去势对公猪生殖轴上Ghrelin和功能性Ghrelin受体mRNA的影响

【目的】探讨手术去势(阉割)、免疫去势对公猪下丘脑-垂体-睾丸轴上Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体1a mRNA表达的影响。【方法】将21头公猪随机均分为免疫去势组、未去势组和手术去势组,免疫去势组于9周龄初次接种免疫去势疫苗,17周龄加强免疫;手术去势组在仔猪出生7d内进行阉割去势;未去势组不作任何处理。25周龄时屠宰所有公猪,取下丘脑、垂体和睾丸组织,以β-actin为内参基因,采用实时荧光定量PCR法检测公猪下丘脑-垂体-睾丸轴Ghrelin及其受体mRNA基因的相对表达量。【结果】手术去势、免疫去势和未去势公猪下丘脑Ghrelin及其功能性受体mRNA基因相对表达量的差异不显著(P0.05),未去势公猪垂体Ghrelin mRNA的相对表达量显著低于手术阉割去势公猪(P0.05),免疫去势公猪睾丸中Ghrelin受体mRNA的相对表达量显著高于未去势公猪(P0.05)。【结论】公猪生殖轴存在Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体mRNA,且手术阉割去势导致垂体中Ghrelin mRNA的相对表达量增加,免疫去势增加了睾丸Ghrelin受体mRNA的相对表达量,提示Ghrelin可能对生殖轴有调节功能。     

慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白

 试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系。取成年男性包皮皮肤的皮下组织,分离培养人皮肤成纤维细胞,分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。结果显示,来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形,具有快速的增殖和稳定的生长性能。脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定,阳性细胞表达率低,转染后的人成纤维细胞变得更为细长,细胞生长速度降低。慢病毒载体介导人皮肤成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白,转染后细胞生长性能和形态没有变化,经过多次传代和冻存复苏对人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达没有影响,通过流式细胞仪对慢病毒介导表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞检测显示,绿色荧光蛋白表达阳性率为99.85%,并且表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞细胞均一程度为76.05%。试验证实了慢病毒载体能够高效稳定介导人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。     

GHS-R1a在大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴上的定位及其mRNA的周期性表达

取成年SD大鼠的下丘脑、垂体、卵巢组织制成石蜡切片,采用PV-9000两步法免疫组织化学检测GHS-R1a在下丘脑-垂体-卵巢轴上的定位.实时荧光定量PCR检测GHS-Rla mRNA在不同发情周期大鼠F丘脑-垂体-卵巢轴上的表达.结果表明:GHS-R1a主要分布在下丘脑的弓状核、腹内侧核、正中隆起等,腺垂体的嗜色细胞...     

梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及SRY-PCR法快速性别鉴定

对梅山猪胎儿成纤维细胞的分离培养及性别快速鉴定进行研究,为开展猪体细胞克隆、诱导多能干细胞获取及转基因等提供素材。通过取组织块培养法和胰蛋白酶消化培养法均成功得到梅山猪的胎儿(胎龄35 d)成纤维细胞,取其中7个梅山猪(msz4、msz5、msz6、msz9、msz11、msz14和msz15)胎儿的原代成纤维细胞,在传代培养至第5代时收集贴壁生长的细胞,提取基因组DNA。再利用根据SRY及ZFY/X设计的共2对引物进行PCR反应,扩增后进行琼脂糖凝胶电泳,出现166 bp和445/447 bp两条带的为雄性,只有445/447 bp一条带的为雌性。结果表明梅山猪的细胞系msz6、msz9和msz14为雌性细胞系,而msz4、msz5、msz11及msz15为雄性细胞系。试验结果证明了该方法可应用于鉴定不同培养方法获得猪成纤维细胞的性别,可为试验后期的转基因细胞制备提供性别依据。     

不同施肥方式对农田土壤CO2和N2O排放的影响

采用静态箱/气相色谱法研究不同施肥方式以及环境因子对农田土壤CO2和N2O排放通量的影响,结果表明,不同施肥方式对农田土壤CO2排放的季节模式无明显影响,但是影响了N2O排放的季节模式。不同施肥方式对土壤CO2排放通量影响不明显,主要影响土壤N2O排放,整个小麦、玉米生长季,分两次施肥的F2与分四次施肥的F1相比,土壤N2O排放量增加,化肥配合有机肥施用(MF)的土壤N2O通量大于单纯的化肥处理,秸秆还田降低了土壤N2O的排放。相关分析结果表明,土壤CO2排放与大气温度、地表温度、土壤温度和土壤水分均呈显著正相关关系(P<0.01)。由于肥料施用的影响,土壤N2O排放和土壤温度、水分的相关分析并不显著。土壤N2O排放受土壤硝态氮和铵态氮变化的影响。     

不同因素对安徽白山羊超数排卵的影响

为获得更多安徽白山羊受精卵,以开展转基因育种工作,研究了不同孕酮阴道栓来源、季节以及供体妊娠状态对安徽白山羊超数排卵效果的影响。结果表明:使用国产孕酮阴道栓(CIDR)对供体母羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为15.0±7.62和14.6±7.88枚,受精率为97.3%,而应用进口孕酮阴道栓对供体山羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为11.0±5.38和10.8±5.16枚,受精率为98.2%,两组间差异不显著(P0.05);安徽白山羊在春、秋、冬3个季节超数排卵,头均回收卵子数分别为13.71±6.28、16.54±7.43和13.95±6.15枚,季节间差异不显著(P0.05);妊娠母羊和未妊母羊头均排卵数分别为14和15.2枚,两者差异不显著(P0.05),但妊娠组回收卵子的受精率显著低于空怀组(P0.05)。     

安庆六白猪和梅山猪成纤维细胞体外培养与生物学特性

为探索借助细胞培养技术开展地方良种猪遗传资源保护,以30日龄安庆六白猪耳缘皮肤组织和妊娠40 d左右梅山猪胎儿皮肤组织为材料,采取组织块接种培养法及胰蛋白酶消化法分离培养成纤维细胞,并对所获得的细胞系的体外培养生物学特性进行检测,包括细胞形态学观察和生长曲线绘制.结果表明:获得的安庆六白猪和梅山猪细胞系符合成纤维细胞的...     

油菜-双季稻免耕减氮节水栽培技术试验初报

传统的油-稻-稻三熟栽培模式,季节矛盾比较突出,除草剂等化学农药一年多次施用,不但增加生产成本,而且影响农产品质量,还污染环境.采用冬季油菜-双季稻免耕减氮节水栽培技术,既开发了冬季油菜生产,又解决了油菜收获后早稻免施除草剂抛秧的问题.同时节约了灌溉用水,节省了翻耕整地费用和时间,缓解了季节矛盾,改善了土壤团粒结构.增...     

壳寡糖对小鼠胚胎体外发育的影响

本研究旨在通过向小鼠体内受精和体外受精原核胚胎的培养基中添加壳寡糖(对照组:0μg·m L-1;试验组:5、10、50、100和200μg·m L-1),研究其对小鼠胚胎着床前发育效率(卵裂率、囊胚率)和囊胚质量(囊胚总细胞数、内细胞团数(ICM)与总细胞数的比率)的影响。结果表明,对于自然受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚总细胞数显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的卵裂率和囊胚率均显著低于对照组(P0.05)。对于体外受精胚胎,添加10μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著高于对照组(P0.05),添加200μg·m L-1壳寡糖组的囊胚率显著低于对照组(P0.05)。本试验表明,在化学限定培养基中添加适量的壳寡糖有利于改善小鼠胚胎的质量,但高剂量的壳寡糖可能不利于小鼠胚胎的早期发育。     

适度密植挖掘水稻单产潜力

如何进一步提高单产,挖掘粮食生产潜力,湘乡市多年的经验证明,适度密植是一项行之有效的增产技术措施。1．生产效果①增产效果显著。同一品种,栽培管理水平（施肥水平）相同,在一定范围内适当增加每667平方米抛插蔸数,增加基本苗,能促进有效穗增加,对提高单产有显著的效果。从湘乡市最近几年水稻测产数据来看,以株两优819水稻为例,每667平方米有效穗19万穗-25万穗,每增加1万有效穗,可提高单产20公斤左右,一般情况下每667平方米有效穗低于18万穗,单产就在400公斤以下,当每667平方米有效穗达到23万穗以上时,单产可达500公斤。②禾苗发育整齐,生长平衡。