猪CD40L基因的原核表达及特异性多克隆抗体制备

从猪外周血淋巴细胞中克隆猪CD40L基因,构建表达载体pET-CD40L,转化大肠杆菌BL21(DE),表达获得相对分子质量约为48x103的重组融合蛋白.以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,获得抗猪CD40L的特异性抗体.间接ELISA检测到多克隆抗体效价达到1:12 800,Western-blot检测结果表明,得到的抗体既可与纯化的CD40L蛋白特异性结合,又可与表达猪CD40L的重组杆状病毒特异性结合.     

昼夜节律及间歇性禁食对小鼠非酒精性脂肪肝的影响

为了探究昼夜节律及间歇性禁食对小鼠非酒精性脂肪肝的影响,本研究以C57BL/6J小鼠为研究对象,建立一个饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠模型,通过观察并记录小鼠体重、肝脏形态、肝脏组织病理结果,探究昼夜节律及间歇性禁食对小鼠非酒精性脂肪肝的预防作用。结果表明,异常节律联合间歇性禁食可抑制小鼠体重增加及肝脂肪变性。     

大通牦牛DQA2基因CDS区序列分析

为了获得大通牦牛DQA2基因序列,并研究其序列特征及编码蛋白的结构和功能,本研究采用DNA混合池扩增后直接测序的方法,通过DNAstar软件和在线服务器预测大通牦牛DQA2基因CDS区编码蛋白的理化性质、疏水性/亲水性、糖基化位点、信号肽、跨膜结构、二级结构以及三级结构。结果表明,大通牦牛DQA2基因CDS区长度为765bp,编码253个氨基酸。蛋白结构预测结果表明,该蛋白是一种混合型的可溶性蛋白质,具有4个潜在的N-糖基化位点,分别为Asn31、Asn96、Asn260、Asn369;在第1~23位氨基酸之间存在信号肽;存在1个典型的跨膜螺旋区,氨基酸序号为216-239;蛋白质功能显示该蛋白存在信号受体活性、催化活性、运载体、调节代谢过程、细胞定位及免疫系统过程的功能。本研究结果为进一步研究大通牦牛的遗传育种提供理论基础。     

大鼠神经干细胞的分离培养和分化

分离大鼠大脑皮质及皮质下组织，经消化及机械吹打后，用悬浮培养法、有限稀释法获得来源于同一细胞的亚细胞系克隆；用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞(NSCs)。结果，从大鼠大脑皮质及皮质下分离的组织，经原代和传代培养均可形成细胞克隆，并具有增殖能力；原代和传代细胞抗原与抗巢蛋白(nestin)单克隆抗体反应呈阳性；单细胞克隆能分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结果表明，用此方法分离的细胞具有自我更新和分化潜能，有很强的增殖能力，是属于中枢神经系统的干细胞。     

牦牛转铁蛋白对LPS诱生小鼠巨噬细胞脂质过氧化的影响

用LPS诱生小鼠腹腔巨噬细胞发生脂质过氧化，观察牦牛血清中分离纯化的转铁蛋白对其脂质过氧化的影响。结果表明：LPS终浓度为20μg／ml、培养时间12h时，LPS诱生小鼠腹腔巨噬细胞产生丙二醛的量显著增加，且满足实验需要。当添加不同浓度牦牛血清转铁蛋白后，丙二醛受到显著抑制，谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高且呈现剂量依赖性，但超氧化物歧化酶活性均无明显影响。提示，牦牛血清转铁蛋白具有更好的抑制脂质过氧化和提高谷胱甘肽过氧化物酶的作用。抑制脂质过氧化生成和提高谷胱甘肽过氧化物酶的作用，可能是转铁蛋白抑制细菌、抗病毒、保护与促进细胞生长等功能的作用机制之一。     

芭茅草防护障的小气候效应

在我国柑桔栽培分布的北缘地带,越冬期间的冻害是个很突出的问题。这些地区在利用水体、地形小气候防冻避寒方面,已有不少研究。在丘陵和地形较单调的地区,则多以营造防护林来防冻。如上海长兴岛新桔区,利用法国冬青防护林,防御温州蜜柑冻害,已取得较好的效果。但是采用树木作防护林,由于生长缓慢,在一、二年内难以达到防寒的要     

牦牛血清转铁蛋白的制备及应用--转铁蛋白在无血清细胞培养中的应用

观察了牦牛血清转铁蛋白对无血清细胞培养基中SP2／0细胞株和CHO细胞株生长的影响。支持细胞的培养实验结果：牦牛血清转铁蛋白促SP2／0细胞生长的最大增值浓度为96．0个／ml，倍增时间为22．72h；促CHO细胞生长的最大值浓度为78．6个／ml，细胞倍增时间为19．73h。结果表明，在无血清细胞培养基中加入牦牛血清转铁蛋白能使CHO，SP2／0细胞株正常地生长，繁殖及传代。     

猪IL-10的表达及其免疫原性鉴定

为探明原核表达的重组猪IL-10对仔猪的免疫原性,根据GenBank公布的猪IL-10基因序列(登录号:L20001)设计并合成了扩增猪IL-10基因的引物。利用ConA刺激猪外周血淋巴细胞,通过RT-PCR扩增出pmIL-10完整基因及其成熟蛋白基因片段(pmIL-10),分别插入质粒pVAX1和pET32α(+),对猪IL-10基因进行原核与真核表达。利用纯化的重组蛋白免疫仔猪,制备抗血清,利用间接ELISA检测血清效价。将pVAX-pIL-10转染COS-7细胞,利用RT-PCR检测pmIL-10的转录,以间接免疫荧光(IFA)鉴定其与原核表达产物制备抗体之间的反应。结果显示:该试验成功获得了猪IL-10基因,重组菌pET-pmIL-10/Rosetta经IPTG诱导后,猪IL-10获得表达,目的蛋白表达量以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的39.7%;以白油佐剂重组蛋白免疫仔猪可产生高水平的抗猪IL-10的抗体,经ELISA检测,P/N值可达到8,OD630吸光值可达1.875,该抗体与转染pVAX-pmIL-10的COS-7细胞发生明显的荧光反应,说明原核表达的重组猪IL-10免疫产生的抗体具有生物学活性,为日后利用猪IL-10抗体消除病毒感染中产生的内源性IL-10研究奠定了基础。     

肯尼亚的茶区气候

肯尼亚是非洲最大的产茶国。它年产成茶16万吨左右。由于它具有独特的气候条件,所产的红茶,品质较好,在国际市场上有一定地位。肯尼亚位于东非,跨于赤道上。东南临印度洋,西南濒维多利亚湖。境内除沿海是海岸平原低地外,其它多是海拔1000—1200米左右的熔岩高原。多为热带草原气候。高原上东北部,占全国面积的56％,都是半沙漠干旱区,年平均降水量,仅200—500毫米,是肯尼亚的主要游牧区。中南有肯尼亚山,海拔5199米,山顶终年积雪。高原中西部,纵贯东非大裂谷的东支,上下高差200—300米到千余米不等。谷底南高北低,气候干燥。谷的西部、西南为西南高原,海拔多为1800—2200米。它濒临维多利亚湖,全年气候温和,降水     

徽州地区发展柑桔、枇杷生产的考察报告

<正> 1984年1月,我们考察组在徽州行署及农业、科技、区划、气象等部门的支持和协助下,深入主要县市产区,就徽州地区发展柑桔、枇杷生产的可行性问题进行了粗线条的考察,现将初步意见报告如下: 一、徽州地区具有柑桔、枇杷生产的有利条件,可以适当发展1 徽州地区种植柑桔、枇杷,已有几百年的历史,种质资源和生产经验都比较