某规模化猪场猪伪狂犬病的调查与防控

国内猪伪狂犬病感染较为普遍,为了找到控制该病的方法,采用检测gB抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法来评价猪场疫苗免疫率,用检测gE抗体的酶联免疫吸附试验方法和检测gE基因的荧光PCR技术筛选野毒感染猪,并采取淘汰野毒感染猪、自繁自养等综合措施,猪免疫率从68.6%提高至91.1%,而野毒感染率从10.2%降至1.8%。说明采取的措施对控制猪场猪伪狂犬病疫情有效。     

鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立

根据鸭疫里默氏杆菌16SrRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立了该菌的荧光定量PCR检测方法。利用该方法分别对自然和人工感染病例不同脏器的细菌进行定量检测,并对临床疑似阳性病例进行诊断。试验证明,该方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强的特点;在自然感染和人工感染的鸭病例中,脑组织和心脏的细菌含量最高。该检测方法能够很好地应用于鸭疫里默氏杆菌的快速检测。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽急性、接触性、烈性传染病。病毒广泛存在于野生禽、鸟类和人工饲养的禽类中,国际兽医局(OIE)将其列为动物的A类传染病。1878年,该病首次在意大利暴发流行,当时称之为“鸡瘟”。禽流感引起的损失主要有：高致病力毒株致鸡大量死亡,非高致病力毒株引起产蛋量下降,免疫功能障碍而继发细菌或病毒的感染。1994年,我国广东首次报道了H9N2亚型禽流感的分离,自此之后中国大陆的禽流感日益受到世人的关注。     

禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/72420/96 (LPAI-H5N2)HA基因的研究

采用RT-PCR技术,以A/Ostrich/Denmark/72420/96(D96)RNA为模板,扩增了HA基因,并进行了序列分析。结果表明:扩增HA片段长1 737个核苷酸,包含了完整的HA基因的开放阅读框架。与已报道的部分不同年代和地域的H5N1和H5N2分离株进行序列比较,与H5N1各株序列同源性均在80%左右,而该基因序列与H5N2各株序列具有很高的同源性,高达97%以上。HA基因裂解位点上游丢失了4个连续碱性氨基酸(R-R-R-K),裂解位点处氨基酸序列为E———T R,为低致病力毒株的一个标志。其推导后氨基酸序列与H5N1AIV的同源性达90%。这也从分子水平对以其为种子株研制的疫苗能够有效抵御我国流行的H5亚型AIV病毒的感染做了合理的阐释,且由于其为弱毒株,安全性更好,也更符合公共卫生学的要求。     

猪瘟猪伪狂犬病二联苗对仔猪免疫效果观察

本文探讨了猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)活苗不同时间对仔猪免疫效果的相互影响。结果表明:同时免疫两种活疫苗(二联苗组),PR会干扰CSF前期抗体的产生。二联苗组猪瘟抗体3周后才达到阳性,而猪伪狂犬病抗体在7日时就达到阳性,两种抗体均在49日达到峰值,峰值均比单一免疫、分时免疫的峰值略低。分时免疫两种疫苗产生的抗体均比单一免疫时的抗体要低,且相互干扰不明显。     

猪瘟组织灭活疫苗与猪瘟弱毒冻干活疫苗在免疫效力的比较研究

猪瘟是猪的一种重要的传染性疾病，是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性猪传染性疾病。猪瘟病毒属于黄病毒科，瘟病毒属，其基因为RNA。其主要致病机理是致小血管壁的变性，从而导致内脏器官多发性出血梗塞和坏死，以出血和发热为主，呈急性或慢性经过，每年给养猪业造成巨大的经济损失。从50年代初，周泰冲等研制出了猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株C株，在我国猪瘟得到了很好的控制。但是近年来随着养殖规模的不断扩大，猪瘟的流行已发生了明显的变化，典型猪瘟已不多见，非典型猪瘟(或温和型猪瘟)普遍流行。     

山东和河北部分地区四种猪病的血清学调查

[目的]了解山东和河北部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的发病情况。[方法]用间接ELISA方法对144个规模化养猪场的2 008份猪血清进行抗体水平检测。[结果]两省猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬中和（gB基因）、伪狂犬病毒野毒感染（gE基因）、圆环病毒病的抗体平均阳性率分别为：89%~92%、87%、92%~95%、33%~40%和76%。各阶段猪群的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬中和（gB基因）抗体阳性率普遍较高,都在80%以上;伪狂犬野毒（gE基因）抗体阳性率在14%~90%之间,其中流产母猪的抗体阳性率最高,为90%;1~4周的仔猪圆环抗体阳性率为76%（152/199）,4~10周的保育猪的抗体阳性率最低,为67%（327/489）。[结论]这四种猪病的抗体阳性率较高,免疫猪基本能得到保护,但在个别猪场仍有发病,可能与免疫失败、新流行毒株的出现、继发感染等因素有关。提示各大猪场要针对实际情况,制定出严格的综合性防控措施。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒SF弱毒株的鉴定

针对IBV地方分离株SF株弱化毒进行鉴定,经特异性试验证实,SF株致弱毒能完全被本毒制备的血清所中和;血清交叉中和试验证明,SF株毒与Ark99株有高度的交叉保护;采用E1、E5代弱化毒接种SPF10日龄鸡胚,测定毒价EID50分别为10-6.88/0.1ml,10-6.68/0.1ml;同居感染试验未观察到健康鸡组织器官病变;连传SPF易感雏鸡5代无毒力返强;攻毒保护试验证实3000个EID50以上的免疫量使免疫雏鸡能耐受强毒攻击,达到完全保护;理化试验表明,该毒株对热、碱的耐受性较差,对乙醚、氯仿有机溶剂较为敏感,对酸有一定的耐受性;试验数据说明,SF株IBV已被成功弱化,抗原性好,毒力稳定、对雏鸡安全,不会产生毒力返强,并能产生较强的免疫力,是一株理想的弱毒苗株.     

硅钙镁复合肥对烤、晒烟综合效应的研究

氮、磷、钾肥在适量的条件下，烤、晒烟分别施硅钙镁复合肥４００ｋｇ／ｈａ的效果最佳。烤、晒烟产量、产值分别提高１７．５％和１６．９％，净收入分别为９８０元／ｈａ、７１２．５０元／ｈａ。烤晒烟施硅钙镁复合肥能增加叶面积，提高抗病力，协调烟叶化学成分，提高烟叶品质。     

荧光定量RT-PCR检测鸡α干扰素mRNA方法的建立

根据鸡IFN-α基因序列设计引物,建立了定量检测鸡IFN-α基因表达水平的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并对新城疫病毒(NDV)感染的鸡法氏囊、胸腺中IFN-α mRNA表达水平进行了检测.结果表明,该方法对鸡IFN-α,mRNA的扩增效率为103.99%,线性范围为102～10-9,相关系数为0.996,最低能检出73拷贝/反应;熔解曲线分析RRT-PCR产物在(88.6±0.2)℃出现单特异峰;特异性评价结果显示,本方法只扩增鸡IFN-αmRNA,不与常见禽源病原微生物发生交叉反应.对NDV感染鸡的法氏囊、胸腺中IFN-α mRNA表达水平的定量检测结果表明,IFN-α mRNA在感染后36,48 h显著升高.本研究建立的检测鸡IFN-α mRNA表达水平的RRT-PCR方法具有敏感性高、稳定性好和特异性强的特点,为鸡IFN-α mRNA的精确定量提供了新方法.