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建立一种快速鉴别诊断不同型产气荚膜梭菌的PCR检测方法,为动物产气荚膜梭菌病的快速诊断及流行病学调查提供有效的技术手段。克服传统鉴定方法耗时长、费用高的缺点,提高了检测效率。通过对产气荚膜梭菌α毒素、β毒素、ε毒素和ι毒素基因序列分析,利用Premier5.0软件设计并合成了5对特异性引物,建立了针对5种不同型产气荚膜梭菌的PCR鉴别诊断方法。通过反复试验确定了最佳退火温度为53℃。通过灵敏度试验表明,PCR检测方法最低能检测到的DNA浓度α毒素为308pg/μL,β毒素、ε毒素为30.8pg/μL,ι毒素A为0.122pg/μL,ι毒素B为0.05pg/μL。通过特异性试验表明,本方法具有较高的特异性。同时,通过对本方法检测出的阳性样品16S rRNA序列分析发现,与GenBank中的其他产气荚膜梭菌的16S rRNA序列同源性均在98%以上。表明建立的检测方法灵敏度高、特异性强,可以应用于动物产气荚膜梭菌病的实验室诊断。 相似文献
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本研究建立了一种快速诊断动物大肠杆菌病的PCR检测方法,与传统的细菌分离培养、生化鉴定方法相比较有效缩短了检测时间,提高了检测效率,同时为大肠杆菌病的快速诊断和流行病学调查提供了有效的技术手段。通过对大肠埃希菌ECs1048基因序列分析,利用Premier5.0软件设计并合成了1对特异性引物,建立了检测大肠埃希菌ECs1048基因的PCR检测方法。通过反复试验确定本方法的最佳退火温度为56℃。灵敏性试验和特异性试验表明本方法能够检测出的最低菌悬液浓度为1.5×10~2 CFU/mL,并具有较高的特异性。稳定性与重复性试验表明本方法具有良好的稳定性。利用本方法对临床样品的检测结果与生化试验鉴定结果的符合率为100%。本研究建立的检测方法灵敏性高、特异性强、稳定性好,可应用于动物大肠杆菌病的诊断。 相似文献
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禽流感病毒非结构蛋白的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
流感病毒含8个负链单股独立的RNA片段,共编码10种蛋白。每种蛋白具有不同的结构和功能。其中NS基因合成NS1和NS2两种蛋白质,NS1为非结构蛋白,NS2为结构蛋白,这两种蛋白质大量存在于感染的细胞中。NS1蛋白在病毒转录及感染过程中起重要作用,与禽流感病毒的致病性密切相关,其主要功能是以多种方式解除宿主干扰素防御系统。随着分子生物技术的快速发展,关于NS1蛋白在禽流感病毒致病性方面的作用的研究也取得了一定的进展。文章主要对流感病毒NS基因的特点及其编码蛋白质功能进行综述。 相似文献
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为查明猪群的发病原因,对发病猪进行了临床剖检及实验室检测,通过分子病原学检测,排除了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种病原感染,并对病料进行了细菌分离鉴定与药敏试验。结果发现,所分离到的菌株培养特性及生化反应特性与大肠埃希菌基本一致,经进一步鉴定菌体抗原血清型均为O65和O68;药敏试验结果表明,分离株存在多重耐药现象,其对喹诺酮类、大环内酯类、青霉素类、氨曲南类药物均呈不同程度耐药,而其对氨基糖苷类、磺胺类药物均较敏感,进一步试验验证分离株均能产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。 相似文献
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基于猪附睾中低氧的环境,本实验旨在探讨不同负压条件对17℃保存猪精液生化指标的影响。将稀释好的精液分别保存在正常大气压、负0.02 MPa、负0.04 MPa、负0.08 Mpa条件下,而后放置在17℃恒温箱保存,连续保存13 d,每隔24 h检测精子活率、p H、总抗氧化能力、过氧化氢(H2O2)含量。结果表明:在17℃恒温负压下保存的猪精液p H、总抗氧化能力、H2O2含量显著优于常压对照组(P0.05),在负0.04 MPa下保存的猪精液精子活率显著高于其他组(P0.05)。综上可知,17℃恒温保存的过程中,在负0.04 MPa时能够提高猪精液的保存效果,提高猪精子的活力。 相似文献
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为提高猪精液常温保存效果,本试验探讨17℃保存过程中,在Modena稀释液在不同浓度辅酶Q10(Co-Q10)(0、10、15、25、35μg/mL)对猪精液质量的影响。在17℃条件下每隔24 h检测不同组的精子活力、pH,每隔48 h检测精液的渗透压、精子线粒体活性和质膜完整率。结果表明:保存第5天,25μg/mL Co-Q10组精子活力、线粒体活性、质膜完整率均高于其他组(P<0.05),pH下降速度也最慢,并且对渗透压变化影响不大。综合考虑Co-Q10在猪精液17℃保存中的适宜添加浓度为25μg/mL。 相似文献