植重构胚发育潜力,本研究对体外成熟28h、32h、36h、40h、44h、48h、52h和56h的猪卵母细胞分别进行去核构建重构胚。研究结果表明,成熟44h的卵母细胞核移植后有较高的融合率（58.99%）、卵裂率（67.52%）和囊胚率（22.78%）,而成熟48h的卵母细胞则分别为56.51%、65.73%和15.96%;且卵龄为44h的卵母细胞核移植后分裂率与囊胚率显著高于卵龄为40h、36h、32h、28h的卵母细胞的分裂率与囊胚率（P〈0.05）。卵龄为48h的卵母细胞融合率高于卵龄为52h卵母细胞的融合率（P〈0.05）。同时我们还探讨了不同去核方法（盲吸法、Hochest33342染色法和Spindle-view system）对猪体细胞核移植重构胚发育能力的影响。研究结果发现,盲吸法、Hoechest33342染色法和Spindle-view system法的去核率分别达到76.33%,100.00%和98.40%。Hoechest染色法去核率显著高于盲吸法的去核率（P〉0.05）,而与Spindle-view法去核率没有差异（P〉0.05）。三种方法在融合率和囊胚率方面差异不显著（P〉0.05）,但Hoechest染色法的分裂率较低,差异显著（P〈0.05）。进一步的研究表明,细胞质内注射进行核移植构建重构胚的分裂率和囊胚率分别为68.13%和6.44%;透明带下注射法则为60.37%和8.08%,两者差异不显著（P〈0.05）;两者均可运用于猪体细胞的核移植,这为建立有效的猪体细胞核移植体系提供了参考。     

液相微萃取技术在农药残留分析中的应用研究进展

液相微萃取技术(LPME)是一种新型的样品前处理方法,具有快速、简单、廉价、选择性强、准确度高、溶剂消耗量少、环境污染小等优点,方便与各种分析仪器联用。其具有多种模式:单滴液相微萃取(SDME)、中空纤维液相微萃取(HF-LPME)、分散液相微萃取(DLLME)、悬浮固化液微萃取(SFODME)、连续流动微萃取(CFME)、直接悬挂液滴微萃取(DSDME)等,具有很好的研究潜力和应用前景。对液相微萃取技术在农药残留分析中的应用研究进展进行了综述。     

实时荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌方法的建立

建立了一种检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2)的实时荧光PCR(real-time fluorescence polymerase chain reaction)方法。用Primer Express2.0和Oligo6.0设计针对Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原基因簇中cps2I基因的引物和Taqman荧光探针。通过常规PCR方法扩增得到81 bp DNA片段，克隆到pMD18-T载体，测序表明得到的序列为目的基因片段。在Lightcycler荧光PCR仪上对Ⅱ型猪链球菌的扩增曲线表明，该实时荧光PCR具有良好的特异性，可成功地扩增Ⅱ型猪链球菌，而参考猪链球菌(S.suis)、大肠杆菌(Escherichia coli )、沙门氏菌(Salmonella)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureu)、志贺氏菌(Shigella)、单增李斯特氏菌(Listeria monocytoge)和空白对照都是阴性；该检测方法可达到检测10个细菌的灵敏度，反应过程仅需30 min完成；在两个不同时间检测同一浓度的菌液，每次做20个重复，2次检测所得的Ct (threshold，阈循环)值之间无统计学差异(P > 0.05)，方法稳定性好。该实时荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌的方法可用于出入境检疫和动物防疫监督部门的疫情监测。     

气相色谱法测定硅烷中的杂质氢

本文提出了用气相色谱法采用反吹系统测定硅烷中杂质氢的一种新方法,克服了硅烷对检测器的污染,方法快速、简单,检出限为2.4ppm。     

关于进一步完善水土保持法法律责任的几点认识

在全面了解我国各地经济社会状况和水土保持行政执法情况的基础上,结合实际分析了水土保持法律责任的实施情况及存在的主要问题,提出了完善水土保持法法律责任的构想:一是增加法律责任种类设置,二是加大水土保持行政处罚力度,三是增强法的可操作性。     

适制名优绿茶的早生种——中茶102

中茶102新品种属无性系、灌木型、中叶类早生种,由中国农业科学院茶叶研究所在70年代初从杭州西湖龙井茶区龙井种中应用单株选拔--无性繁殖方法选育而成.该品种于1989～1995年在中国农业科学院茶叶研究所品种园区,以福鼎大白茶为对照(CK1)进行品比试验,并于1992～2000年在浙江金华孝顺农场、湖州农垦场、绍兴御茶村等三地以全国良种迎霜为对照(CK2),进行省级区域试验.目前试验已经结束,现将该品种在品比和省级区域试验中表现的主要优良性状介绍如下.     

茶树未成熟胚组培育苗技术的研究

本文研究了茶树未成熟胚离体培养成苗的培养基、培养条件和试管苗的移植技术要点。从供诱导的8个品种中,成功地培养出近千株试管苗,其中盆栽茶苗500余株,露地栽植的404丛,首批茶树生长高度已达80厘米左右。培养物最多的继代培养已达20次。再生和完整植株在遗传特性上是稳定的。这一技术的研究成功,将对茶树种质资源的保存,提高茶籽,尤其是有性杂交或远缘杂交种子、诱变种子的能育率及诱获一籽多苗具有实际应用价值。     

中西结合治疗牛子宫脱和阴道脱

笔者自1998年3月份以来,按照西医“调节神经功能”采用“补糖、补钙、补充维生素”的方法和中医“劳者温之,损者益之”的治疗原则以及“脏腑辨症、八纲辨证”的道理,根据具体情况采用“补中益气”的方法,共试治各种类型的子宫脱和阴道脱病牛88例,治愈率达95%以上,取得了满意的治疗效果。1治疗原则的制定1.1根据直接原因:胎儿过大,胎水过多,多胎怀孕,产前截瘫、骨软症或努责过度或难产助产时强拉硬拽等皆可使阴道及子宫周围组织弛缓,引起该病。治疗宜促进子宫收缩,尽快促使子宫复旧(即恢复到空怀时的状态)。1.2根据临床症状:病牛横卧、努责不…     

文冠果DREB转录因子家族鉴定及非生物胁迫表达分析

转录因子(TF)对于调节植物靶基因的表达起到关键作用。脱水响应元件结合因子(DREB)是植物特异性转录因子家族,其成员参与调控植物对各种非生物胁迫的反应。然而,DREB家族尚未在油料树种文冠果(Xanthoceras sorbifolium Bunge)中得以鉴定,文冠果是中国北方最重要的耐逆树种之一。因此,本研究旨在以文冠果全基因组测序数据为基础,系统鉴定并表征文冠果中的DREB家族成员,利用转录组测序的方法分析XsDREB基因对于非生物胁迫的特异性响应。在本研究共获得54个文冠果DREB家族成员,它们均编码AP2结构域且大多数成员基因中缺乏内含子,可根据系统发育情况分为6个亚组。此外,RNA-seq结果显示14个XsDREB基因在冷胁迫下上调或下调,8个基因被发现参与盐胁迫响应。本研究结果为进一步研究文冠果DREB基因的功能奠定了基础,并将有利于文冠果的遗传改良。     

文冠果不同密度播种育苗试验

文冠果适应性广,种子含油率高,是我国北方特有的油料树种,但播种苗容易弯曲倒伏,这影响了苗木的质量和生物质能源基地的建设质量.为了确定最佳的育苗密度,培育苗干通直的合格苗木,于2007～2009年进行了9个密度的播种育苗试验.结果表明:播种苗育苗的最佳密度为8 cm×30 cm,8 cm×40 cm,在这两个育苗密度下,...