梅花鹿Thymosin beta 10基因RNAi慢病毒载体的构建及其对鹿茸干细胞增殖的影响

利用慢病毒干扰系统,对梅花鹿生茸区骨膜干细胞(Antlerogenic periosteum cells,AP细胞)Thymosin beta 10(Tβ10)基因进行RNA干扰(RNA Interference,RNAi),并初步研究该基因对细胞增殖的影响。结果表明:试验设计的3条针对梅花鹿Tβ10基因的shRNA序列与载体质粒p LVTHM连接成功,与p SPAX2、p MD2.G质粒共转染HEK 293T细胞,获得的重组慢病毒成功感染了AP细胞;荧光定量PCR检测结果表明,RNA干扰后Tβ10基因的mRNA水平下调,MTT试验结果显示Tβ10基因的下调可以抑制AP细胞增殖。试验成功构建了针对梅花鹿Tβ10基因RNAi载体,并成功干扰了Tβ10基因在AP细胞中的表达,基因下调最高可达35.6%,并初步确定Tβ10基因下调可抑制AP细胞的增殖。     

春义鹿茸研究组简介

<正>春义鹿茸研究组隶属于特种动物分子生物学省部共建国家重点实验室,该室依托于中国农业科学院特产研究所.由李春义博士于2006年创立.李博士是该领域国际权威科学家,多次应邀在国际鹿科学会议上做全会报告;现为中国农业科学院特产所研究员、国家重点实验室常务副主任、特种动物干细胞创新团队首席科学家;以第一作者身份发表SCI收录论文50余篇.该组现有固定研究人员15名,在读博士生3名,在读硕士生5名;主持国家自然科学金项目5项,国家863课题1项,国家     

不同培养代数鹿茸生长中心细胞对IGF1刺激 的反应

【研究目的】探讨胰岛素样生长因子（IGF1）对生长60d的梅花鹿鹿茸体外培养不同代数鹿茸生长中心细胞的影响。【方法】分离、培养生长60d的梅花鹿鹿茸生长中心细胞,将培养第2代、5代、8代细胞经含有不同浓度的IGF1（0,1,3和10nM）作用,在培养24h后用3H-胸腺嘧啶核苷掺入测定法检测每分钟衰变数（DPM）值。【结果】全部IGF1处理组都显著高于对照组（p〈0.01）。不同浓度IGFⅠ处理组的平均值和最高值都是离体培养2代的细胞的DPM最高（分别为31918和39818DPM/mg蛋白）,培养5代的细胞（分别为5455和6815DPM/mg蛋白）已大大地下降;到了第8代的（分别为4030和4838DPM/mg蛋白）又有进一步的下降。【结论】IGF1能够促进鹿茸生长中心细胞分裂增殖,生长60d鹿茸的生长中心细胞在离体培养,不同培养时期的鹿茸生长中心细胞对IGFⅠ刺激的敏感度不同。     

IGF1与睾酮激素对鹿角柄发生影响的研究

鹿茸是雄性鹿的第二性征,也是哺乳动物器官中唯一能完全再生的。鹿茸是从着生于头部的被称为角柄的永久性骨桩上发生、再生和脱落的。鹿接近青春期时,雄激素逐渐升高并刺激角柄生长。如果在角柄发生前将公鹿去势,角柄将终生不能发生,但当给其施以足够的外源睾酮激素时,可以诱导它们重新生长。研究结果发现,角柄的发生除了与雄性激素有关外,还受到营养水平的调节,只有当鹿的体重达到一定阈值时,角柄才能发生。进一步研究结果发现,营养水平通过调控体内胰岛素样生长因子1(kinsulin-like growth factor l,IGF1)而调节角柄的发生。因此角柄发生不仅与雄性激素有关,也依赖于体内IGF1水平。由于鹿茸的完全再生取决于角柄,因此,对角柄发生机制的研究是对鹿茸再生研究的一个重要方面。作者针对IGF1和睾酮激素对鹿角柄发生所产生的影响进行综述,为研究角柄发生机制提供重要依据。     

鹿角盘水提物对大鼠乳腺增生的作用效果及其机制研究

为了探索鹿角盘(DHAB)水提物对大鼠乳腺增生的治疗作用,初步探讨其作用机理和用药剂量,试验利用苯甲酸雌二醇(0.5mg/(kg·d))联合黄体酮(5.0mg/(kg·d))对SD大鼠进行肌内注射建立乳腺增生模型。试验共分7个组,每组10只大鼠,分别为空白组、乳腺增生症(HMG)模型组、阳性药三苯氧胺组(0.036mg/(kg·d))、鹿角盘水提物4个剂量组(高剂量,2.625g/(kg·d);中高剂量,1.575g/(kg·d);中低剂量,1.05g/(kg·d);低剂量,0.63g/(kg·d))。按组别连续灌胃45d,每周固定时间测定大鼠乳头直径、高度及体重。试验结束后采血取样,称量大鼠胸腺、脾脏、子宫和卵巢质量,取乳腺组织做病理学切片、HE染色,用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇(E2)及孕酮(P)的含量。结果表明,使用不同剂量鹿角盘水提物均能减小乳腺增生大鼠乳头直径、高度,提高胸腺、脾脏指数,降低子宫指数,减轻乳腺小叶数、腺泡数和分泌物,降低血清E2含量,升高血清P的含量,与模型组相比有统计学差异(P0.01;P0.05))。综合试验结果,鹿角盘水提物对乳腺增生大鼠有治疗作用,效果显著,且以中高剂量组变化最为明显。其作用机制可能通过增强机体免疫力、调节血清中E2、P水平实现。     

细胞黏合素C的生物学研究进展

细胞黏合素C(Tenascin-C)是细胞外基质糖蛋白分子,其在组织损伤时特异性瞬时表达。Tenascin-C有着许多不同的作用,介导炎症和纤维化过程,参与组织损伤修复,动物发育过程中细胞的分裂、分化和迁移与外周神经系统的再生等。在心脏和动脉损伤、肿瘤血管生成和转移、脊髓再生、骨质疏松以及调节干细胞行为中起重要作用。论文对有关Tenascin-C的生物学功能进行综述,为相关研究提供参考。     

梅花鹿生茸区骨膜干细胞cDNA表达文库的构建

鹿茸是雄鹿额部生长出来的尚未骨化的嫩角,是雄鹿的第二性征,具有较高的药用价值.鹿茸是唯一的失去后还能完全再生的器官,它每天能生长1～2 cm,是生长最快的组织.     

P21基因与哺乳动物器官再生相关性研究进展

自然界中很多低等无脊椎动物及有尾目两栖动物都存在组织或附属器官再生现象,而哺乳动物中这种能力却是少见的。近年来随着具有器官再生能力的MRL试验小鼠的发现,越来越多的试验证实哺乳动物也具有器官再生能力,这为临床上的损伤修复和肢体再生带来了新希望。组织、器官的再生离不开细胞增殖,细胞增殖离不开细胞周期,p21蛋白作为细胞周期的重要调控因子,在最新研究中发现,普通试验小鼠敲除P21基因后具有了同MRL试验小鼠一样的器官再生能力,确定了p21蛋白与再生有着密切联系。文章对P21基因与哺乳动物再生的关系作一综述。     

鹿角盘水提物对大鼠乳腺增生的作用效果及其机制研究

为了探索鹿角盘（DHAB）水提物对大鼠乳腺增生的治疗作用,初步探讨其作用机理和用药剂量,试验利用苯甲酸雌二醇（0.5 mg/（kg·d））联合黄体酮（5.0 mg/（kg·d））对SD大鼠进行肌内注射建立乳腺增生模型。试验共分7个组,每组10只大鼠,分别为空白组、乳腺增生症（HMG）模型组、阳性药三苯氧胺组（0.036 mg/（kg·d））、鹿角盘水提物4个剂量组（高剂量,2.625 g/（kg·d）;中高剂量,1.575 g/（kg·d）;中低剂量,1.05 g/（kg·d）;低剂量,0.63g/（kg·d））。按组别连续灌胃45 d,每周固定时间测定大鼠乳头直径、高度及体重。试验结束后采血取样,称量大鼠胸腺、脾脏、子宫和卵巢质量,取乳腺组织做病理学切片、HE染色,用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇（E₂）及孕酮（P）的含量。结果表明,使用不同剂量鹿角盘水提物均能减小乳腺增生大鼠乳头直径、高度,提高胸腺、脾脏指数,降低子宫指数,减轻乳腺小叶数、腺泡数和分泌物,降低血清E₂含量,升高血清P的含量,与模型组相比有统计学差异（P < 0.01;P < 0.05））。综合试验结果,鹿角盘水提物对乳腺增生大鼠有治疗作用,效果显著,且以中高剂量组变化最为明显。其作用机制可能通过增强机体免疫力、调节血清中E₂、P水平实现。