不同保存方法对牛卵母细胞总RNA和cDNA品质的影响

实时荧光定量RT-PCR是检测低丰度mRNA的敏感方法,也是精确定量RNA拷贝数的有效方法,它的出现使得在少量细胞中定量基因的表达量,在小量基因组中分析基因突变和等位基因缺失成为可能。为了使这种检测技术更加稳定可靠,就必须在检测步骤的每一环节做到精确无误,而总mRNA的提取质量就显得十分重要。研究选择了牛MⅡ期的卵母细胞作为研究对象,对不同保存方法进行了检测和比较,结果显示,-196℃液氮和-80℃冰箱保存24 h的卵母细胞,总RNA品质并未明显下降;在-20℃或-80℃环境中长时间保存cDNA模板都会造成模板品质的下降。     

性腺外FSH受体和LH受体表达研究进展

雌性动物的性腺是卵巢,性腺外的生殖组织器官主要包括:输卵管、子宫颈、子宫肌层等,其中子宫是内分泌器官,除有局部内分泌功能外,还可能对下丘脑-垂体-卵巢轴有调节作用.促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的生理功能是通过其FSHR、LHR来介导的,其受体在性腺和性腺外均有表达.本文主要对雌性性腺外生殖组织器官上两种受体的表达加以综述.     

不同方法提取猪和牛卵母细胞和早期胚胎 total RNA的比较

研究以猪和牛GV期的卵母细胞和8细胞期胚胎作为研究对象,分别用QIAGEN RNeasy Micro Kit、无根RNAPrep Micro kit和华舜快速RNA(微量)提取试剂盒提取其中的total RNA,通过对total RNA的浓度和纯度的分析比较,找出较适宜的提取方法.结果显示,QIAGEN RNeasy Micro Kit 能更有效地从少量猪和牛卵母细胞和早期胚胎中提取高质量的total RNA.     

神经生长因子(NGF)在母牛性腺及性腺外生殖器官中的表达研究

本研究旨在探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在母牛卵泡期及黄体期子宫、卵巢、输卵管3种组织中的表达情况。采用FQ-PCR方法和Western blotting技术对成年母牛卵泡期及黄体期的子宫、卵巢、输卵管中的NGF mRNA和蛋白质表达进行了检测。结果表明,NGF mRNA和蛋白质在卵泡期和黄体期的子宫、卵巢、输卵管中均有表达,且卵泡期子宫中NGF mRNA表达量显著高于卵泡期卵巢和黄体期输卵管中NGF mRNA表达量(P0.05),其它组织间无显著差异。     

BDNF和NGF对牛颗粒细胞体外生长的影响

在DMEM培养液中分别添加不同质量浓度的脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BD NF)和神经生长因子(Nerve growth factor,NGF),观察其对牛颗粒细胞体外生长的影响.结果显示:在DMEM中添加20μg/L的BDNF,可促进牛颗粒细胞的体外生长;在DMEM中添加5μg/L的NGF,可促进牛颗粒细胞的体外生长.结果表明,在DMEM培养液中添加一定质量浓度的NGF和BDNF可促进牛颗粒细胞的体外生长.     

鉴定牛体外培养胚胎性别的一种新PCR方法及其应用

根据已知序列设计了2对引物,分别在体外扩增SRY基因及1个常染色体基因,能同时扩增出2个基因的胚胎为雄性,只能扩增出常染色体基因的胚胎为雌性。通过该方法对50个卵母细胞进行PCR验证,有49个扩增出1条常染色体基因,准确率为98％;鉴定了48枚用普通精液受精所得胚胎及57枚用经SRY抗体处理的精液受精所得胚胎的性别,雌性比例分别为56％和82％。     

湖南省部分地区奶牛乳房炎微生物分离鉴定及致病菌耐药性分析

为了研究湖南省规模化奶牛场乳房炎致病菌类型和耐药性,从4个规模化奶牛场采集了77头患有乳房炎的鲜奶样品,共分离出37种、162株病原菌,其中葡萄球菌95株(58.64%)、芽孢杆菌28株(17.28%)、克雷伯菌10株(6.17%)、埃希菌9株(5.56%)、棒状杆菌、链球菌、沙门菌及其他菌属均在5株以下。耐药性试验结果显示,金黄色葡萄球菌对阿莫西林具有较强的耐药性,对青霉素、头孢西丁、苯唑西林、四环素、庆大霉素、万古霉素和环丙沙星敏感;而大肠杆菌和肺炎克雷伯菌对庆大霉素和环丙沙星敏感,对其他抗生素耐药性较强。综上所述,湖南地区奶牛乳房炎的主要致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,庆大霉素和环丙沙星可作为该地区奶牛乳房炎的首选治疗药物。     

新农科背景下动物科学专业基层教学组织的改革探索

新农科建设对畜牧专业人才培养模式提出了新的要求,而基层教学组织是学校开展教学工作的重要阵地。探索适应畜牧业现代化建设,满足产业岗位需求的基层教学组织改革方案是大势所趋,对于动物科学专业人才的培养至关重要。本文以新农科为背景,分析动物科学专业人才培养过程中存在的问题,紧密联系社会需求,探索基层教学组织改革的思路与具体措施,以期推进动物科学专业升级改造,为新农科建设培养一批具有高专业素养、多样化背景的创新型复合畜牧人才。     

猪RBP-4基因原核表达载体的构建及表达

为构建猪RBP-4基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达蛋白。取成年母猪正常卵巢组织提取总RNA,RT-PCR后回收扩增产物,构建表达载体pEASY-E1-RBP4,转化BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。测序结果显示,RT-PCR获得的cDNA全长序列与GenBank中的序列基本一致。原核表达产物经SDS-PAGE电泳鉴定,其以包涵体形式表达。试验成功构建了猪RBP4基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达,为后续蛋白纯化及抗体的制备奠定基础。     

影响反刍动物氮利用的因素及其优化措施

反刍动物对饲粮中氮的利用效率为25%左右，其效率的高低会受到许多因素影响，主要包括瘤胃微生物的结构及种类、遗传因素、尿素氮循环效率和饲粮蛋白质水平等。反刍动物的过量氮排泄不仅会造成饲粮蛋白质的浪费，更会造成环境污染。本文阐述了影响反刍动物氮利用及生产的因素，并对基于提高氮利用效率进而提高饲料效率的优化措施进行了总结，旨在为提高反刍动物氮素利用效率、降低饲养成本和减少环境污染提供方向。