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以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pMD18-T载体,测序结果显示,扩增片段与GenBank上发表的序列一致。然后将目的片段连接到酵母表达载体pPICZa-A上,得到重组酵母犬IL-2表达载体pPICZaA-CaIL-2,经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。PCR方法筛选重组酵母菌,甲醇诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达上清中有大小约20kDa的目的条带,比实际分子量略大,推测蛋白可能发生糖基化。MTT法测定生物学活性结果表明,重组犬IL-2能够极显著促进犬外周血淋巴细胞增殖。证明酵母表达的犬重组IL-2具有良好的生物学活性。 相似文献
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为探讨运输对犬的影响,本试验以拉布拉多犬为实验动物,运输前和运输2 h后分别采血,应用放射免疫、生化等方法测定血液皮质醇、促肾上腺皮质激素和生化指标。结果显示,运输后皮质醇(COR)浓度和谷草转氨酶(AST)比运输前显著增高(P0.05),肌酸激酶(CK)活性极显著增高(P0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖(GLU)无明显差异(P0.05)。结果表明,2 h运输可引起拉布拉多犬血液皮质醇、谷草转氨酶和肌酸激酶水平的变化。 相似文献
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水稻(Oryza sativa L.)生长发育与其体内的激素调节密切相关,本研究从水稻野生型黎榆B(O.sativa L.ssp.japonica C.V.Liyu B)基因组中克隆了一个与激素调节相关的新基因OsJT1。生物信息学分析表明:水稻OsJT1基因cDNA全长650 bp、编码216个氨基酸;OsJT1蛋白的理论分子量为22.99 kD,等电点为7.68,是亲水性的稳定蛋白;OsJT1蛋白的二级结构中,9个α-螺旋,16个无规则卷曲,10个B折叠,5个β转角。本研究构建了融合表达载体(p Ca MV35S::OsJT1:EGFP),通过农杆菌介导法获得OsJT1过表达株系,性状分析表明:过表达株系的株高和结实率下降、叶宽增加,且结实率和叶片宽度与野生型差异均达到显著水平(p0.05)。根据生物信息学及过表达转基因植株的表型分析内容,初步推断该基因可能与激素调节相关。 相似文献
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杂种劣势是在产量、生物量以及其它一些农艺性状表现与杂种优势相反的一种现象,而在杂种劣势的相关分子机理研究方面很少受到关注。为了解析杂种劣势的相关分子机理,本研究旨在利用杂种劣势相关的3个粳稻品种‘Aranghyangchalbyeo’(CH7)、‘Sanghaehyangheolua’(CH8)和‘Shinseonchalbyeo’(CH9)进行全基因组重测序,分析全基因组序列变异,解析杂种劣势的遗传基础。通过与粳稻品种‘日本晴’参考基因组的比对分析,在CH7、CH8和CH9基因组中分别获得了574551个、1026428个和792465个变异位点,包括SNPs和InDels变异位点。同时,基于基因组的拷贝数变异(CNVs)检测,在CH7、CH8和CH9基因组中分别获得了5698个、6872个和6133个拷贝数变异位点。此外,本研究也发现CH7、CH8和CH9基因组的变异位点在水稻的12条染色体上的分布是不均匀的。这些结果明确了相关基因组中的变异位点信息,为进一步研究杂种劣势的遗传机理提供了基础。 相似文献