猪细小病毒不同代次VP2基因序列差异分析

将猪细小病毒NJ-1株在PK-15细胞上传代到35代,利用PCR及序列测定对01代、07代、14代、21代、28代及35代的VP2序列进行了测定,并推导出相应的氨基酸序列;通过对不同代次的毒株核苷酸及氨基酸序列之间的差异性进行了分析。结果表明,不同代次之间具有高度的同源性,其中核苷酸及氨基酸序列同源性分别为99.7%-100.0%、99.2%-100.0%,核苷酸的差异呈现有一定的规律性,随着代次之间的间隔增大其差异也相应增加,但氨基酸序列差异不明显,猪细小病毒核酸呈现较强遗传稳定性。     

黄芪与左旋咪唑对雏鸡免疫功能影响的比较

以黄芪和左旋咪唑作为免疫增强剂，通过检测其对雏鸡抗体水平、体重、脾指数、法氏囊指数的影响，验证其免疫增强效果，并进行比较。试验结果表明，黄芪、左旋咪唑对雏鸡有很好的免疫增强作用，但在促生长方面存在差异。     

自制猪PPV和PRV二联灭活苗对后备母猪免疫效果观察

用自制猪细小病毒和猪伪狂犬病毒二联灭活苗对后备母猪免疫 ,效果观察表明 :猪细小病毒 HI抗体滴度最高达 1∶ 640 ,猪伪狂犬病毒血清抗体中和指数为 1 4 0 0以上 ,实验组母猪均未发生繁殖障碍 ,且平均产健康活仔率比对照组高出 1 .9%。     

麇鹿魏氏梭菌病和巴氏杆菌病混合感染

2003年1月，河南省野生动物救护中心饲养的30只麋鹿，先后有3只青年麋鹿突然发病死亡，临床主要表现为严重败血症、腹泻而衰竭死亡，病程短，病死率高。     

淮南猪IL-2全基因的克隆与遗传进化分析

参照GenBank发表的猪IL-2cDNA基因序列,设计l对引物,将河南地方品种淮南猪脾淋巴细胞在伴刀豆球蛋白A(Con A)的刺激下体外培养27 h后,提取激活淋巴细胞总RNA,进行反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆到pGEM-T Easy载体上并测序.测序结果显示,克隆的HuainanPIL-2 eDNA全长为516 bp,开放阅读框(ORF)包含465bp,编码154个氨基酸,分子量为17.4 kDa,等电点为5.27,疏水氨基酸38.3%,亲水氨基酸42.O%.碱件氨基酸11%,酸性氨基酸23%.此cDNA与已报道的猪IL-2同源性为100%,与猫、牛、鸡、狗、鸭、山羊、马、人、家鼠等的IL-2基因进行比较分析,核苷酸同源性分别为83.7%,82.6%,28.2%.80.6%,29.6%,83.4%,81.3%.82.O%,61.5%.     

中药治疗仔猪黄白痢

仔猪黄、白痢是由致病性大肠杆菌 ( EIEC)引起。其中仔猪黄痢常发生于仔猪出生后 1周以内 ,以1～ 3日龄居多 ,常整窝发病 ,发病率在 90 %以上 ,死亡率可达 1 0 0 %。仔猪白痢多发生于 1 0～ 30日龄仔猪 ,以 1 0～ 2 0日龄者居多 ,发病率可达 30 %～80 %。笔者于 2 0 0 1年春季在西平县用六一散治疗 8窝 92头仔猪黄痢 ,治愈 86例 ,治愈率达 93.48% ;治疗 2 0窝 2 4 0头仔猪白痢 ,治愈 2 34例 ,治愈率达97.5 0 %。1　临床症状1 .1　仔猪黄痢患猪多为 5日龄以内仔猪 ,发病初期有 1～ 2头突然死亡 ,然后波及整窝。病猪多精神不振 ,挤堆 ,排黄…     

沙棘粉和沙棘原浆对小鼠免疫增强作用的研究

试验旨在研究沙棘对中枢免疫器官(胸腺)再发育的刺激作用、沙棘对外周黏膜免疫器官(消化道黏膜和呼吸道黏膜)的免疫增强作用。试验将252只体重相近的健康小白鼠随机分为7组,分别用沙棘固态粉散剂和液态原浆处理小鼠,饲养试验时间为21 d。在第7、14 d和第21 d每组随机处死7只小白鼠,收集盲肠、直肠、空肠内容物,测定各肠段内乳酸杆菌数量;收集盲肠、直肠、空肠及呼吸道气管黏膜表面物质,测定分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量;收集脾脏、肝脏、胸腺称量,测定小鼠免疫器官指数和吞噬指数。在第1、7 d和第14 d每组抽取5只小白鼠,进行小鼠迟发型变态反应试验。结果显示:与对照组相比,其他各组的肠道乳酸杆菌数量、气管sIgA在前中后期均得到显著提高(P<0.05);而肠道黏膜sIgA、免疫器官指数、吞噬指数和迟发型变态反应在前期无显著性变化,中后期变化差异显著(P<0.05)。由此可见,沙棘可以有效刺激小鼠中枢免疫器官(胸腺)的发育;增强外周黏膜器官(消化道黏膜和呼吸道黏膜)的免疫效果。     

猪干扰素α和γ在杆状病毒中共表达及对PRRSV抑制作用

[目的]制备复合型猪干扰素α和γ进行应用抗病毒研究.[方法]本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码猪干扰素α和γ成熟蛋白基因插入供体质粒pFastBacDual,分别置于PH和P10启动子控制下,引入蜂素信号肽(honeybee melittin signal peptide,HBM)基因取代猪干扰素α和γ原有信号肽基因以实现分泌型表达,并在C端分别融合6个组氨酸标签以利于纯化.将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.重组杆状病毒感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的活性.[结果]通过问接免疫荧光、Western-blot证明猪干扰素α和γ重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中均获得表达,表达产物主要分布在培养上清中.通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到3.24×10<'7>U·mL<'-1>.在Marc-145细胞,昆虫细胞上清经2<'-11>稀释能够抑制100个TCID<,50>的PRRSV的致细胞病变作用.[结论]应用杆状病毒表达系统实现猪干扰素α和γ在昆虫细胞上分泌共表达,重组蛋白在细胞上对PRRSV具有抑制作用.     

不同毒株鸡传染性支气管炎病毒与鸡新城疫病毒接种鸡胚联合培养相互作用研究

本实验目的在于探讨不同毒株鸡传染性支气管炎病毒和鸡新城疫病毒混合接种同一鸡胚尿囊腔培养时二者之间的相互作用。分别将按２００倍、５００倍、１０００倍不同浓度稀释的鸡传染性支气管炎病毒Ｆ３株、肾型Ｊ株、Ｈ１２０２８／８６株,Ｈ５２和Ｈ１２０株和１００倍稀释的Ｌａｓｏｔａ鸡新城疫病毒联合接种到１０日龄鸡胚尿囊腔,同时设单独培养作对照,９６小时后收取尿囊液,用对流免疫电泳法检测鸡传染性支气管炎病毒效价,用血球凝集试验检测尿囊液鸡新城疫病毒效价。结果表明,鸡新城疫病毒对鸡传染性支气管炎病毒增殖无明显促进作用,但无抑制现象;鸡传染性支气管炎病毒浓度过大时,对鸡新城疫病毒有一定抑制作用,在适当浓度时二者之间无干扰作用。以ＮＤＶ１００倍ＩＢＶ１０００倍稀释混合作用后联合接种培养对二者效价均无明显干扰,ＮＤＶ血凝效价可达１１ｌｏｇ２,ＩＢＶ对流免疫电泳沉淀效价可达９ｌｏｇ２,效果最佳。联合培养省时、省力、节约鸡胚损耗。     

3个品种鸡α干扰素基因的克隆与序列分析*

 根据GenBank中鸡α干扰素（IFN-α）基因序列设计1对引物,应用PCR技术直接从鸡肝组织基因组中扩增罗曼鸡、海兰鸡及固始鸡α干扰素基因,并进行克隆和测序。结果表明,获得了3个品种鸡IFN-α全基因序列,长度均为582bp,编码193个氨基酸残基。3个品种鸡IFN-α基因及推导的氨基酸序列比较结果显示,海兰鸡和罗曼鸡IFN-α基因序列完全一致,而固始鸡与海兰鸡和罗曼鸡IFN-α基因核苷酸同源性99.3%,有4个碱基发生非同义变异,氨基酸同源性为97.9％。克隆的3个品种鸡IFN-α基因序列与GenBank上发表的7条鸡IFN-α基因序列进行比较分析发现,核苷酸同源性在98.1%～100%之间,氨基酸同源性在96.9%～100%之间。