lncRNA在乙脑病毒感染PK15细胞过程中的作用研究

本研究旨在初步探索乙脑病毒(JEV)感染PK15细胞后的增殖情况,筛选与病毒感染相关的lncRNA,并对其进行亚细胞定位及靶基因预测。通过免疫荧光试验来检测病毒结构蛋白E的表达情况,采用TCID_(50)法检测PK15细胞中病毒的增殖情况,利用实时荧光定量PCR检测病毒感染后lncRNA的表达水平,在NONCODE数据库对lncRNA进行亚细胞定位,通过starBase、NONCODE、KEGG等数据库对其进行靶基因预测和信号通路分析。结果显示,JEV感染PK15细胞后,24～36 h为病毒滴度指数增长期,感染后36 h病毒滴度已达10~(-5.75) TCID_(50)/mL。PK15细胞在感染JEV 12 h后,lncRNA A、B、C表达水平均无显著变化(P0.05),lncRNA D表达水平极显著下降(P0.01);感染JEV 24、36和48 h后lncRNA A、B、C表达水平极显著上升(P0.01),lncRNA D表达水平极显著下降(P0.01)。lncRNA A主要定位在胞质溶胶,lncRNA B在细胞核和细胞质中均有分布,lncRNA C主要定位在细胞质中,在细胞核中也有可能分布,lncRNA D可能在细胞内呈现广泛性分布。通过靶基因预测和信号通路分析,lncRNA A、B、C的靶基因主要为OAS1、OAS2、OASL、COX1等,lncRNA D的靶基因主要为DST、ND1、ND2、ND4等。信号通路分析发现lncRNA可能通过肿瘤坏死因子(TNF)、NF-κB和Toll样受体(TLR)等信号通路参与病毒感染后的增殖过程。本研究为进一步探索宿主细胞lncRNA对病毒增殖的影响奠定一定的基础。     

不同品种、季节和月龄对公猪精液品质的影响

【目的】探究不同品种、采精季节和采精月龄对法系公猪精液品质的影响,比较不同品种公猪精液的常温保存效果。【方法】选取278头法系杜洛克猪、长白猪和大白猪为试验对象,收集某种公猪站2021年17 960条精液记录数据,采用一般线性模型与方差分析探究品种、采精季节和采精月龄对精液体积、精液密度、精子活力及总精子数的影响;同时于夏季从各品种中分别选取15份精子活力≥90%、前向性运动≥80%精液,稀释后进行为期7 d的常温保存试验,比较不同品种公猪精液常温保存效果。【结果】长白猪精液体积、总精子数均显著高于杜洛克猪和大白猪(P<0.05),杜洛克猪精液密度显著高于长白猪和大白猪(P<0.05),精子活力显著低于长白猪和大白猪(P<0.05)。随着常温保存时间的延长,各品种公猪精液精子活力和前向性运动逐渐降低,其中长白猪精液在夏季常温保存效果最好,杜洛克猪最差。各品种公猪精液体积在秋、冬季均显著高于春、夏季(P<0.05),总精子数春、冬季均显著高于夏、秋季(P<0.05),精液密度在春季显著高于其他季节(P<0.05),各品种公猪精子活力均在冬季最高、夏季最...     

饲喂全株青贮玉米对藏香猪肠道微生物的影响

【目的】探究饲粮中添加全株青贮玉米对藏香猪肠道微生物菌群的影响。【方法】选用日龄和体重((24.26±2.78)kg)相近的藏香猪40头,公母各半,随机分为两组,对照组和试验组,每组20头。对照组饲喂基础饲粮,试验组以30%全株青贮玉米等量替代基础饲粮,饲喂时间为7个月。饲养试验结束后采集粪样共40份,每组20份。利用16S rRNA基因测序技术分析全株青贮玉米对藏香猪肠道微生物组成和结构的影响。【结果】两组共鉴定出19个门、33个纲、67个目、123个科、277个属、524个种。其中厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidota)是藏香猪肠道微生物优势门。试验组肠道微生物Shannon指数显著低于对照组(P<0.05)。利用Wilcoxon秩和检验的方法进行两组比较分析发现,与对照组相比,试验组藏香猪肠道微生物中螺旋体门(Spirochaetota)、纤维杆菌门(Fibrobacterota)、密螺旋体属(Treponema)、乳杆菌属(Lactobacillus)和链球菌属(Streptococcus)相对丰度显著升高(P<0.05);放线菌门(A...     

靶向猪内质网应激通路的microRNAs预测与验证

【目的】预测并验证靶向猪内质网应激通路中关键基因的microRNAs(miRNAs),为进一步研究miRNAs对猪内质网应激信号通路调控提供理论基础。【方法】首先利用伪狂犬病毒(PRV)感染猪肾上皮(PK15)细胞,高通量测序检测差异表达的miRNAs。然后通过TargetScan预测靶向内质网应激通路关键基因ATF6、IRE1、PERK、GRP78、XBP1的miRNAs。构建含有候选miRNAs作用位点的双荧光素酶报告基因重组载体,并分别与miRNA-mimics共转染幼仓鼠肾(BHK-21)细胞,通过测定荧光素酶活性来验证内质网应激通路关键基因与候选miRNAs的靶标关系。然后在PK15细胞中分别过表达候选miRNAs,利用qRT-PCR和Western blot检测候选miRNAs对内质网应激通路关键基因mRNA和蛋白表达的影响。【结果】miRNA测序结果显示,PRV感染后共引起35条miRNAs差异表达。TargetScan预测显示,靶向ATF6、IRE1、PERK、GRP78、XBP1的交集miRNAs为miR-142-5p、miR-145-5p、miR-150和miR-1...     

母猪群非生产天数控制在猪群管理中的重要性

在猪场生产过程中,种母猪的饲养管理是很重要的一个环节,是猪场生产中的动力泵,是猪场的心脏,抓好这一环节,就能保持种母猪良好的体况和较高的繁殖率及利用率;管理好母猪群是猪场获得较高的生产水平和经济效益的坚实基础。如何体现母猪群体管理的好坏,母猪群的非生产天数non-productive days,NPD)的长短是一个很重要的指标。     

褪黑素对脂多糖刺激的滩羊骨骼肌卫星细胞炎性因子表达的影响

试验旨在探究褪黑素（MLT）对脂多糖（LPS）诱导的滩羊骨骼肌卫星细胞炎性反应的影响。选取滩羊妊娠30日龄胎儿为研究材料,使用Ⅳ型胶原酶分离获得滩羊骨骼肌卫星细胞并进行体外培养,添加相应的诱导试剂对滩羊骨骼肌卫星细胞进行诱导分化,利用免疫荧光检测骨骼肌卫星细胞表面标记物CD29、CD44、CD73及Vimentin的表达;在无胎牛血清的培养基中添加不同浓度（0、5、8和10 μg/mL）的LPS培养骨骼肌卫星细胞,利用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）检测白细胞介素-6（IL-6）、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎性相关因子mRNA水平变化,筛选最佳的LPS处理浓度;在无胎牛血清的培养基中添加不同浓度（0.1和0.5 μmol/L） MLT与最佳浓度LPS共培养骨骼肌卫星细胞,利用实时荧光定量PCR检测IL-6、IL-8和干扰素-γ（IFN-γ）等炎性相关因子mRNA水平变化。免疫荧光结果显示,滩羊骨骼肌卫星细胞表面标志物CD29、CD44、CD73及Vimentin表达呈阳性,且具有诱导成肌、成脂和成骨分化的特性。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,不同浓度的LPS处理均可显著增加细胞炎性相关因子基因的表达（P<0.05）,并且8 μg/mL LPS处理时炎性相关因子mRNA表达最强;当MLT与LPS共培养骨骼肌卫星细胞时,与LPS单独处理相比,0.5 μmol/L MLT与LPS共同处理组中IL-6 mRNA表达水平显著降低（P<0.05）。综上表明,MLT具有缓解LPS刺激的滩羊骨骼肌卫星细胞炎性反应的作用。本试验结果为进一步开展MLT缓解LPS诱导的骨骼肌卫星细胞炎性反应的调控机制研究奠定了基础。     

生命之“海”——血液趣谈

血液是人体细胞生命活动之“海”。人的血液包括血浆和血细胞两部分。血液是一种淡黄色的液体。血细胞可分为红血球、白血球和血小板三部分。血小板的主要作用是促进止血和凝血：白血球能抵抗细菌侵入人体内,从而保护人的身体,被人类誉为“人体内的忠实卫兵”;红血球内含血红蛋白,血液可因血红蛋白中所含成分的不同而呈现不同的颜色。     

鸡群常见病变的现场鉴别诊断方法

鸡常见病变的现场鉴别诊断方法,根据禽病的发生发展规律和禽类的生理特征,禽病的临诊诊断可包括流行特点调查,禽群和个体症状的观察以及病理解剖3个方面.由于禽病的复杂性和症状的类同性,通过临诊诊断一般来说,只能作出初诊,要进行确诊必须依靠实验诊断.     

脾虚的证治及家兔实验性脾虚模型的某些生理生化指标测定

脾虚证,在家畜疾病中颇为多见,临床上常因脾胃升降失和、脾胃气虚、脾胃阳虚及中气下陷等病机的不同,而有不同的证型。为了探讨“同证异治”或“异病同治”及其规律性,我们实验观察了益气升降法、益气和胃法、脾肾兼顾法和益气升陷法对脾虚证的调理作用,以及对家兔脾虚模型的某些生理、生化指标的影响,现将结果报告于后。