DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用

论述了DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用．主要内容包括：利用DNA指纹技术进行亲子鉴定的原理；DNA指纹图谱法亲子鉴定的优点DNA指纹技术在动物亲子鉴定中的应用及其前景；存在的问题．     

延边黄牛体细胞克隆激活条件的研究

从激活前恢复时间、激活方式、激活培养时间等3个方面研究延边黄牛体细胞克隆的适宜激活条件.结果表明:延边黄牛体细胞克隆激活的理想条件为激活前恢复培养25~30 min,采用离子霉素(Ionomycin,Ion) 6-Dimethyaminopurin(6-DMAP)激活方式,激活培养4 h.     

延边奶山羊-绵羊体细胞重构胚融合条件的研究

采用延边奶山羊耳皮肤成纤维细胞为供核细胞,绵羊卵母细胞为核移植受体,构建了山羊-绵羊异质重构胚,探讨了不同融合电场强度、脉冲次数对重构胚融合率及重构胚体外发育率的影响.结果表明,融合电场强度为1 200～1 400 V/cm、融合脉冲次数为2次,是延边奶山羊-绵羊体细胞克隆的适宜融合条件.     

不同受体胞质对延边黄牛体细胞核移植效率的影响

为确定延边黄牛体细胞核移植过程中卵母细胞的最佳去核时期,本试验选取体外成熟22 h的中期(MⅡ期)卵母细胞与体外成熟28 h的末期(TⅡ期)卵母细胞进行化学辅助去核操作,并将去核的卵母细胞作为受体构建重构胚,后期观察发育情况.结果显示,M期卵母细胞的显核率与TⅡ期卵母细胞的显核率无显著差异;但是TⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率均显著高于MⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率.综上所述,卵母细胞体外成熟28 h后的TⅡ期可作为延边黄牛核移植去核操作的理想时期,在TⅡ期卵母细胞中选择化学辅助去核法去核能够提高延边黄牛体细胞克隆的效率.     

核移植胚胎体内外活性氧的产生·危害及清除

对哺乳动物体细胞核移植胚胎体内外活性氧产生的机理,过量活性氧对哺乳动物体细胞核移植胚胎造成的危害,及其清除方法进行了总结,以改进哺乳动物体细胞核移植体外生产的效率。     

哺乳动物胚胎的活性氧来源及其抗氧化机制

活性氧(reactive oxygen species, ROS)与胚胎发育缺陷密切相关,胚胎或其培养的环境都有可能产生ROS,一些外源因子能够使胚胎的ROS产量增加,引起胚胎发育阻滞,这严重地限制了与胚胎相关的研究。胚胎存在着多种抗氧化机制,在实际操作中应结合胚胎发育各时期内部ROS的来源及其抗氧化机制,提高细胞内部抗氧化效率;控制培养条件,完善培养体系,降低外在因素对ROS的诱发作用,更高效地生产体外发育胚胎。     

转抗仔猪腹泻基因α1-盐藻糖转移酶克隆猪的胰岛素样生长因子2表达分析

为探求转基因克隆猪存在早期死亡率高及生长发育异常等原因,本研究首次以转抗仔猪腹泻基因α1-盐藻糖转移酶(fucosyl transferase 1,FUT1)阳性及阴性克隆猪的脾脏、肝脏及腿肌组织为试验材料,利用qRT-PCR技术定量检测影响胎儿及仔猪早期生长发育的印记基因胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)的表达情况,并以普通妊娠分娩猪为对照,分析其差异及变化.结果显示,IGF2基因在3类仔猪中均存在组织表达差异性,其中肝脏组织中表达量最高,腿肌组织中表达量最低.分析发现,IGF2基因在转FUT1阳性克隆猪脾脏组织中的表达量显著高于转FUT1阴性克隆猪(P<0.05),在腿肌组织中则显著低于阴性克隆猪(P<0.05).此外,转FUT1阴性克隆猪的脾脏、肝脏组织IGF2表达量分别极显著低于、高于普通猪(P<0.01).提示IGF2基因的表达变化可能与克隆猪早期生活力弱有关,但与转FUT1基因克隆猪早期死亡率高的关系还需进一步研究.     

β-巯基乙醇对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响

在成熟培养液中添加不同浓度的β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol,β-ME),研究其对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响。结果表明,将卵母细胞置于100μmol/L的β-巯基乙醇的成熟培养液中进行体外培养,其成熟率、卵裂率和囊胚发育率均好于对照和其他处理,说明β-巯基乙醇的最佳浓度适合进行延边黄牛体细胞克隆中卵母细胞的体外成熟培养。     

EDTA-Na、半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟及克隆胚胎体外发育的影响

在成熟液中添加不同浓度的乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)、半胱氨酸,研究两者对延边黄牛卵母细胞体外成熟及克隆胚胎体外发育的影响。结果表明:(1)将卵母细胞置于100μmol/L的EDTA-Na的成熟液中培养,其成熟率和后期发育率均好于其他浓度组;(2)将卵母细胞置于0.56 mmol/L的半胱氨酸的成熟液中进行培养,成熟率和后期发育率均优于其他浓度组。试验结果证明此两种药的最佳浓度适合进行延边黄牛体细胞克隆中卵母细胞体外成熟培养。     

兽药新产品

由于许多兽药生产企业重新考虑本行业的现状和将来,兽药的研究开发投资最近变得缓慢下来。目前兽药研究与生产面临的困难是:销售不景气,研究费用上涨;为满足各种法令要求要支出高额费用;消费者协会对许多新型药品反对等。其它主要的困难是30年前许多兽药新产品是与人用药物研究相联系开发的,现在,大部分兽药开发的全部费用要由兽药生产企业负担。尽管困难重重,还是有很多公司热衷于制订开发研究计划。这是因为他们对新产品和新