马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白真核表达载体的构建与瞬时表达

将马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白基因GL插入真核表达载体pVAX1中构建真核表达载体pVAX1-GL，酶切和测序结果表明构建是正确的，用脂质体转染试剂将其转染BHK-21细胞并通过问接免疫荧光试验检测其在体外的表达情况，结果在转染的细胞表面观察到绿色荧光，证明基因得到了表达，而对照则无绿色荧光，本研究为马动脉炎基因疫苗的研究奠定了基础。     

高脂膜在地膜棉上应用技术

高脂膜类物质国际上作为蒸腾抑制剂 ,使植物增强抗旱、抗寒能力 ;并可用来提高植物苗木移栽的成活率 ,还有增产作用。我国 1 997年开展高脂膜防病试验示范以前 ,未见过报导和记载 ;经过防病应用研究和示范 ;目前 ,高脂膜已成为一种新型的植物保护剂。高脂膜不同于常规的杀菌剂和杀虫剂等农药 ,不但可减少或根除化学农药的公害 ,而且还可获得特殊的效果。我们从 1 983年开始用高脂膜 (北京农业大学植保系供给 )防治棉花烂铃病的研究 ,逐渐扩大研究范围 ;研究结果证明不仅对烂铃防治有明显的效果 ,并对棉苗叶病、蚜虫、蓟马的防治和预防晚霜冻…     

SYBR Green Ⅰ模式荧光RT-PCR检测新城疫病毒

针对新城疫病毒（NDV）F基因保守区内的核苷酸序列设计1对引物,以此对引物和标准NDV毒株（含NDV强毒和弱毒）的RNA为模板,建立并优化SYBRGreen Ⅰ模式荧光RT-PCRNDV检测方法.如果待测样品扩增产物的Tm值和阳性对照的Tm值相差在2℃范围之内判为阳性.此法比文献报道的普通RT-PCR法更敏感,但仍低于鸡胚接种分离病毒法.     

伪狂犬病病毒gE囊膜糖蛋白主要抗原表位区基因的原核表达

参照GenBank上公布的伪狂犬病病毒gE基因序列设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含gE主要抗原表位编码区的564 bp的片段,扩增产物克隆于pMD18-T vector中,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游,构建的原核表达质粒pET-gE在大肠杆菌BL21中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示:表达产物分子质量为38 ku,以包涵体的形式存在,表达产物用His亲和层析柱进行纯化。Western blotting分析表明:该蛋白能与标准阳性血清发生特异性反应。结果证明该表达产物具有生物学活性,可作为鉴别诊断的抗原。     

水牛朊蛋白成熟片段基因的克隆与原核表达

【目的】克隆、分析水牛朊蛋白（prion protein，PrP）成熟片段基因，并获取纯化的表达产物。【方法】将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a，并分析其序列；把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3)，鉴定纯化的表达产物。【结果】水牛朊蛋白成熟片段核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其他牛科动物的成熟PrP核酸、氨基酸序列间的相似性分别在97.1%和97.2%以上，并且发现水牛成熟PrP有5个重复序列，编码的氨基酸序列其中有2个九肽和3个八肽重复序列。具有较高的表达水平的PrP融合蛋白被纯化后，用Western印迹实验证明该蛋白具有PrP抗原活性。【结论】首次报道了克隆、分析水牛朊蛋白成熟片段基因，发现水牛成熟PrP有5个重复序列，并获得了具PrP抗原活性的水牛成熟PrP融合蛋白。     

非洲猪瘟病原特征及消毒控制

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起猪的一种以发热和全身各脏器出血为特征的急性、烈性传染病,生猪一旦发生该病,对养猪业和肉食品供应将产生严重危害和影响。本文分析了非洲猪瘟病毒的结构、在介质中的活性、消毒剂的杀灭作用及使用注意事项。做好消毒是防控非洲猪瘟疫情的重要措施。     

单抗介导牛海绵状脑病免疫组化检测方法的建立及其应用

 中国鲁西黄牛重组PrPc成熟蛋白免疫PrPc基因敲除小鼠，利用淋巴细胞杂交瘤技术，经免疫组织化学试验筛选出单抗4C11可特异识别牛海绵状脑病标准阳性牛脑样品上PrPSc核心片段。以单抗4C11为核心试剂，建立了单抗介导牛海绵状脑病免疫组织化学检测方法，并已颁布成为中华人民共和国国家标准GB/T19180-2003（牛海绵状脑病诊断技术）。已应用于中国牛海绵状脑病的持续监测，至2002年底共检测了全国各地3344份牛脑样品，结果全为阴性，且每批次所设的阳性对照样品检测结果均呈阳性，与Roche公司单抗6H4检测结果的符合率为100％。     

养殖池塘的污染与修复技术

池塘养鱼是淡水渔业的主要组成部分,我国也是世界上淡水养鱼最早的国家。池塘由于分布广、水体小、人力易于控制,便于采取综合的技术措施进行高度精养,从而大大提高了单位面积产量。同时池塘养鱼具有投资小、见效快、收益高、生产稳定等特点,因此易于广泛开展,为广大人民群众提供了大量鲜活的富含动物蛋白质的鱼类产品。但随着水产养殖业的不断发展,养殖密度不断加大,一味追求高产高效的养殖措施对养殖水环境(尤其是池塘底部环境)造成了很大的污染,破坏了池塘原有的生态平衡,使得池塘水体中的养殖对象长期处于应激状态,导致其生理功能紊乱,…     

关于稳步发展辽宁柞蚕生产的几点建议

辽宁发展柞蚕生产有得天独厚的资源和气候优势。全省有三分之一的柞林划为蚕场,每年可养柞蚕10万多把,在山区农民的经济收入中所占比重很大。柞蚕是丝绸工业的重要原料,它的蚕丝制品是重要的出口换汇物资。近年来,随着人们生活水平的提高,柞蚕丝制品在国内市场也打开了销路。辽宁省每年出口柞蚕丝制品换汇,占农副产品换汇总额的10%以上。我省在柞蚕育种方面有了很大进展,已选育出辽柞1、