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以EGFP为报告基因体外电穿孔转染鸡X期胚盘细胞,探讨适宜电转染条件以及影响鸡ES细胞存活率和转染率因素。分离鸡X期胚盘细胞进行培养、传代及鉴定,二代细胞设定不同的电压、脉冲时间、质粒浓度、细胞密度及孵育温度等条件转染。电击后10 min,0.4%台盼蓝染色,血细胞计数板计数,计算存活率。48 h后在荧光显微镜下计绿色荧光细胞数和总细胞数,计算转染率。结果表明:电转染鸡ES细胞的最优化电压为280 v,脉冲时间为75μs,质粒浓度为20μg/mL,转染前4℃、转染后25℃(室温)或4℃各静置10 min,细胞密度调整在1×105个/mL×106个/mL,尽量使细胞处于对数生长期。电穿孔法转染鸡ES细胞是简便有效的方法,利用优化条件转染ES细胞,可以满足进一步实验的要求。 相似文献
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转基因研究已证明鸡是一个很好的试验材料.转基因鸡的研究,极有助于动物生物工程、生物反应器工程和实验模型的发展.虽然它的几个生理特性对有效地进行转基因带来了一定的障碍,但是转基因鸡遗传和生理特性上的各种优势是无可比拟的.目前已从胚胎中获取原始生殖细胞(PGCs)或从成熟公鸡中得到睾丸细胞,建立了胚胎介导转基因系统和睾丸介导转基因系统,这些方法比较有效且有微小的技术改进.本文回顾了以前用原始生殖细胞和睾丸细胞进行转基因鸡的研究,并总结了鸡模型在生物医学和生物工程学上的发展以及在这个领域的成果. 相似文献
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利巴韦林又名病毒唑、三氮唑核苷、三氮核苷、Virazol。是一种广谱、高效的抗病毒药物。对于多种病毒(DNA型和RNA型)都有明显的抑制作用。近几年来,利巴韦林也广泛用于兽医临床上各种病毒感染的治疗。在家禽临床上,已用其治疗法氏囊炎、禽流感对于发病初期的鸡群,采用抗病毒药利巴韦林一定程度上能降低病毒的数量,在感染的同时用药则对鸡群保护效果良好,鸡群的死亡率会有不同程度的下降。为了预防病毒病继发感染,在临床上常将利巴韦林粉制剂和其它抗生素粉制剂配合使用,对于它们配伍使用的稳定性尚未见报道。我们将临床常用浓度的利巴韦… 相似文献
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