小反刍兽疫病毒F蛋白抗原位点的克隆与表达

目的表达小反刍兽疫F蛋白的抗原位点用于检测与预防。方法用DNAStar分析小反刍兽疫的抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中PPRV的F基因的抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中,经ITPG诱导表达PPRVF基因的抗原位点;用SDS-PAGE和Western-Blotting分析抗原位点蛋白的表达。结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-F35-111(pZLW013)、PET-28b-F143-485(pZLW014)和PET-28b-F323-485(pZLW015)酶切后,均出现与预期相符的片段;DNA测序表明插入的片段的序列与小反刍兽疫F基因的抗原位点序列分别完全一致,其大小分别为251bp、1053bp和514bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和West-ern-Blotting分析,证明小反刍兽疫抗原位点F35-111没有表达、抗原位点F143-485和F323-485得到表达。结论成功表达了PPRVF基因的两段抗原位点蛋白,为日后检测与预防工作奠定了基础。     

猪繁殖与呼吸综合征基因免疫的初步研究

将猪繁殖与呼吸综合征病毒的主要免疫蛋白基因ORF4和ORF5及ORF5和ORF7基因分别共同克隆到真核表达载体pIRES1neo中构建重组质粒,称为pIRESorf5/4和pIRESorf5/7。添加脂质体作为佐剂的表达质粒免疫BABL/c小鼠,经过三次免疫和采取血清,通过ELISA检测,其中pIRESorf5/7表达质粒产生较强的免疫应答,为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒基因免疫应答以及研制基因疫苗奠定基础。     

北部湾经济区干旱灾害风险评价

利用信息扩散风险分析模型计算了北部湾经济区的水资源干旱风险率,结合Mann-Kendall趋势检验法、年内分配不均匀系数、集中程度等方法对北部湾经济区6市水资源干旱灾害风险的时空变化特征进行了综合评价。结果显示,①1953—2010年崇左市和防城港市干旱风险率呈上升趋势;南宁市、玉林市、北海市和钦州市干旱风险率呈下降趋势。②1980年以来,北部湾经济区的的干旱风险以上升为主。③南宁市、崇左市的多年平均干旱风险率比北部湾经济区其他城市大。④除了崇左市,其他5市降雨量年内分配不均匀性和集中程度均有上升趋势,会增加北部湾经济区的干旱风险。     

麋鹿重组朊蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定

为研制鹿慢性消耗性疾病(chronic wasting disease,CWD)单克隆抗体,本研究以原核表达后经纯化的麋鹿重组成熟朊蛋白(PrP^c)为免疫原免疫PrP^c基因敲除小鼠(PrP^c-null mice)。两次加强免疫后,利用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,采用3次有限稀释法实现杂交瘤细胞的亚克隆,筛选出5株能稳定分泌针对麋鹿重组成熟朊蛋白特异性单克隆杭体(McAbs)的杂交瘤细胞株5A5、3B2、6D12、5E3、1F5,其腹水ELISA效价均达到1∶10000以上。经鉴定,5株单抗均为IgG抗体,5A5、6D12、5E3株为IgG1亚类,3B2、1F5株为IgG2a亚类。Western blotting鉴定结果表明,获得的McAbs均能特异性识别麋鹿重组成熟朊蛋白和健康麋鹿脑组织匀浆中的PrP^c。本研究制备了CWD腹水McAbs,同时也为CWD的研究及其诊断方法的建立奠定了基础。     

科技扶贫的实践与分析

蒲城县是国家级贫困县,原任乡富王、程家两村是省计委“两联一包“贫困村,也是我们西北农林科技大学科技扶贫基点,四年共引进该校小麦、玉米、棉花、杂果、牧草等优良品种20多个,引进植保、优果栽培、施肥、节水、秸秆还田等高新技术10余项.贫困村的经济面貌发生了很大变化,提前二年脱贫,人均年收入由原来扶贫前的不足600元提高到1 200元,部分贫困户达到1 900.6元,每年人均递增239.7元,出现跳跃式发展新格局.……     

短季棉品种及密度比较试验

为了给麦棉两熟区及麦棉套种区提供生育期较短的适宜品种，1999～2000年在蒲城基点对省内选育的秦荔534、陕2786早熟品种及外引的荷泽839—27、中375、中10、中427进行了品比和密度试验。结果表明，山东荷泽839—27，中375分别比CK中427增产57.46%和11.97%，且农艺性状良好。不同密度试验结果表明，密度以每667m     

天然气管道三种碰口作业方法及其确定

以靖西天然气长输管道改扩建中碰口作业实践为例,概述了停输带气微正压、停输置换不带气及不停输带压封堵三种碰口作业方法及其具体实施过程。通过对比分析,提出了这三种管道碰口作业在现场施工时应注意的问题,认为应针对管道对口焊接的目的性、时间性、焊接位置和下游用气情况,根据高效、安全、经济的原则来合理确定管道的碰口作业方法。     

猪感染尼帕病毒的流行特点及防控

尼帕病毒病是一种新发人兽共患传染病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒（Nipah virus,NiV）,其在猪群中具有高度传染性,人感染后死亡率达40%～75%。NiV主要通过猪只间的直接接触传播,也可通过设备、车辆、衣服、靴子以及犬、猫等机械携带传播;猪是NiV传播的放大器,主要通过呼吸道飞沫或被感染组织将病毒传播给人。果蝠是NiV的天然宿主,因此养猪场选址要远离果树种植区。目前还没有批准的人用或兽用尼帕病毒病疫苗或药物,但多种疫苗候选株在动物模型中显示出良好的保护效果,包括病毒活载体疫苗株、病毒糖蛋白亚单位疫苗株、颗粒样病毒疫苗株等;成功防控NiV感染的关键是做到早发现,在NiV传入高风险地区,对猪群持续进行血清学监测,并对猪场进行严格生物安全管理。本文结合已暴发的猪群尼帕病毒病疫情及人间疫情,探讨猪感染NiV的流行特点,并通过分析暴发原因提出防控措施,以期为猪群中防止该病发生及突发疫情时的应急处置提供参考。     

汽车风噪声产生机理研究

阐述了车辆风噪声的重要性,并对风噪声进行了分类和总结,对各项风噪声的产生机理进行了分析和探讨,找出了风噪声的主要来源,为细化汽车设计和试验分析提供了重要的理论基础。     

用重组核衣壳蛋白ELISA检测PRRSV抗体的研究

ＰＲＲＳＶ重组Ｎ蛋白ＥＬＩＳＡ检测人工感染猪血清７５份,与ＩＤＥＸＸ公司ＥＬＩＳＡ试剂盒及ＩＦＡ的符合率分别为９７．３％和１００％。检测疫苗免疫猪血清,阳性率１００％。在免疫后６ｄ就能检出抗体,比ＩＦＡ敏感。检测８５份我国田间猪血清,阳性率１８．８％。