2018年河南省兽医系统实验室检测能力比对结果分析

为评价和提高实验室检测能力和水平,建立省市县三级动物疫情监测预警机制和风险评估模型,2018年河南省组织开展了兽医实验室检测能力比对,共有18个省辖市、10个省直管县/市和117个县/区级实验室参加,其检测结果平均正确率分别为97.30%、93.68%、91.97%。结果表明,全省大部分兽医实验室均已具备相应的检测能力,能够为河南省动物疫情风险评估提供技术支撑,但市、县两级实验室检测水平存在一定差距,县级兽医实验室检测诊断能力和水平有待提高。这提示应进一步加大实验室资金投入与实验室建设,增强实验室内外管理水平,提升技术人员业务能力,加强技术支撑,完善检测标准体系等。     

15株猪流行性腹泻病毒河南株ORF3全基因的克隆与序列分析

为调查近年来河南省猪流行性腹泻病毒（PEDV）的遗传变异情况,从2015—2017年河南部分地区猪场患腹泻仔猪的小肠组织及内容物中克隆了15株PEDV ORF3基因,并对其进行了序列测定及分析。结果显示,15株PEDV河南株 ORF3 基因序列长度均为675 bp。15株PEDV分离株之间核苷酸同源性为94.4％～99.9％,与经典毒株CV777、弱毒株attenuated DR13核苷酸同源性分别为95.7％～97.0％和96.6％～98.1％。遗传进化分析显示,PEDV分为两大群,3株分离株属于G1群,单独成一个小的分支。其余12株分离株与往年河南流行株、大部分国内分离株、韩国、日本、美国及法国毒株位于G2群,亲缘关系较近,而与经典毒株CV777亲缘关系较远。表明河南省PEDV有变异和进化趋势,为河南省PED的防控和疫苗的研制提供技术支持。     

2020—2021年河南省部分猪场和屠宰场猪伪狂犬病血清学调查

研究用ELISA方法对2020—2021年河南省18个市的猪进行猪伪狂犬病感染抗体检测,检测样品份数为39523份。结果显示,2020—2021年猪伪狂犬病感染抗体个体阳性率分别为20.93%、17.28%;种猪场阳性率分别为14.78%、9.54%,商品代养殖场阳性率分别为21.56%、20.93%;屠宰场阳性率分别为24.45%、19.16%。可见,河南省部分猪场和屠宰场总体猪伪狂犬病感染情况2021年低于2020年,说明该病防控与净化工作取得一定成效。     

猪细环病毒两种基因型双重PCR检测方法的建立

为建立检测猪细环病毒两种基因型(PTTV1和PTTV2)的双重PCR方法,本研究根据GenBank中PTTV1、PTTV2的UTR基因序列,设计合成了2对特异引物,并通过对扩增条件的筛选,建立了PTTV1和PTTV2的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PTTV1的324 bp和PTTV2的522 bp特异性片段,而扩增猪圆环病毒2型和猪细小病毒DNA结果均为阴性,对PTTV1和PTTV2的最低检出量分别为100 copies和10 copies。该方法适合对PTTV1和PTTV2的联合检测。     

2017—2020年河南省猪伪狂犬感染抗体和病原检测结果分析

为了解河南省规模猪场猪伪狂犬病感染状况,2017—2020年连续四年对河南省规模养猪场猪伪狂犬病毒gE抗体和病原进行了检测。结果表明,2017—2020年,猪伪狂犬gE抗体平均个体阳性率分别为26.48%、28.88%、25.37%、20.30%,平均场群阳性率分别为55.48%、52.55%、51.14%、52.77%。种猪场猪伪狂犬gE抗体平均个体阳性率分别为25.19%、19.89%、20.94%、14.78%,整体呈逐年下降趋势;平均场群阳性率分别为44.65%、37.89%、40.74%、43.48%。,商品猪场猪伪狂犬gE抗体平均个体阳性率分别为27.27%、35.06%、27.86%、21.56%,平均场群阳性率分别为61.46%、60.77%、55.79%、54.36%,整体呈逐年下降趋势。从季节分布来看,春季、夏季、秋季、冬季规模猪场猪伪狂犬病病原平均个体阳性率分别为4.72%、0.53%、0.92%、1.90%,平均场群阳性率分别为14.53%、5.39%、5.41%、8.87%。可见,全省猪伪狂犬病防控形势复杂严峻,净化任务仍然较重。     

2018~2019年河南部分猪场和屠宰场猪伪狂犬病血清学调查

调查分析2018~2019年河南省猪伪狂犬病血清学感染情况。采用阻断ELISA方法对2018~2019年河南省18个市的猪进行猪伪狂犬病感染抗体检测,检测样品份数7861份。结果发现,2018~2019年猪伪狂犬病感染抗体个体阳性率分别为29.42%、 23.33%;种猪场阳性率分别为18.86%、 15.29%,商品代养殖场阳性率分别为35.32%、 27.09%、屠宰场阳性率分别为47.22%、 41.06。总体猪伪狂犬病感染情况2019年低于2018年。猪伪狂犬病污染面比较广,但总体状况有所好转,呈下降趋势。     

2021年河南省O型口蹄疫免疫效果评估

为了解河南省O型口蹄疫（FMD）的免疫抗体水平,评估其免疫效果,2021年在河南省规模场、屠宰场与散养户,随机采集785场次22 879份血清样品,采用ELISA方法检测O型FMD免疫抗体,并对检测结果进行不同畜种、不同场点类型、不同季节、不同行政区域的统计分析。结果显示：2021年全省O型FMD抗体免疫合格率为80.30%,其中猪、牛、羊抗体免疫合格率分别为79.09%、92.48%、72.26%。猪场中,种猪场、商品代场、屠宰场O型FMD抗体免疫合格率分别为85.24%、82.57%、65.56%;牛场中,种牛场、商品代场、屠宰场、散养户O型FMD抗体免疫合格率分别为96.72%、91.75%、94.17%、100%;羊场中,种羊场、商品代场、散养户O型FMD抗体免疫合格率分别为78.63%、72.37%、69.46%。春、夏、秋、冬季的O型FMD抗体免疫合格率分别为79.42%、79.00%、80.58%、86.12%。18个地市中,有2个地市O型FMD抗体免疫合格率低于70%。结果表明：河南省O型口蹄疫整体免疫效果较好,但羊场免疫效果相对较差,尤其是散养户,免疫抗体合格率未达到...     

猪伪狂犬病病毒疑似感染人的实验室诊断及分析

为给人感染伪狂犬病病毒(PRV)来源分析及其感染机理研究提供相关信息,对一例疑似感染PRV患者的血清、脑脊液、拭子及其工作猪场的病猪血清、组织等样品进行病原学、血清学检测及病毒分离,对其工作猪场开展流行病学调查,并采集患者同事血清样品进行PRV抗体检测。结果显示：病人样品经数字PCR检测均为PRV核酸阳性;病人发病后5～90 d内的血清样品均为PRV gB抗体阳性,gE抗体发病后18 d转为阳性并一直持续到发病后90 d;病人同事均未表现临床症状,其血清样品PRV gB抗体阳性率为22.2%,gE抗体均为阴性;从病人工作猪场的病猪样品中分离到PRV,且样品经荧光定量PCR核酸检测及ELISA抗体检测均检出阳性;病人工作猪场为PRV阳性场,病人及PRV gB抗体阳性同事均有直接接触病猪史。结果表明,患者感染的PRV来自其工作猪场猪群的可能性较大,人感染后表现出和动物感染相似的抗体消长规律。PRV对公共卫生的影响及其感染机制需进一步关注和研究。     

ILTV gB基因与鸡IL-18基因共表达DNA疫苗的免疫原性

本试验构建了能分别或同时表达ILTV gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB、pIRES-IL18、pIRES-gB/IL18。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,35日龄加强免疫1次,二免后2周用ILTV HN1株进行攻毒。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB+pIRES-IL18免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,能明显增强ILTV DNA疫苗对强毒的攻击保护,但pIRES-gB/IL18免疫组要优于pIRES-gB+pIRES-IL18混合免疫组及其他对照组,差异显著或极显著。结果表明,鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗的免疫原性。     

河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测

为了解河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟的抗体保护水平,2018年采用ELISA方法,对河南省部分一级监测网点猪场开展了猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测。检测结果显示:猪繁殖与呼吸综合征抗体总阳性率为91.28%,猪瘟抗体总阳性率为95.87%。其中:后备猪、种公猪、经产母猪、保育猪、育肥猪血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为93.68%、93.87%、92.16%、88.93%、88.65%,猪瘟抗体阳性率分别为98.51%、98.77%、98.45%、85.71%、91.82%;祖代场、父母代场、商品场血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为94.63%、88.02%、89.46%,猪瘟抗体阳性率分别为98.40%、96.16%、91.03%。检测结果表明:河南省一级监测网点猪场的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗体水平较高,但保育猪群和育肥猪群偏低,需要对其加强抗体监测,以确定最佳免疫方案;商品代猪场抗体水平略低于祖代和父母代猪场,这要求畜牧兽医部门需同时加强对所有猪场的日常监督与监管。