体胚发生途径‘大矮蕉''植株的再生

‘大矮蕉'Musa AAA cv. Grande Naine的胚性细胞悬浮系(ECS)在M2液体培养基中预培养1周和2周后,分别将其接种在RD1或M3培养基上,于光照或黑暗条件下进行体胚的再生. 再生体胚在接种后3周左右开始出现,经8周的培养后,在不同预培养时间、再生培养基种类及培养条件下,胚性细胞(团)质量增长了约5～18倍,从沉积细胞体积(SCV)为1 mL的ECS获得的再生体胚数为0.71×105～3.07×105. 植株的再生率及从SCV为1 mL的ECS获得的再生植株数也因上述体胚再生条件的不同而异.     

香蕉束顶病毒NSP株系DNA组分5的克隆和序列分析

 本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV) NSP株系DNA组分5的全基因,该基因全长为1013 nt,具有一个开放阅读框,编码161个氨基酸。NSP株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源率介于88%~89%之间,氨基酸序列同源率介于76%~79%之间,借助进化树分析和生物信息学研究方法,发现NSP株系组分5同样含有保守的与植物体内Rb蛋白结合的、能够调节寄主体内DNA复制相关蛋白积累的功能基序——LYCDE;并预测了蛋白质二级结构和性质。     

菠萝杆状DNA病毒的全基因组序列测定及分析

【目的】证明中国湛江地区菠萝上是否存在菠萝杆状DNA病毒(Pineapple bacilliform comosus virus,PBCoV),并获得PBCoV的基因组全序列,分析该病毒与其它Badnavirus病毒分离物间的分子差异。【方法】设计特异引物,通过反向PCR及分段克隆两种方法扩增PBCoV,克隆后测序获得PBCoV基因组全序列,利用不同生物学软件进行序列分析。【结果】PBCoV基因组为环状结构,全长7543bp;含有3个典型的ORFs,推测其编码蛋白的分子量分别为20.4、14.0和217.6kD。其基因组与GenBank登录的PBCoV ORF3部分核苷酸序列同源性87%-97%,其ORF3编码的氨基酸序列与已报道的Badnavirus病毒ORF3氨基酸序列间一致率小于50.8%。Southern blot分析显示该病毒基因组能整合到植物基因组中。【结论】在中国湛江地区菠萝上存在PBCoV,该病毒属于Badnavirus属病毒,与香蕉线条病毒(Banana streak virus)Mys分离物(BSV-Mys)亲缘关系最近。这是PBCoV基因组全序列的首次报道。     

黄瓜花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立检测香蕉中黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV)的实时荧光定量方法.【方法】根据CMV外壳蛋白(CP)保守序列设计了TaqMan实时荧光定量PCR特异性探针及引物,优化反应体系检测TaqMan探针实时荧光定量方法的灵敏度、特异性和重复性.【结果和结论】该方法检测灵敏度为4.2×102μL-1,比普通PCR高100倍,且与香蕉束顶病毒Banana bunchy top virus(BBTV)、香蕉线条病毒Banana streak virus(BSV)无交叉反应,特异性和重复性都较好.用实时荧光定量PCR检测14份田间香蕉样品有5份样品为阳性,进一步证明建立的实时荧光定量方法可用于香蕉CMV的检测.     

利用农杆菌介导法获得转基因香蕉植株

用含质粒pBI426的根癌农杆菌EHA105转化香蕉品种威廉斯的横切薄片,在含100mg/L卡那霉素和600mg/L羧苄青霉素的MS分化培养基上诱导分化芽,获得17株转化苗。抽提植株DNA,以未转化植株为阴性对照,进行聚合酶链式反应,结果发现7株苗含有GUS基因。这初步证明了GUS基因已经转入香蕉薄片中。     

大白菜栽培的四项改革措施

经表面消毒的种子直接放置在SX选择性培养基上，测定武汉市花椰菜种子携带甘蓝黑腐病菌(Xanehomonasc Bmpestris PV．campestris)的百分率。结果表明：所测的21个品种，普遍带菌率为0.6-1.5%．最高达3．08%(品种为珍珠80天)，最低为0.21%(品种为60天)。因此，控制大田病害发生和蔓延的前提是选用无病种子及种子消毒。     

香蕉枯萎病生防细菌ZJ6-6的盆栽防治效果及其生防基因分析

通过病原菌和生防菌人工接种方法测定生防细菌ZJ6-6对香蕉枯萎病的盆栽防治效果,扩增和序列分析ZJ6-6的生防基因。结果表明：ZJ6-6处理香蕉的萎缩指数和导管褪色指数比对照香蕉分别降低40.5%和43.9%,其对香蕉枯萎病具有显著防治效果;ZJ6-6至少含有6个生防基因ituD、lpa-14、bmyB、fenD、srfAA、srfAB,理论上具有合成脂肽抗生素的能力,这可能是其能防治香蕉枯萎病的原因。本研究结果对ZJ6-6合成分泌的抗菌物质鉴定及其生防机理研究具有重要意义。     

水稻橙叶病植原体16S rDNA基因的序列分析

利用植原体16S rDNA通用引物对水稻橙叶病发病植株的DNA进行了PCR扩增和基因克隆.序列测定表明,PCR扩增的片段全长为1 853 bp,包括1 527 bp的水稻橙叶病植原体(RYL)的16S rDNA基因全序列、234 bp的邻近间隔区的序列及部分(92 bp)23S rDNA基因序列.序列比较结果表明,RYL的16S rDNA全序列与其他植原体的相似性在88%～95%,其中与America aster yellows(AAY,GenBank登录号X68373)最高相似性为95%.利用最大简约法构建的16S rDNA系统演化树结果表明:RYL与AAY亲缘关系最近,同被聚类为翠菊黄化组(16Sr Ⅰ).     

单味白头翁汤治仔猪白痢

仔猪白痢在我地发病率高,病程长,导致病猪生长迟滞。1988年3月,电白县郎美开发果场的仔猪发生白痢,用土霉素和敌菌净治疗未愈。我们用单昧白头翁汤治疗12窝的85头病仔猪(曾用土霉素、敢菌净治疗无