鸡传染性喉气管炎的诊治及病毒分离鉴定

哈尔滨市某养鸡场发生以呼吸道症状为主的传染病,病鸡呼吸困难,张口伸颈喘气,咳嗽,咳出带血的渗出物,发病率９０％,死亡率２．９５％。经临床剖检、病理组织学、琼脂扩散试验及人工接种试验诊断为鸡传染性喉气管炎,并进行了病毒的分离鉴定。     

鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

将编码鸡白细胞介素-18(interleukin-18，IL-18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pPROEXTMHT中，构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在，目的蛋白表达量占菌体蛋白的30％。SDS-PAGE和Western blot分析显示，表达的鸡IL-18融合蛋白相对分子质量约为23000。包涵体被6mol／L盐酸胍裂解后，通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-18融合蛋白及其纯化产物经3次肌肉注射豚鼠，制备豚鼠抗鸡IL-18多克隆抗血清，并用琼脂扩散试验多克隆抗血清进行了证明。本试验成功的原核表达、纯化了鸡IL-18融合蛋白，并制备了抗鸡IL-18多克隆抗血清，为下一阶段关于鸡IL-18重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。     

繁殖障碍型猪瘟的研究进展

猪瘟(Classical swine fever,CSF或Hog cholera,HC)是一种高度接触性传染病。该病于1833年首次发现于美国俄亥俄州,百余年来其流行遍及全球。国际兽疫局将其定为A类传染病,我国《动物防疫法》将其列为一类传染病,是目前危害我国养猪业发展的主要疫病之一。自20世纪60年代开始,我国C一株兔化弱毒苗及其换代产品(细胞菌)的广泛应用,有效地控制了猪瘟疫病在我国的发生和大流行。20世纪70年代后期,猪瘟的流行形式发生了很大变化,从频发的大流行转为无规律的散发性流行;病原毒力降低,临床表现由典型变为非典型。主要表现为母猪繁殖障碍、猪瘟病毒持续感染、胎盘感染、出生仔猪先天性颤抖等隐性感染猪瘟症状,对养猪业的发展与经济效益造成严重影响。     

猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因的克隆与同源性比较

用猪睾丸 (Swine testicle,ST)细胞繁殖并扩增猪传染性胃肠炎病毒国内分离株 TH- 98,根据 Gen Bank中已发表的TGEV S基因 c DNA序列 ,利用 Oligo4.1程序软件设计并合成两对引物 ,进行逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR) ,扩增出2 .3kb和 2 .1kb两个片段 ,分别命名为 Sa与 Sb,先后插入到 p UC18质粒载体上的 Eco RI和 Pst I多克隆位点上 ,构建了重组质粒 p UC- S。根据 TGEV S基因位点和 p UC18的物理图谱 ,用相应的限制性内切酶进行酶切及套式 PCR方法进行鉴定、分析 ,证明克隆的 p UC- S为 TGEV S基因。同时对 p U C- S进行序列测定分析 ,并与来自美国、英国和日本的五个毒株进行核苷酸及编码氨基酸同源性比较 ,证明了 S基因的高度保守性     

鸡传染性支气管炎病毒HH06株囊膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能检测

采用RT-PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus, IBV）HH06株E基因全长,经抗原性和亲水性分析,将E基因部分序列（193～327 bp）亚克隆于pET-32a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-32a-E1转化E.coli Rosetta（DE3）感受态细胞,诱导表达获得大小约为23 ku的重组截短E1蛋白,Western blotting检测重组蛋白与IBV全病毒多克隆抗体能特异性反应。以纯化后的E1蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体效价达到2²⁰;Western blotting分析表明,E1多克隆抗体与重组表达蛋白具有良好的反应性;间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到PVAX-E1转染Hela细胞表达的E1蛋白和感染鸡胚肾细胞（CEK）中的HH06株IBV,抗E蛋白多克隆抗体的制备为E蛋白功能的深入研究奠定了基础。     

鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因,经抗原性和亲水性分析,将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta （DE3）感受态细胞,诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明,重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,其ELISA效价达到1??218;Western blot结果证实,其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明,抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白,与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明,多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。     

带毒针头注射疫苗暴发猪瘟病诊断

带毒针头注射疫苗暴发猪瘟病诊断李广兴，张福祥，张青胜江苏省金湖县畜牧兽医站（２１１６００）１９９３年４月和１９９４年１２月，我县金沟镇和黎城镇发生两起用带毒针头注射猪瘟苗引起猪瘟病暴发病例。现报道如下：一、发病情况１９９３年４月２日，金沟镇某兽医，用...     

鸡传染性支气管炎实验室诊断技术

鸡传染性支气管炎是危害世界养鸡业的主要疫病之一 ,本文对该病的实验室诊断技术进行了介绍。从传统的琼脂扩散试验、中和试验和血凝抑制试验 ,到目前发展很快的RT PCR技术、Dot-ELISA和斑点免疫金技术 ,都各具特点 ,互有利弊     

一例鸭传染性浆膜炎的诊断与治疗

鸭传染性浆膜炎又称鸭疫里默氏杆菌病,是由鸭疫里默氏杆菌引起的一种传染病,主要侵害小鸭.临床表现困倦不食,鼻有分泌物,下痢,共济失调和抽搐.随着养鸭业的发展,养鸭密度的增加,该病已成为7周龄以内鸭的主要疫病.现报告一例如下:     

带毒针头稀释疫苗引发猪瘟

带毒针头稀释疫苗引发猪瘟１９９３年和１９９４年，金湖县曾发生两起因用带毒针头稀释、注射疫苗引起猪瘟病暴发，现报道如下：１发病情况１９９３年４月２日，金沟镇牧医站兽医吕某，用给本镇伏某从外地购进病猪注射针头稀释猪瘟、丹毒二联苗２瓶（４０头剂／瓶）再连续...