哈茨木霉LTR-2双价基因重组菌株的构建及其防治效果

本文利用限制性内切酶介导法转化哈茨木霉LTR-2,获得具有双价基因(glu14、chi42)的重组生防菌株.试验得到的木霉转化子具有遗传稳定性,于无药PDA平板上连续转接6次后,在Hyg 200 μg/mL的PDA平板上仍可继续生长.PCR扩增及Southern杂交证实目的基因已随机插入木霉基因组DNA上,本试验转化子均为单拷贝插入.转化子的β-1,4-葡聚糖酶和几丁质酶水解活性较出发菌株LTR-2显著提高(P＜0.01),其中转化子L-15的两种水解酶活性均最高.转化子在温室条件下对番茄晚疫病、茄子猝倒病和黄瓜灰霉病均有较好的防治作用,但不同处理间存在显著性差异(P＜0.01),其中转化子L-15最高,对3种病害的防治效果分别达到了91.5％、94.9％和83.8％,较出发菌株LTR-2处理分别提高了53.5％、55.9％和33.5％.结果表明,利用REMI技术,将β-1,4-葡聚糖酶基因glu14和几丁质酶基因chi42重组到木霉染色体DNA上,是获得高效重组菌株的有效手段.     

深绿木霉HB20111产挥发性物质及其功能分析

为了解深绿木霉HB20111产挥发性物质的成分以及潜在的生物学功能,采用顶空气相色谱-质谱法测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质的主要成分,并进行了成分分析;采用对扣法测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质对5种植物病原菌的抑菌率;同时测定了深绿木霉HB20111产挥发性物质对小麦幼苗生长的影响。结果表明,深绿木霉HB20111产挥发性物质烯类的相对含量最高,为49.68%、醇类为21.78%,酮类为8.56%,其余类别相对含量较低;这些挥发性物质对5种植物病原菌均有一定的抑制效果,其中对立枯丝核菌抑菌率最高,为50.62%;挥发性物质还可以促进小麦幼苗生长,与对照相比,对小麦幼苗的株高有显著的促进作用(P<0.05)。这些结果为深绿木霉HB20111的开发应用提供了理论基础。     

泰安樱桃根癌病致病菌分离及生物型鉴定

由致病性土壤杆菌侵染引起的根癌病严重影响了樱桃树的生长?利用选择性培养基, 以阿糖醇和赤藓糖醇作为不同碳源, 从山东泰安食用樱桃根部瘤状组织和感病根际土壤中分离到土壤杆菌100余株, 通过胡萝卜切片法和番茄茎部针刺接种法从中筛选到31株有致瘤活性的菌株?经16S rDNA和recA基因序列分析, 结合生物型检测鉴定出96%以上的致病菌属原生物Ⅱ型(Agrobacterium rhizogenes), 只有1株致病菌为原生物Ⅰ型(A. tumefaciens)?根据Ti质粒上致病相关基因保守序列设计3对引物, 12株有致瘤活性菌株中11株PCR扩增到目的条带?经分子生物学测定和高压纸电泳检测, 所有致病菌株的质粒均为胭脂碱型?建立了致病型土壤杆菌的分子生物学快速鉴定方法, 为定向选择生防菌株提供基础?     

绿色木霉菌抗生物质的初步分离及其对植物病原真菌的抑制作用

通过二氯甲烷浸提法获得绿色木霉菌(Trichoderma viride)LTR-2代谢抗生物质,并对该物质的性质及分离纯化作了初步研究。结果表明,抗生物质在PDA平板上对棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani)有明显的抑制作用,抑菌圈半径为6.5 mm;抗生物质具广谱抗性,稀释200倍后对本室保存的11株植物病原真菌仍有抑制作用,其中对小麦纹枯病菌的抑制率达89.26%;抗生物质经100℃水浴处理30 min后,对棉花立枯病菌的平板抑制效果与对照间无显著性差异(LSR法,P=0.01),表明该抗生物质较耐热。经硅胶柱初步分离得到2个活性流分,表明提取物中至少含有两种抗生物质。     

土壤杆菌K1026对樱桃冠瘿病病原菌的抑制作用及田间防治效果

由致病性根癌土壤杆菌Agrobacteriumspp.侵染引起的根癌病对樱桃等果树生产造成严重的影响。利用双层平板、胡萝卜圆盘法和接种指示植物番茄等方法验证了澳洲生防菌株K1026对2种不同原生物型樱桃冠瘿病病原菌的抑制作用;检测了不同接种时间对病原菌侵染产生瘤状组织的影响,结果显示提前或者在病原菌接种后20h内接种K1026可抑制胡萝卜产生瘤状组织;研究了K1026对大樱桃根癌病的作用机制是产生土壤杆菌素和竞争附着位点;田间试验表明K1026蘸根处理,对‘中国樱桃’株系冠瘿病的防治效果达81.61%,使发病率降低至18.13%。     

BtR05的诱变育种及其对朱砂叶螨的毒力测定

以BtR05为原始菌株,通过紫外诱变,获得一株对朱砂叶螨成螨有较高毒力的突变株63号.63号菌株的生长速度快,繁殖力强,LB摇瓶培养48 h后显微计数为4.88×109cfu.mL-1.63号发酵液的杀螨活性是原始菌株的1.33倍.通过斜面传代培养,该菌株能稳定遗传10代.     

BtR05悬浮剂制备及其对南方根结线虫卵孵化的影响

通过对表面活性剂、防腐剂、悬浮剂的筛选和组合优化,制备了苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis BtR05悬浮剂。室温条件下储存12个月后,BtR05悬浮剂的活菌存活率为74.74%。本试验测定了室内条件下BtR05悬浮剂对南方根结线虫Meloidogyne incognita卵孵化的抑制作用;结果表明对南方根结线虫卵孵化的抑制率随悬浮剂浓度的增大以及处理时间的延长而提高;BtR05悬浮剂稀释25倍液处理2d和4d后,对南方根结线虫卵孵化的抑制率分别为85.67%和97.97%。     

植酸酶的耐热性及其耐热机理的研究进展

植酸是谷物、豆类和油料等作物中磷和肌醇的主要存贮形式[1],同时对保持机体磷的平衡起着重要的作用。以植酸磷形式存在的磷因单胃动物体内缺乏能分解植酸磷的酶而难以被利用,从而造成许多问题:①磷资源的浪费。一方面饲料中的磷得不到有效利用;另一方面则需加入大量无机磷以满     

济南53种淡水藻的形态鉴定及总脂含量测定

[目的]为淡水藻的研究和开发提供依据。[方法]将济南地区采集的藻种进行分离培养和显微鉴定,并测定含油藻种的总脂含量。[结果]53种淡水藻分别属于蓝藻门、绿藻门和硅藻门,共计3门4个属。13种含油淡水藻的总脂含量在5.48%～39.03%。[结论]不同淡水藻之间的总脂含量差别很大,有些淡水藻的总脂含量甚至超过了海洋微藻。     

10%Ph1乳油对葡萄灰霉病的防治效果

采用生长速率法测定10％Phl(2,4-二乙酰基间苯三酚)乳油对灰霉病菌的室内毒力,10％Ph1乳油对灰霉病菌的抑制有效中浓度EC50为(27.990±0.0600)μg/ml,毒力回归方程为Y=3.407+1.101X。同时测定10％Ph1乳油对采后葡萄灰霉病的喷施防治效果,浓度为50-400μg/ml的Ph1各处理组防效达33.12％-51.7％,而1000μg/ml多菌灵防效仅13.61％,且均与多菌灵间存在显著性差异。