核桃CM基因家族鉴定及表达分析

【目的】鉴定分析核桃（Juglans regia L.）分支酸变位酶（chorismate mutase,CM）家族基因，为解析莽草酸途径（shikimic acid pathway）代谢调控的分子机制提供参考。【方法】基于核桃全基因组数据，通过HMM搜索对CM家族成员进行筛选鉴定，并利用实时荧光定量PCR分析其在核桃不同组织中的表达模式。【结果】核桃基因组内共鉴定到7个CM家族基因，分布于6条染色体上，JrCM6与JrCM7位于同一条染色体，其余基因分别位于不同的染色体上。各基因均含有5～6个外显子，结构保守。预测表明，核桃CM均为亲水性蛋白且定位于叶绿体上，其中JrCM5含有信号肽。除JrCM4外，其余成员均无跨膜结构。蛋白质三维结构预测结果显示核桃CM家族蛋白与模板蛋白AtCM1间具有较高的相似性。系统进化分析显示，植物CM蛋白可分为4个大组，核桃CM蛋白聚集在第Ⅱ和Ⅳ分支上。其中JrCM2和JrCM5聚集在第Ⅱ支系，与胡杨CM同源蛋白Potri.T174200的亲缘关系较近；JrCM6、JrCM7、JrCM4、JrCM1及JrCM3聚集在第Ⅳ支系上；JrCM6、JrCM7和Jr...     

豆浆脂肪氧合酶测定方法的优化及酶动力学的研究

本文以前人所确定的大豆中LOX酶活力测定方法为基础,对生豆浆中LOX活力测定方法进行稳定性方面的优化,研究热处理过程、不同浓度豆浆对LOX活力的影响,并确定LOX的最大反应速率、米氏速率常数和不同金属离子抑制剂及激活剂等酶反应动力学参数,研究结果表明:待测样品稀释300倍时,LOX活力值的变化趋势较为明显,且结果稳定;对10个不同地域大豆进行制浆,在300倍稀释倍数下测定不同加热温度的豆浆发现,LOX活力在40℃时最高,当加热至80℃时完全失活,故选择对LOX测定方法进行样品稀释300倍,加热至40℃的优化处理。优化后的方法较其它已报到方法相比,能够快速、准确地测出不同豆种所制豆浆中LOX活力值,且试验结果重复性好,稳定性高。通过对LOX酶促反应动力学的研究,确定了LOX酶促反应最大反应速率V_(max)=1. 99ΔA·min~(-1),R~2=0. 942 8,米氏速率常数K_m=452. 49μmol·L~(-1);金属离子中,钙离子、镁离子对LOX起抑制作用,当锌离子在浓度为0. 002 mol·L~(-1)时,对LOX起抑制作用,而当锌离子浓度大于0. 004 mol·L~(-1)时,则对LOX起激活作用。     

应用多重RT-PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒

建立了多重RT-PCR同时检测甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)和高梁花叶病毒病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的技术体系,该体系可有效地对甘蔗田间植株和试管苗进行检测.根据引物之问的互补性及引物的Tm值筛选多重PCR引物.确定适宜的PCR缓冲液的...     

海南甘蔗病毒病的调查及其病原分子鉴定

 海南是我国重要的甘蔗生产省份之一,但其甘蔗主要种植区感染病毒的种类和数量尚不十分清楚,且海南甘蔗花叶病病原病毒缺乏分子水平的系统鉴定。为明确海南甘蔗病毒病的种类、数量、分布及危害情况,本研究拟建立较为完整的甘蔗病毒病检测技术体系,对海南甘蔗病毒病展开调查,为甘蔗抗病毒基因工程及健康种苗发展提供参考。     

修枝对云南松林分结构及生长影响的分析

为了解修枝对云南松人工幼林林分结构和生长的影响,对宜良禄丰村林场尖山林区1 m×2 m×5 m非均匀密度控制营造10年生人工林,采用L4(23)正交设计(增加不修枝和重度修枝的2个对照)开展不同修枝方式和强度的试验,并于修枝前及修枝2 a后开展林分调查。结果表明:修枝前后林分径阶分别为2~14 cm和2~16 cm,8、10和10、12 cm径阶是构成林分此2个阶段的主要成分;修枝后,正交试验修枝4个处理组合的林分平均胸径、树高、单株材积分别为增加23.4%~28.7%、28.6%~34.2%、83.6%~100.3%,不修枝的此3个指标分别是21.9%、20.2%、68.9%,重度修枝的则分别为20.3%、21.4%、63.4%;以上3个指标增长率最大的都为手锯修枝保留3轮侧枝组合的,且正交试验修枝的均高于不修枝和重度修枝的。适宜的修枝方式及强度组合极显著地促进云南松幼林的生长。     

日光节能温室不同温度对黄瓜产量及其生理指标影响的研究

本试验采用三种温度处理,研究黄瓜产量、转化酶、IAA、叶绿素变化规律.结果表明不同处理的产量存在极显著差异.结瓜期各个处理IAA、转化酶、叶绿素变化趋势基本一致,在含量和活性上存在差异,基本趋势是C处理大于B处理,B处理大于A处理.     

北方地区低压输水管道淤积的原因及防范措施

低压输水管道的大面积推广应用,给改善农田水利基础设施条件、加快新型农田灌溉技术应用、减少水资源浪费等提供了有力支撑。但低压输水管道投入运行后,出现了不同程度的淤积现象,制约着农田水利设施灌溉作用的有效发挥。本文就北方地区低压输水管道淤积的原因进行分析,提出了严把管道材质、合理选择管径、规范管道连接、设计缓冲积沙池、定期高压清理等防范措施。     

不同基质与激素组合对云南松穗条扦插生根的影响

以2年生云南松(Pinus yunnanensis)实生苗的当年生顶梢为扦插穗条,采用L9(34)正交设计开展IBA和IAA不同浓度混合溶液处理穗条扦插于3种基质共11个处理组合(2个对照)的试验。结果表明,除未生根的4个处理组合以外,其余7个处理组合的生根率为5.6%~40.0%,1~3级根数为1.8~2.4、5.6~16.4和0.4~5.0条/株,1级根直径和根长分别为0.57~2.14 mm和13.6~18.5 cm,2和3级根长则达3.2~5.0和2.0~3.1 cm。处理组合间除1级根数和3级根长外,其余6个根系指标均达到显著(P0.05)或极显著差异(P0.01)。1份松树皮与2份菌根土的基质能提高扦插生根率及促进根系生长和发育;0.35 g/L的IAA处理穗条对促进根系发育有显著影响(P0.05),0.16 g/L的IBA则对促进1级根发育与生长有极显著影响(P0.01)。A2B3C1(基质为1份松树皮与2份菌根,0.5g/L IAA,与0.16g/L IBA的混合激素溶液)组合效果最佳,其生根率达到40.0%。     

机械制造和机械设计的创新思维

根据相关的创新发展设计,对一系列的相关机械设计思路进行有效化的分析,逐步提高综合性创新思维认识管理,从创新思维中逐步完善各项设计能力控制过程,按照自身的特色机械设计过程完成有效化的创新思路认识。     

香蕉条斑病毒ORFⅠ、ORFⅡ在大肠杆菌中的原核表达和自激活特性的鉴定

目前,香蕉条斑病毒所有3个ORF表达产物功能均不明确,通过双杂技术研究病毒未知蛋白与宿主蛋白的互作,可以初步推断未知蛋白的功能。本实验旨在构建香蕉条斑病毒ORFⅠ和ORFⅡ在细菌双杂系统中的诱饵质粒。首先以课题组保存的连接有香蕉条斑病毒河口分离物全基因组的pMD-18T载体DNA为模板,经过PCR扩增,切胶回收,并通过与带有λcI基因的pBT载体共同双酶切及T4连接酶连接后,得到与λcI基因融合表达的重组载体pBT-ORF1和pBT-ORF2。转化大肠杆菌XL1-BlueMRF＇报告菌株,用IPTG（0.1mmol/L）诱导目的基因片段表达。Westernblotting结果表明,ORF1-λcI和ORF1-λcI两种融合蛋白均成功表达,且大小与预期一致。之后,pBT-ORF1及pBT-ORF2分别与空质粒pTRG共转化XL1-BlueMRF＇报告菌株,pBT空质粒和pTRG-Gal11p共转化作为阴性对照。结果显示pBT-ORF1及pBT-ORF2均无自激活现象,可以进行后续的细菌双杂工作。本实验为BSV与宿主的细菌双杂系统的建立及蛋白组学的研究奠定了基础。