生长素及其mRNA在大鼠性腺中的分布

【目的】阐明生长素(Ghrelin)及其mRNA在大鼠卵巢和睾丸中的分布。【方法】取成年SD大鼠的睾丸和卵巢,制成石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法,分别检测Ghrelin和Ghrelin mRNA在大鼠性腺组织中的定位。【结果】雄性大鼠睾丸间质细胞、支持细胞、初级精母细胞、次级精母细胞中均有Ghrelin分布,而精原细胞、精子细胞、肌样细胞中均无Ghrelin分布;Ghrelin mRNA的分布规律与Ghrelin一致。在雌性大鼠卵巢中,Ghrelin主要分布在黄体细胞、卵巢门间质细胞、卵母细胞上;Ghrelin mRNA在黄体细胞、卵巢门间质细胞、原始卵泡、初级卵泡的颗粒层细胞、次级卵泡的卵泡膜层细胞和颗粒层细胞中均有分布。【结论】Ghrelin及其mRNA在大鼠性腺中均有分布,可能对大鼠性腺的发育及其功能有一定的调控作用。     

TMPD降解菌Klebsiella oxytoca的鉴定

从疯草生长的土壤环境中分离并筛选出一株TMPD降解菌LF-1,通过形态学观察、生理生化特征测定和16S rDNA序列同源性分析对其进行了鉴定.结果表明:LF-1的形态及主要生理生化特征与产酸克雷伯氏杆菌一致,而且与产酸克雷伯氏杆菌(DQ226215)的16S rDNA序列同处于一个最小的分支,同源性达到99.52%.由此确定TMPD降解菌LF-1属于产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca).     

哺乳动物体细胞核移植胚胎发育中表观重编程的研究进展

体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer,SCNT）是一种能将已分化的体细胞重编程为全能胚胎的繁殖生物技术,在良种扩繁、濒危物种保护和治疗性克隆等方面有着广泛的应用前景,但极低的克隆效率、克隆动物胎盘异常、出生后胎儿畸形等严重限制了该技术的实际应用。造成克隆效率低和胚胎发育异常的主要原因是供体核表观遗传重编程错误或不完全。1958年,将非洲爪蟾（Xenopus laevis）幼体肠细胞核移入去核卵母细胞,获得了第1例SCNT动物个体;1986年,通过电融合1个卵裂球与去核卵母细胞成功获得了3只存活的羔羊;1997年,将成年母羊的乳腺上皮细胞与去核卵细胞电融合,获得首个SCNT哺乳动物"多利",开启了克隆时代,目前牛、小鼠、山羊、猪、欧洲盘羊、家兔、家猫、马、大鼠、骡子、狗、雪貂、狼、水牛、红鹿、单峰骆驼、食蟹猴等相继成功克隆,其中最引人瞩目的是2018年食蟹猴的成功克隆。作者通过将SCNT胚胎与受精胚胎的发育进行对比,阐述了SCNT过程中DNA甲基化、组蛋白修饰、基因组印迹、染色体状态等的重编程过程和缺陷,并从表观修饰剂、组蛋白去甲基化酶、抑制Xist表达、补充鱼精蛋白和精子RNA方面探讨单独或联合消除表观遗传重编程障碍对克隆效率的影响。随着低样本量测序技术的发展和完善,人们能够在SCNT胚胎中检测到更详细的全基因组表观遗传修饰图谱,进一步揭示SCNT胚胎表观遗传重编程中的缺陷,为提高克隆效率提供了线索。通过上述内容的阐述,希望为后续开发联合消除多种表观遗传障碍而提高克隆效率的策略和思路。     

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对哺乳动物生殖影响的研究进展

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶多酚中含量最多的一种儿茶素类物质,它具有良好的抗氧化、抗突变、防癌抗癌等一系列生物活性。本文就近几年EGCG对动物生殖影响研究进行了综述,以期为EGCG在动物生殖方面的开发和利用提供理论依据。     

fat-1基因脂肪组织特异性表达载体的构建及其山羊转基因细胞系的建立

旨在构建一种筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的载体,将其转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定整合fat-1基因的转基因细胞系。首先将人工合成的fat-1基因连接至L28-Wnt10b载体(1种带有小鼠脂肪组织特异性启动子Fabp4的载体)上,构建成fat-1基因脂肪组织特异性表达载体L28-fat1;同时经多次克隆构建成1种筛选标记可全部去除的骨架载体MCS-3s-LoxP-RFP;然后,利用Hind III和Not I对上述2种载体进行双酶切,接着进行连接,构建出筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的表达载体。采用脂质体介导的方法转染山羊胎儿成纤维细胞,通过G418筛选转基因细胞。酶切鉴定及PCR检测结果表明,成功构建了3s-LoxP-RFP-FABP4-fat1表达载体,并首次获得了脂肪组织特异性表达fat-1基因的山羊胎儿成纤维转基因细胞系,为将来通过体细胞核移植创制脂肪组织特异表达fat-1基因的优质肉用转基因山羊新材料奠定了基础。     

罗勒水提取物涂膜对珍珠番石榴耐藏性的影响

[目的]探究罗勒水提取物涂膜对珍珠番石榴耐藏性的影响,筛选出适合珍珠番石榴采后保鲜的罗勒水提取物最佳浓度,为番石榴的采后贮藏保鲜提供技术参考.[方法]以玉米粉、地瓜粉和罗勒水提取物制成3个浓度(2.5%、5.0%和7.5%)的涂膜液,分别浸泡番石榴果实3 min,以蒸馏水浸泡果实3 min为对照(CK),各处理果实置于室温条件(20~25 ℃、相对湿度40%~60%)下贮藏,每3d测定1次果实的生理指标、贮藏品质及果皮叶绿素,并统计好果率和失重率.[结果]2.5%、5.0%和7.5%的罗勒水提取物涂膜对番石榴采后贮藏期间的呼吸强度、质膜相对透性和过氧化物酶(POD)活性均有明显抑制作用,同时提高过氧化氢酶(CAT)活性,有效保持番石榴外观品质,减缓水分含量下降,以5.0%罗勒水提取物涂膜的保鲜效果最佳.番石榴果实贮藏至第12d时,CK果实的可溶性固形物(TSS)、维生素C(Vc)和蛋白质含量分别下降38.24%、34.57%和28.19%,好果率仅为52.00%,失重率达26.10%;而5.0%罗勒水提取物涂膜处理果实的TSS、Vc和蛋白质含量仅分别下降15.69%、16.05%和5.69%,好果率为88.00%,失重率为9.25%,比CK延长贮藏时间6d.[结论]罗勒水提取物涂膜能有效保持番石榴果实原有的风味品质,延长贮藏时间,且以5.0%罗勒水提取物涂膜的保鲜效果最佳.     

应用Solexa测序技术挖掘山羊卵巢组织microRNA

【目的】旨在构建、分析山羊卵巢组织miRNA表达谱,为进一步研究特定miRNA与山羊卵泡发育及性激素分泌等相关生殖活动的关系奠定理论基础。【方法】首先从山羊卵巢组织总RNA中分离小片段RNA,然后进行Solexa测序和生物信息学分析,最后利用q-PCR技术验证miRNA在山羊卵巢组织中的表达。【结果】共鉴定出508个山羊卵巢组织表达的miRNA和19个对应的miRNA*,这些miRNA在哺乳动物（绵羊、牛、猪、马、狗）进化过程中高度保守;q-PCR验证了8个miRNA在山羊卵巢组织中的表情况,定量结果与测序结果一致。【结论】成功构建了山羊卵巢组织miRNA表达文库,山羊卵巢组织miRNA表达丰富且其表达量各异。     

茶文化在当代园林艺术中的创新性应用研究

我们必须认识到,虽然茶文化对整个当代园林艺术的创新发展有着重要的推动力,但是整个元素应用之间并不能盲目的叠加,应该从弄清其真实内涵的前提之下,实现两种文化理念和价值元素的有效融合。本文拟从当前当代园林艺术的设计状况与诉求分析入手,结合茶文化体系的价值内涵表达,通过融入当代园林艺术设计过程中的创新性不足,从而分析当代园林艺术中茶文化的创新性应用思路。     

溴隐亭与孕激素配合促性腺激素诱导泌乳绵羊发情机理的研究

【目的】比较不同方法诱导泌乳期母羊发情的效果,同时通过测定血清中激素变化规律研究诱导发情机理。【方法】将35只泌乳60 d的小尾寒羊随机分为5组(n=7),第Ⅰ和第Ⅱ组分别放置含有5 mg和2.5 mg溴隐亭的炔诺酮阴道缓慢释放装置(NRID),第Ⅲ组放置NRID后的第3,4天各口服溴隐亭2.5 mg,第Ⅳ组仅放置NRID,以上4组在去除NRID时配合促性腺激素处理,第Ⅴ组为对照组。在处理的0,3,6,9,13,15,17 d早晨8:00采血,分离血清,放射免疫分析法测定血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、促乳素(PRL)、孕激素(P4)、雌激素(E2)的浓度。【结果】第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组诱导泌乳母羊发情率分别为100%,71.4%,57.1%和57.1%。第Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组发情羊血清中FSH浓度有缓慢升高的趋势,15 d时FSH浓度高于对照组;第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组发情羊血清中PRL浓度迅速下降;第15天时,第Ⅰ组和第Ⅱ组发情羊血清中E2浓度迅速升高到95.34和117.55 pg/mL,显著高于同组13 d以前的E2浓度,其余3组发情羊血清中E2浓度在发情期间无明显变化;第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组发情羊血清中P4浓度在发情时显著降低,达到基础水平;各组发情羊血清中LH浓度在试验期间无规律变化。【结论】使用溴隐亭和孕激素并配合注射促性腺激素能有效诱导泌乳期小尾寒羊发情,溴隐亭以阴道缓释给药的方式较好。