利用PCR-DGGE法分析暗纹东方鲀的弧菌菌落组成

采用16S rDNA特征序列PCR-DGGE法,分析了不同饵料饲养的暗纹东方的表皮、性腺和肠道中,以弧菌为主的细菌群落的组成。结果表明:(1)共鉴定出暗纹东方体内18种微生物,均归属于变形细菌的gamma亚群,其中13种为弧菌科细菌,3种为肠杆菌科细菌,2种为气单胞菌属细菌;(2)投喂鲜活鱼虾的与投喂人工配合饲料的暗纹东方肠道和性腺中的细菌组成是不同的,在性腺中分离到的所有12种细菌中,只有2种细菌是相同的,约占17%;在肠道中分离到的所有13种细菌中,有4种是相同的,约占31%。而在表皮上所分离到的11种细菌中,有7种细菌是相同的,约占64%;(3)DGGE特征条带V1、V13、V18、V14和V17所代表的细菌只在表皮组织被分离到,V6所代表的细菌仅出现在以鲜活鱼虾作为饵料的暗纹东方性腺中,V5所代表的细菌仅出现在以鲜活鱼虾作为饵料的暗纹东方肠道中;(4)DGGE特征条带V5、V8、V13、V18、V6、V14和V17所代表的细菌不能在TCBS培养基上培养,占18种被鉴定的细菌总数的39%。     

2BY-2型丘陵山地玉米免耕施肥播种机的设计

研发了2BY-2型丘陵山地玉米免耕施肥播种机,适用于山地、丘陵地区的农业机械。该机可实现山坡地及丘陵地机械免耕精密播种,机组下地一次即可完成灭茬破秸、开沟、施肥、播种、覆土、镇压等复式作业,减少了机组下地次数、提高了作业效率、保证了作业质量、降低了作业成本、保护了土壤环境。经田间试验可知,该机具有结构合理、性能稳定、适应能力强、调整方便、可靠性高等特点,各项性能指标均达到了设计要求,满足丘陵山地玉米免耕施肥播种的农艺要求。     

北极海冰低温微生物的生长条件及其胞外水解酶的研究

对北极海冰获得的14株低温微生物进行培养条件和胞外水解酶活力的研究,结果表明:(1)菌株最适生长温度均为15℃和20℃左右,最适pH在8.0左右,在酸性条件下几乎不生长。生长需要一定浓度的盐,在3%NaC l的培养基中能很好的生长,而在没有NaC l的培养基中不生长。(2)14株菌株能不同程度的分泌胞外水解酶。(3)菌株i429,i539在低温下产纤维素酶的活力最高,具有低温酶的特性。     

高效液相色谱法测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量

研究建立了同时测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量的液相色谱方法。混合型饲料添加剂样品用甲醇提取,以C_(18)柱(150 mm×4.6 mm×5μm)为分析柱,紫外检测器检测,外标法定量。结果表明:在所选择的色谱条件下,空白载体中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚能达到很好的分离;丁香酚、香芹酚和百里香酚在1.0～500 mg/L内线性关系良好,肉桂醛在0.10～50.0 mg/L内线性关系良好;丁香酚、香芹酚和百里香酚最低定量限为50 mg/kg,肉桂醛最低定量限为5.0 mg/kg;加标回收率为83.7%～112%,变异系数为0.70%～6.39%。该方法样品前处理简单、简便可靠,可用于混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚的同步检测。     

2BZJ-500型电动水稻育秧播种机的设计

设计了2BZJ-500型电动水稻育秧播种机,该机可一次性完成铺底土、喷水、播种、覆面土等作业工序,解决了制约我省水稻育秧机械化的瓶颈问题。介绍了该机的设计理念、工作原理、主要工作部件及技术参数的确定。     

利用气相色谱法同步测定饲料香味剂中肉桂醛、香芹酚的研究

研究通过添加回收试验和检测市场香味剂产品的方法建立了饲料香味剂中肉桂醛、香芹酚的同步测定方法。用无水乙醇振摇提取后,气相色谱进行同步测定,用外标法定量。结果表明,此方法前处理简单,回收率高,检测限为100mg/kg,可实现饲料香味剂中肉桂醛、香芹酚的同步测定。     

高效液相色谱法快速测定饲料中孔雀石绿和无色孔雀石绿的研究

本实验建立了高效液相色谱法同时快速测定饲料中孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的方法。采用孔雀石绿快速检测前处理试剂盒提取试样,固相萃取小柱净化,用氰基柱串联氧化铅柱分离,用外标法进行定量。孔雀石绿和无色孔雀石绿的最低定量限均为10μg/kg。本方法快捷,前处理过程简单,易操作,2h内即可完成一批样品的检测,且本方法适合于大批饲料样品的筛选。     

6种非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较

为了比较市场上国产及进口非洲猪瘟病毒(ASFV)ELISA抗体检测试剂盒的产品质量和使用效果,本试验对B、C、D三种进口试剂盒和A、E、F三种国产试剂盒进行敏感性、特异性和重复性比较。结果显示,试剂盒B、D、E、F分析敏感性均为1∶512;试剂盒C分析敏感性为1∶256;试剂盒A分析敏感性为1∶128;诊断敏感性比较结果为试剂盒B>试剂盒D、F>试剂盒E>试剂盒C>试剂盒A;6种试剂盒对7份特异性质控血清的检测结果均为阴性,表明6种试剂盒均具有排除潜在交叉反应的病原抗体的能力;诊断特异性比较结果为试剂盒A、C、D>试剂盒F>试剂盒E>试剂盒B;批内重复性结果显示,6种试剂盒的批内变异系数(CV%)均在15%以内。结果表明,非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测国产试剂盒与进口试剂盒的敏感性、特异性和批内重复性相差无几,国产试剂盒的兴起解决了以往过度依赖昂贵的进口试剂盒的问题,国产化替代进程在不断加速。     

对一株超强马立克氏病毒株的检测和研究

对从发病鸡场分离到的一株超强马立克氏病毒株,用PCR扩增该分离毒株的meq致瘤基因并测定了其序列,发现其与超强病毒株SD2012-1的核苷酸同源性为99%。该分离毒株的meq基因序列在第575～577位比疫苗株CVI988/Rispens的meq基因序列多插入3个碱基（CAC）,与SD2012-1相同。使用该分离毒株进行疫苗免疫攻毒实验,未免组的发病率为80.0％,常规剂量HVT组和10×常规剂量HVT组的发病率分别为73.0％和76.6％,HVT不能提供有效免疫保护。常规剂量CVI988组和10×常规剂量CVI988组的发病率分别为30.0％和30.0％,常规剂量HVT+CVI988组和10×常规剂量HVT+CVI988组的发病率分别为26.6％和26.7％,免疫CVI988疫苗组鸡和HVT+CVI988联苗组鸡的发病率比免疫HVT疫苗组鸡低。说明,野外毒株的不断变异已经突破现有疫苗的免疫保护,会给养鸡业带来严重的损失。     

运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究

将Ｏ、Ａ型ＦＭＤＶＲＮＡ分离纯化，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增其聚合酶编码基因，可检测到Ａ型１０－６倍稀释、Ｏ型１０－４倍稀释乳鼠肌肉毒。Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ扩增该基因内部片段，进一步说明该方法准确可靠。ＲＴ－ＰＣＲ一步完成使整个检测时间不超过１２小时，可在本病的诊断和检疫中推广此法