猪呼吸道综合征的诊断与分析

我省在2002年-2003年曾发生以猪呼吸道病症为主的疫病。主要表现为喘、咳嗽、生长缓慢,剖检以肺的病变为主的传染病,称之为猪呼吸道综合征。又名“复合病因猪呼吸道病”,“多因子猪呼吸道病”,“猪呼吸道复合感染”(PRDC)。本病是世界性的,在世界很多国家都有报道。PRDC是由多因子所致,为了做好此病的诊断与防治,将我们在2年来所做的工作和体会报告如下。     

辽宁地区猪源大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的检测与分析

为了解辽宁地区猪源大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药情况,采用K-B纸片法对65株猪源大肠埃希菌菌株进行6种氨基糖苷类抗生素的药敏试验,同时采用PCR方法对耐药菌株rpsl基因和4种氨基糖苷类钝化酶基因aac(3)-Ⅳ、aad A、aac(6')-Ⅰb-cr、aac C4进行检测及序列分析,并将阳性样品与Gen Bank中登录的序列进行同源性比较。结果显示,辽宁地区猪源大肠埃希菌对链霉素、妥布霉素、新霉素、卡那霉素、丁胺卡那霉素、庆大霉素的耐药率分别为26.2%、15.4%、18.5%、29.2%、4.6%、21.5%;23株耐药菌株rpsl基因检出率为100%;4种氨基糖苷类钝化酶基因aac(3)-Ⅳ、aad A、aac(6')-Ⅰb-cr、aac C4检出率分别为13.0%、8.7%、69.6%、4.3%。以上结果表明,在氨基糖苷类抗生素中耐药性最低的是丁胺卡那霉素,rpsl基因及氨基糖苷类钝化酶基因普遍存在于辽宁地区猪源大肠埃希菌中。     

辽宁地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株ORF5基因的遗传变异分析

为研究辽宁地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的生物学特性及遗传变异情况,通过RT-PCR方法对PRRSV阳性样品的ORF5基因进行扩增,应用DNA Star软件对检测的序列进行比对和遗传变异分析。结果显示,分离的8株PRRSV的ORF5基因全长为603 bp,均属北美型,不同分离株间的核苷酸、氨基酸同源性分别为91.5%~99.0%、88.1%~98.5%;遗传变异分析表明,分离株处于不同的进化分支,但均属于亚群3,为高致病性PRRSV。以上结果表明,辽宁地区主要流行毒株为高致病性PRRSV,在不同地区有不同的PRRSV毒株同时流行,但具有相同的进化来源。     

2013年-2015年辽宁地区猪圆环病毒2型遗传演化分析

为了解2013年-2015年辽宁地区猪圆环病毒2型(PCV2)的遗传变异情况,采用PCR对辽宁地区采集到PCV2阳性病料样品进行全基因组扩增,并应用DNA Star软件进行序列比对和遗传演化分析.结果表明,检测的15株PCV2全基因组全长为1 767 bp和1 768 bp,基因核酸序列同源性为94.4％～99.8％;15株PCV2毒株中有11株属于PCV2b基因型,4株属于PCV2a基因型.结果表明,目前在辽宁地区有多种血清型PCV2同时流行,应该针对优势血清型制定免疫策略.     

猪圆环病毒2型2d基因型毒株的鉴定及全基因组序列分析

辽宁省某市猪场发生疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)传染性疾病,采集病死仔猪肺脏组织和淋巴结,经PCR检测、阳性产物测序、基因组分析,结果表明,该分离株为猪圆环病毒2型2 d基因型(PCV2d),命名为PCV-LNZh W1,全长1 767 bp,与国内外参考毒株核苷酸序列同源性为94.5%~99.9%,与PCV2d基因型的参考毒株位于同一遗传进化树分支。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（JXA1-R株）免疫后在血清中存在时间的报告

本研究应用高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（JXA1－R株）对28～30日龄的仔猪进行免疫,前8周每周采血,8周后每2周采血进行疫苗毒核酸检测,直至免疫后第16周。结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（JXA1－R株）在血清中存在的最长时间约为6周,但有的猪呈现间歇性携带疫苗毒。     

辽宁省猪圆环病毒2型血清学调查与分析

为了解辽宁省猪圆环病毒2型（PCV2）感染情况,对来自辽宁省14个市的59个规模化商品猪场的734份血清、17个种猪场的329份血清、45户农村散养户的146份血清,采用ELISA（酶联免疫吸附试验）方法进行PCV2抗体检测。结果显示,59个规模化猪场中有51个为阳性,阳性率86.4%（51/59）,其734份样品中有351份为阳性,样品阳性率为47.8%（351/734）;17个种猪场中有15个为阳性,阳性率为88.2%（15/17）,其种猪群样品阳性率为47.6%（81/170）,仔猪群样品阳性率为29.6%（47/159）;45户散养户中有23户为阳性,阳性率为51.1%（23/45）,检测的146份样品有58份阳性,样品阳性率39.7%（58/146）。可见,PCV2在辽宁省各地的感染已经很普遍,并且种猪群感染率高于仔猪群,规模场的感染率高于农村散养户。     

辽宁地区猪常见传染病流行病学调查及遗传进化分析

为研究猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)、猪伪狂犬(Porcine pseudorabies,PR)、猪圆环病毒病(Porcine circovirus virus disease,PCVD)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic-Porcine reproductive and respiratory syndrome,HP-PRRS)在辽宁省内的发病情况及致病毒株变异情况,本研究对辽宁地区自2012年至2016年五年内4种猪常见流行病进行流行病学调查,并对扩增阳性样品的主要致病基因进行遗传进化分析。在9600份样品中,CSFV (Classical Swine Fever virus)阳性18例、PRV阳性12例、PCV2阳性10例、HP-PRRSV阳性5例。选取CSFV代表毒株命名为LN01, LN02, LN03;PRV代表毒株LN04, LN05;PCV代表毒株LN06, LN07;HP-PRRSV代表毒株LN08,分别对其进行遗传进化分析。结果表明,CSFV代表株中,LN01与LN02的同源性较高,二者与GD株亲缘关系最近,同源性为99%以上;LN03株与HD株同源性较高为99.5%;PRV代表株中LN04与PV株的亲缘关系最近,同源率为99.4%;LN05与PD株亲缘关系最近,同源率为98.5%;PCV2代表株中LN06与GD株的亲缘关系最近,同源率为99.5%,与HQ 395021亲缘关系最远,同源率为88.4%,LN07与BF株的亲缘关系最近,同源率99.1%;HP-PRRSV代表毒株LN08与参考株GD-SS株的亲缘关系最近,同源率为99.8%。