测定猪肉中土霉素及金霉素残留的HPLC法建立

文章建立了测定猪肉组织中土霉素及金霉素残留量的HPLC法.该方法按照国家检测标准采用了5％高氯酸50 mL为样品提取液;乙腈+0.01 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(用30％硝酸调节pH2.5)=35:65为流动相;检测波长为355nm,进行测定.在此色谱条件下,土霉素、金霉素标准品浓度在0.1～1.0 μg· mL-...     

3-1E/mChIL-15融合基因构建及在真核细胞中的表达

将鸡堆形艾美尔球虫(E.acervulina)子孢子和裂殖子表面抗原3-1E基因片段与鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL15)通过四个柔性氨基酸SPGS连接,构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15。表达质粒纯化后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光和免疫组织化学方法对重组质粒的体外瞬时表达进行检测。结果表明,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后30h可检测到融合基因编码的融合蛋白在293T细胞中的瞬时表达。研究为鸡艾美尔球虫基因工程疫苗进一步研制及应用奠定了基础。     

鸡痘DNA疫苗pVAX-env的构建及其体内外表达

利用PCR技术将鸡痘病毒env基因亚克隆到pVAX1真核载体上,构建了含有该基因的真核表达质 粒pVAX-env。将质粒pVAX--env体外瞬时转染BHK21细胞通过间接免疫荧光检测蛋白表达。将pVAX-env质粒肌肉注射免疫14日龄雏鸡,通过RT-PCR和组织免疫荧光检测体内质粒表达。结果表明,成功构建了真核表达质...     

鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究

试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。     

兔乳腺上皮细胞凋亡与泌乳量的相关性研究

为研究哺乳动物在泌乳期前后乳腺上皮细胞凋亡数量及泌乳量变化的规律,实验采用免疫组织化学SP染色法、流式细胞仪分析法检测母兔泌乳前后乳腺上皮细胞凋亡数量;采用仔兔吃奶前后窝体重变化差值法测量泌乳量。结果表明:泌乳全期乳腺上皮细胞凋亡数量呈现先下降再上升的趋势,泌乳量高峰期时细胞凋亡不显著,泌乳期兔乳腺上皮细胞的细胞凋亡与兔的泌乳量呈强负相关。     

免疫组化方法检测细小病毒在雏鹅体内分布规律研究

采用间接免疫酶组织化学染色法对14日龄雏鹅人工感染GPV后,不同时间段病毒抗原在体内的定位及分布情况进行了检测。同时应用图像分析软件对抗原染色强度进行了定量分析。结果显示,感染后第1天到第21天的不同时间点可以从心脏、肺脏、脾脏、肝脏、法氏囊、胸腺、腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、食管十二种组织器官检测到病毒抗原。其中感染第5天感染组织最广泛,抗原染色强度最强,在检测的组织中空肠的检出率最高。病毒抗原广泛分布于肠道的上皮细胞、腺上皮细胞,肺泡壁细胞和肾小管的上皮细胞内,可见上皮细胞为GPV抗原的主要靶细胞。始终未能从大脑、胰腺和骨骼肌检测到GPV。     

白细胞介素-15研究进展

白细胞介素-15(interleukin 15 IL-15)是近年发现的一种在分子结构及生物学性质方面与白细胞介素-2(interleukin 2 IL-2)相似的细胞因子。自从1994年发现以来,由于其在医学及兽医学上的重要的生物学作用而受到研究者们的重视,在各个方面的深入研究已取得了一定的进展。本文对IL-15及其在兽医学上具有潜在应用价值的鸡IL-15(Chickeninterleukin 15 ChIL-is)近年来取得的研究进展作一综述,内容涉及IL-15的结构及受体、产生及基因表达、生物学作用。     

猪传染性胃肠炎的防治

猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的猪的一种急性、高度接触性传染病，主要临床症状为呕吐、严重腹泻和脱水。不同年龄和品种的猪对本病均易感，其中2周龄以内的仔猪致死率可达100％，通常死于脱水和电解质代谢紊乱，给养猪业造成了极大的危害。现将防治方法介绍如下，供大家参考。     

网状内皮组织增殖病病毒感染SPF雏鸡后病毒在各器官内的分布

以间接免疫荧光抗体技术研究了１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮细胞增殖病病毒（ＲＥＶ）后,病毒在机体各器官内的分布。结果表明,雏鸡感染ＲＥＶ后中在腔上囊、脾、肝和胸腺内大量存在,其它器官分布少。这与ＲＥＶ造成机体各免疫器官和肝的严重变性、导致机体免疫功能降低密切相关。