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为建立快速检测鸭坦布苏病毒病抗体的血清学方法,本研究利用鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列将其克隆至原核表达载体pET32a上,建立重组表达pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中。经IPTG诱导得到NS1融合蛋白,融合蛋白均以包涵体形式存在,包涵体经过变性和复性,纯化的坦布苏病毒NS1蛋白作为包被抗原,在最佳检测条件基础上,建立了检测坦布苏病毒病(Tembusu virus disease,简称TVD)抗体的间接ELISA方法。结果在条件优化后抗原最适包被量为1.925μg·孔-1,抗原最佳包被条件为37℃放置1 h后4℃过夜,血清的最佳稀释度为1∶200,最佳封闭时间为1 h,酶标二抗最适稀释度为1∶1 000,显色时间10 min。阴阳性临界值判定标准为0.346。用建立的间接ELISA方法检测禽流感、新城疫、传染性支气管炎、TVD阳性血清样品均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。板内和板间重复试验的最大变异系数分别为6.7%和8.2%,显示该方法具有很好的稳定性。用间接NS1-ELISA方法对81份疑似鸭坦布苏病毒病血清样品进行检测,有43份样品呈现阳性,E-ELISA有48份呈阳性结果,证明该方法具有较高的敏感性。NS1-ELISA方法的建立为TVB的诊断和流行病学调查提供了一种新的方法。 相似文献
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蓟县地处燕山余脉,年平均气温在11.5℃,无霜期198d,年均降水量652.5mm,其中7—9月份降水432.3mm,占年降水量的66.3%。位于北部山区、半山区的下营、罗庄子、许家台、五百户等14个乡镇有丰富的野生酸枣资源,总株数达3000万株以上,坡度20°左右,土层厚30~60cm,具有很大的开发潜力。1997年春罗庄子乡三间房村在酸枣上嫁接蓟州脆枣、冬枣、梨枣共3.2hm2,平均666.7m2接110株。第二年666.7m2产量79kg,第三年及其后依次为308kg、770kg、1155kg。五年平均每6… 相似文献
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对"英格尔"蟠桃果实发育过程中品质相关因子的变化进行研究,旨在对蟠桃果实的品质调控和适时采收提供相关依据.以蟠桃品种英格尔为试材,研究了果实发育过程中纵横径、单果鲜重、可溶性固形物、可滴定酸及抗坏血酸含量的变化.研究表明:新疆英格尔蟠桃果实发育期为盛花后100~110天;果实发育过程中纵横径的变化与单果鲜重变化趋势一致,呈正相关;可溶性固形物含量前期逐渐升高,至70天后开始平稳下降;此外,抗坏血酸含量在果实发育初期增长迅速,盛花后50天时开始下降至90天后略有回升直至采收,而可滴定酸含量则在整个发育期呈逐渐下降趋势;由此认为,英格尔蟠桃在新疆乌鲁木齐地区能较好地保持品种特性,果实适宜的采收时期为盛花后100天左右,口感风味较佳. 相似文献
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46.
通过实地调查,对陆河县建成区域进行园林植物区系研究。结果表明,陆河县建成区植物区系内共有园林植物67科149属215种,主要以泛热带分布区类型为主,其中世界广布类型有18科3属,分别占科属总数的26.87%和2.01%;热带分布区类型有40科123属,分别占科属总数的59.70%和82.55%;温带分布区类型有9科23属,分别占科属总数的13.43%和15.44%。与临近地区相比较,植物区系科的分布类型均以热带分布为主,植物资源丰富度和多样性均较低。建议陆河县在城市园林绿化中,增加城市垂直绿化面积,丰富植物景观层次,提高城市绿化率。此外,在城市绿化中可增加中国特有科属成分,提升城市园林植物多样性,形成区域特色。 相似文献
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蓟县地处燕山余脉 ,在北部山区、半山区的下营、罗庄子、许家台、五百户等 1 4个乡镇有丰富的野生酸枣资源。为了尽快把资源优势转变为经济优势 ,我们于 1 997年开始进行干旱山地野生酸枣嫁接大枣试验 ,为山地野生酸枣资源开发提供了经验。1 试验园基本情况试验园建在蓟县罗庄子乡三间房村南 ,面积 3.2 hm2 ,该地年均温 1 1 .5℃ ,无霜期 1 98d(天 ) ,降水量 6 52 .5mm。土层厚 30~ 6 0 cm,坡度 2 0°左右。嫁接的主要品种为蓟州脆枣、冬枣、梨枣 ,平均 6 6 7m2 (亩 )接 1 1 0株。接后第 2年 6 6 7m2 (亩 )产量 79kg,第 3年 30 8kg,第 4年… 相似文献
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49.
马立克氏病病毒gB与IL-2融合基因载体的构建及表达 总被引:2,自引:0,他引:2
根据已发表的马立克氏病病毒(MDV)血清Ⅰ型与鸡白介素2(IL-2)DNA序列,设计两对引物,用PCR扩增出MDV gB基因和IL-2基因,并克隆入pEGFP-C1载体,构建了载体pC1-gB—IL。通过酶切分离外源基因表达盒,并将外源基因表达盒插入pTK2B质粒,成功构建了转移载体pT-C—gB-IL。将转移载体pT-C-gB-IL转染CEF细胞,培养36—48h后,经荧光显微镜观察,有荧光出现,证明该载体得到表达,并通过Western—blotting鉴定证明MDV gB和IL-2的融合基因得到了有效的表达。 相似文献
50.
【目的】分析秦岭山地主要森林凋落物的化学组分,为应用Yasso07土壤碳模型估算和预测秦岭山地森林土壤有机碳变化动态提供必要参数。【方法】利用醇浸提法和酸碱洗涤法,测定生长于秦岭火地塘的华山松(Pinus armandi)、油松(Pinus tabulaeformis)、云杉(Picea asperata)、华北落叶松(Larix principis-rupprechtii)、锐齿栎(Quercus aliena var.acuteserrata)和红桦(Betula albo-sinensis)6个主要树种非木质凋落物、细木质凋落物、粗木质凋落物中的醇溶性(ESC)、水溶性(WSC)、酸溶性(ASC)和不溶性(NSC)4类化合物的含量。【结果】(1)不同树种凋落物的化学组分含量差异显著(P0.05),针叶树种凋落物中ESC、WSC、ASC和NSC的含量分别为(78.23±39.51)~(102.11±40.48)g/kg、(106.43±36.66)~(144.25±60.02)g/kg、(482.09±73.01)~(507.09±56.58)g/kg和(277.42±25.13)~(314.03±16.08)g/kg;阔叶树种的凋落物中ESC、WSC、ASC和NSC的含量则分别为(111.63±68.24)~(129.99±39.10)g/kg、(158.64±70.36)~(184.96±51.20)g/kg、(452.28±51.95)~(489.56±52.39)g/kg和(232.77±44.44)~(240.17±94.81)g/kg。(2)各树种不同凋落物类型间化学组分含量差异显著(P0.05),非木质、细木质和粗木质凋落物中的ESC、WSC、ASC和NSC的含量分别为(21.27±4.12)~(175.77±24.30)g/kg、(53.30±2.40)~(237.10±29.73)g/kg、(404.23±15.79)~(597.45±4.88)g/kg和(166.11±69.77)~(327.98±4.91)g/kg。(3)聚类分析结果表明,秦岭山地主要树种凋落物可分为两大类,华山松、油松、华北落叶松和云杉这4种针叶树种聚为一类,红桦和锐齿栎这2种阔叶树种聚为一类。【结论】在不同区域应用Yaso07土壤碳模型时,不宜直接采用模型提供的凋落物4类化合物含量参数。 相似文献