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猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
根据已发表的PCV—1和PCV-2全基因组序列,设计了3条引物,组成PCV-2的特有引物对和PCV-1、PCV-2的共有引物对,分别扩增长度为472bp和339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性,将472bp的扩增产物纯化后,克隆到pMD18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定,并测序。将该序列递交NCB1进行BL-AST同源序列比较,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV-2毒株核苷酸序列的同源性均在99%以上,与PCV—1毒株的同源性为86%。结果显示,该方法最少可用于3μg病料组织和0.75pg DNA的PCV-2检出.具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市47份“猪高热综合征”病料,PCV-2感染阳性率为36.17%,PCV—1单独感染阳性率为34.04%。 相似文献
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自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为 3.46 kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因. 相似文献
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养殖大黄鱼低温弧菌病病原的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
浙江沿海深水网箱养殖大黄鱼冬天发生大量死亡,从病鱼体内分离出致病力较强的细菌GYC0227。人工感染试验证实这株菌为大黄鱼的病原菌。对细菌进行了形态、生理生化特性的测定,并进行了16S rRNA分子鉴定。PCR扩增获得了GYC0227菌株大小约1.5kb的16S rDNA部分基因片段,产物经回收纯化,克隆到pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,对阳性克隆子进行酶切及PCR鉴定,并测序,将测定的序列递交NCBI进行BLAET同源序列比对,与溶藻弧菌的标准菌株的16S rDNA具有96%的同源性。结合菌株的生理生化特性,GYCD227菌株属于溶藻弧菌。该菌适应于低温生长,生长温度范围为7—25℃,并测定了其对14种药物的敏感性。 相似文献
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海产品甲醛的形成及其对鱼肉品质的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
海产品是我国重要的农副产品资源,其安全性逐渐受到关注。近年来,"甲醛问题"给海产品带来了巨大的的经济损失,也一直是全社会关注的热点。目前已证实,海产品在贮藏加工过程中,在内生酶作用下会生成甲醛。综述了海产品甲醛的存在形式、影响因素及对鱼肉品质的影响。 相似文献
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饲喂脆茎全株水稻对生长肥育猪生长性能、养分消化和胴体品质的影响 总被引:14,自引:1,他引:14
体重相近的杜洛克生长母猪54头,随机分成3组(每组3个重复),研究脆茎全株水稻(3个水平0、10%和20%)用于生长肥育猪日粮,对猪的生长性能、养分消化、胴体品质和肉质的影响。结果表明,生长猪阶段(29~52kg)对照组、10%组和20%组的采食量、平均日增重和料重比均无显著差异(P〉0.05)。肥育猪阶段(54~85kg)采食量和平均日增重,20%组显著低于对照组(P〈0.01),10%组与对照组之间无显著差异(P〉0.05);各组料重比均无显著差异(P〉0.05)。生长猪阶段10%组和20%组各种养分的消化率都低于对照组;而肥育猪阶段,两组NDF消化率显著低于对照组(P〈0.01),其它养分消化率与对照组无显著差异。与对照组相比,10%组和20%组屠宰率有所下降,而瘦肉率提高,眼肌面积增大,背膘厚降低,但差异均不显著(P〉0.05)。10%组和20%组的背最长肌蛋白含量增加,脂肪含量降低,其中20%组与对照组差异显著(P〈0.05);滴水损失和大理石纹及肉色评分各组之间均无显著差异(P〉0.05),20%组宰后24h的pH,显著高于对照组(P〈0.01)。 相似文献
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研究评价了茶多酚对腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)的抑菌和杀菌效果,并初步探讨了其抑菌机理。结果表明,茶多酚对腐败希瓦氏菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别为1 mg·mL-1和16 mg·mL-1,2 mg·mL-1茶多酚处理能显著抑制细菌的生长曲线,在25℃和4℃作用96 h和192 h希瓦氏菌分别下降了105 CFU·mL-1和106 CFU·mL-1,杀菌作用表现时间依赖性。茶多酚单体的杀菌能力大小分别为EGCG>ECG>EGC>EC。在茶多酚作用下,腐败希瓦氏菌胞外上清中Na+/K+-ATP酶和AKP酶活性显著上升,投射电镜(TEM)观察细菌出现了破损、变形等现象。可见,茶多酚能有效抑制腐败希瓦氏菌的生长,在低温长时间下仍表现出杀菌能力,其杀菌机制主要是引起细菌细胞壁和细胞外膜损伤,使胞内成分泄漏,导致细菌死亡。 相似文献
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水产品气调保鲜技术研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
主要介绍了气调包装(Modified atmosphere packaging,MAP)保鲜技术在水产品中的应用及其研究现状.MAP技术能够通过抑制微生物的生长等机制延长水产品货架期.MAP混合气体中的CO2为抑菌的关键成份,O2也是重要成份.MAP水产品的品质和货架期取决于包装气体的成份及比例、储藏温度、原料种类及原料初始品质、混合气体的体积与包装物料的质量比(V/W)和包装材料等因素,其中储藏温度是关键因素.MAP水产品的腐败主要是一种或几种特定腐败菌(Specific Spoilage Organisms,SSOs)导致的;耐CO2的发光杆菌属(Photobacterium phosphoreum)为MAP鳕的特定腐败菌;嗜冷乳酸菌是多种MAP水产品的特定腐败菌.同样条件下,MAP水产品的品质和安全性优于真空包装和空气包装. 相似文献