九味中药及其复方对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

针对导致奶牛乳房炎的主要病原菌(大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌),用平板法测定了9味中药和4种复方中药的体外抑菌效果。结果表明,方剂1及方剂2的综合效果较好,对于葡萄球菌以黄芩、黄连、红花、鱼腥草的抑菌效果明显,对大肠埃希菌以黄芩、鱼腥草、蒲公英和黄连的效果好。为防治奶牛乳房炎的中药配方科学筛选提供了理论依据。     

大肠杆菌O157:H7菌毛分子伴侣基因的克隆与表达

根据Genebank中已登录的大肠杆菌O157:H7菌株EDL933基因序列中茵毛分子伴侣ycbR基因序列设计1对引物,并分别在其5'端分别加入Neo I、Xho I酶切位点,以大肠杆菌O157:H7国内分离株97094的DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增出710 bp的DNA片段.回收并纯化该DNA片段,用限制性核酸内切酶Nco I、Xho I同时消化DNA片段和双酶切栽体质粒pET28a(+).将它们回收纯化并连接,然后转化到宿主菌大肠杆菌DH5a,从该菌中提取重组质粒,用PCR、限制性内切酶位点分析及核苷酸序列测定法对克隆的重组质粒进行鉴定,表明ycbR基因定向克隆到了载体质粒pET28a(+).再将重组质粒转化到表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3),在含Kan抗生素LB培养基中经IPTG诱导12～16 h,做SDS-PAGE分析,表明ycbR基因在菌株中获得高效表达,表达蛋白相对分子质量大小约为30 000,与预期结果一致.为研究大肠杆菌ycbR基因产物的功能和致病作用奠定了基础.     

胶东地区耐药猪源大肠杆菌I型整合子-基因盒流行状况分析

在胶东地区119株多重耐药大肠杆菌中,共92株菌有I型整合子整合酶基因,检出率达77．31％。92株I型整合子携带大肠杆菌共扩增出7类不同大小的基因盒插入区片段,大小分别为1008bp、1318bp、1586bp、1663bp、1913bp、1945bp、3149bp,其中以大小为1008bp的插入区片段的检出率最高,为31．67％。而检出率最低的为长度为1318bp的基因盒插入区。将基因盒插入区扩增片段的测序结果与Genebank中的相关序列进行比对,得出I型整合子携带的耐药基因盒种类分别为aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB、dfrA1、dfrA12、dfrA17、dfrA27、1nuF、cmLA6、aar-3、orff分别编码对相应药物的耐药性。     

不同绿色预混料对商品肉猪生产性能的影响

选择体重 15kg左右的杜×长×本三元杂交仔猪 12 0头 ,分为 3组 ,每组设 5个重复 ,每重复 8头猪进行试验 ,以观察不同绿色预混料对商品肉猪生产性能的影响。各组基础日粮完全相同 ,对照组饲喂含有药物添加剂的商品性预混料 ,2个试验组分别饲喂不含药物添加剂的自配预混料。试验结果表明 ,2个试验组的平均日增重明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而料重比和腹泻率明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,肌肉pH值及肌内脂肪含量无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,试验 2组与对照组相比 ,肌肉总色素含量明显提高 (P <0 .0 5 ) ,滴水损失明显下降 (P <0 .0 5 )。     

Ⅰ群禽腺病毒血清4型QD株的分离与鉴定

为了对Ⅰ群禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的毒株进行分离,试验采用病毒分离、DNA提取、PCR鉴定、Hexon基因序列分析、病毒毒价测定、病毒形态学观察及动物回归试验等方法对青岛地区疑似心包积水及包涵体肝炎病鸡的肝脏进行了研究。结果表明:该分离毒株提取的DNA经PCR鉴定为阳性;该分离毒株序列与已发表的Ⅰ群禽腺病毒4型序列同源性为97.7%,病毒毒价为1×10~8TCID_(50)/0.1 mL;病毒形态为球形、无囊膜、二十面体对称的粒子结构;在动物回归试验中,病死肉鸡心包有积液,发病鸡肝脏的中央静脉广泛淤血,肝细胞发生空泡样变性,细胞浆和细胞核内可见嗜碱性包涵体。说明该分离株为Ⅰ群禽腺病毒血清4型毒株。     

犬瘟热病毒强毒株在Vero-SLAM细胞上传代后的基因突变分析

为了了解犬瘟热病毒强毒株全基因组序列在Vero-SLAM细胞上传代培养后的突变情况,本试验利用犬瘟热病毒强毒分离株HeBei株第12代细胞毒,通过RT-PCR方法分段扩增犬瘟热病毒全基因,对扩增出的各个片段进行克隆和鉴定,并应用SeqMan程序将所测得的序列进行拼接成Hebei株全长cDNA序列。结果表明,全基因与原始序列相比有24处碱基突变,总突变率为0.15%,其中3处为非编号码区的突变,其余21处在编码区,碱基突变率最高的蛋白基因为F(0.36%),最低为N(无突变)。氨基酸突变率分别为N蛋白0.00%;P蛋白0.39%;M蛋白0.30%;F蛋白0.60%;H蛋白0.50%;L蛋白0.18%。表明犬瘟热病毒强毒株经Vero-SLAM细胞传代培养后基因突变主要发生在F蛋白基因上。     

抗球虫中药制剂对肉鸡血清学指标的影响

本试验旨在研究抗球虫中药制剂对肉鸡血清学指标的影响。720只1日龄健康AA肉仔鸡随机分为6组,第1～5组为试验组,分别在基础日粮中添加0.4%中药制剂、0.8%中药制剂、0.4%中药制剂+0.5 mg/kg地克珠利、1 mg/kg地克珠利、60 mg/kg盐霉素,对照组（第6组）饲喂基础日粮。结果表明,血清AKP活性第3组和第4组显著高于对照组（P＜0.05）,血清ACP活性、LPL活性、Ca和P含量各试验组与对照组均无显著差异（P＞0.05）。血清LPS活性,第1～4组显著或极显著高于对照组（P＜0.05或 P＜0.01）。第1、2、3组TC含量显著低于对照组、第4组和第5组（P＜0.05）。血清BUN含量,第2组和第3组极显著低于第4、5组（P＜0.01）,第5组显著高于对照组（P＜0.05）。GOT活性第1～4组显著或极显著高于对照组（P＜0.05或 P＜0.01）。GPT活性各试验组与对照组差异不显著（P＞0.05）。血清TAA含量,第1～3组显著低于第4～6组（P＜0.05）。     

基于大通量药敏检测的兽用抗菌药物抗药性管理策略

兽用抗菌药物滥用导致普遍的抗药性和药物残留,需要深入研究用药策略和抗药性检测方法,对抗药性进行有效管理。通过改进CLSI药敏试验方法,设置1/4、1/2、1、2、4倍的1/10临床剂量为检测浓度,就山东省平度市19个养殖场病死鸡和健康鸡群分离到的470株大肠杆菌对14种常用抗菌药物的敏感性进行分析。结果显示,91.67%的菌株对1/10临床剂量呈现多重抗药性;虽然各场敏感药物呈现一定的离散性,但1/10临床剂量的硫酸多黏菌素和甲磺酸培氟沙星在所有的养殖场均能杀灭90%~100%的大肠杆菌。建议统一同步使用敏感药物,进一步根据药敏监测结果,适时轮换用药,不但能取得较好的治疗效果,还可减少抗菌药物的使用种类和数量,避免多重抗药性的产生。     

鸽圆环病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立及应用

为建立一种针对鸽圆环病毒(PiCV)的快速诊断方法,试验根据PiCV的Rep保守基因序列,设计合成一对特异性引物,建立了PiCV荧光定量PCR检测方法,对其敏感性、特异性、重复性进行评价并利用该方法对临床样本进行检测.结果表明:在最佳反应条件下,所建立的PiCV荧光定量PCR方法在1.43×102～1.43×108 c...     

猪圆环病毒2型鸡痘病毒活载体疫苗诱导的CTL杀伤活性检测

通过基因工程的方法获得猪圆环病毒2型(PCV-2)二联重组鸡痘活载体疫苗vUTAL-P1-ORF2ORF1和核酸疫苗pVAX1IL-18ORF2ORF1.将采取不同的免疫方案接种本体动物猪,在二免后15 d分别采猪抗凝血,用淋巴细胞分离液处理,得到淋巴细胞作为效应细胞;构建重组质粒pDisplay-ORF2,并转染PK...