虎源大肠杆菌ESBLs基因型的检测

为检测虎源大肠杆菌的耐药性,根据超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行情况指导临床合理使用抗菌药物,有效控制产ESBLs菌株的流行和感染。实验采用K-B法检测了30株虎源大肠杆菌对20种药物的耐药性,同时用PCR方法对确证的产ESBLs大肠杆菌进行TEM、CTX-M、OXA和SHV基因型检测。结果显示:21株虎源大肠杆菌为产ESBLs株,阳性率为70%。PCR扩增出了片段大小与预期相符的CTX-M型、OXA型、SHV型和TEM型基因。4个基因型的阳性率分别为50%、20%、6. 67%、80%。可见,东北虎林园中产ESBLs的虎源大肠杆菌的检出率较高,TEM型为主要流行基因型。另外,发现产酶大肠杆菌比非产酶大肠杆菌的耐药性更高。     

IBV小囊膜蛋白基因的原核表达载体构建及序列分析

本研究以IBV M41毒株为材料,克隆该毒株的E蛋白基因,并将其连接到表达载体pGEX-6P—1中,为E蛋白的进一步研究提供条件。分析和比对了多个IBV毒株和各群冠状病毒E蛋白的同源性,发现各株IBV的E蛋白相对比较保守,但与其它的冠状病毒的E蛋白同源性较低,差别较大,和SARS病毒E蛋白一样,独立分型。     

一株野鸭源禽流感病毒NS基因的分子克隆和测序

根据Genbank上已发表的H4N6亚型的NS基因序列,设计一对特异性引物,成功扩增出一株野鸭源禽流感病毒扎龙分离株A/mallard/ZhaLong/88(H4N6)的NS基因,并将该片段连接到PMD18-T载体上,连接产物转化至DH5α感受态细胞,对目的片段进行测序,获得了NS基因全序列,大小为887bp。该片段的核酸序列与已知的几个毒株序列进行同源性比较,同源性为78.4%～97.6%,推导的氨基酸序列同源性为80.8%～98.6%。     

貉敌百虫急性中毒

有机磷农药在现代农业生产中广泛使用,虽然它对各类昆虫具有很好的杀灭效果,但其对哺乳类动物的毒性也非常大,动物急性有机磷农药中毒时有发生。有机磷农药进入动物体内后与胆碱酯酶结合形成较为稳定的磷化胆碱酶,使其失去分解乙酰     

传染性法氏囊病毒VP_2在酵母细胞内的高效表达及其免疫原性研究

 应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒 (IBDV)VP2 基因片段。首先用OLIGO设计 1对引物P5、P6 ,以插入IBDVVP2 基因的 pUC19为模板 ,扩增出带有终止密码子的 1.5kb片段 ,将此片段正向亚克隆到 pPICZA表达载体上 ,将构建好的载体pPICVP2 用SacI内切酶线性化后 ,转染酵母PichiapastorisGS115细胞 ,经PCR鉴定 ,筛选出 5 0多个重组子。分别用甲醇诱导后 ,经SDS PAGE凝胶电泳、琼脂扩散试验、Dot ELISA检测 ,得到 9个不同程度表达 4 1kuVP2 活性蛋白的阳性重组子。经凝胶薄层扫描仪分析 ,表达蛋白占酵母细胞总蛋白的最高比率为 16 % ,表达量为 0 .6 2 0 8g·L-1。表达产物免疫SPF鸡可诱导产生特异性抗体 ,并能保护鸡抵抗超强毒致死性攻击 ,具有良好的免疫原性。     

抗IBDV-IBV二联卵黄抗体的制备与应用

鸡传染性囊病是由传染性囊病病毒(IBDV)引起的幼鸡的一种急性、高度接触性传染病.传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引发的鸡的一种急性、高接触性的呼吸道和泌尿生殖道疾病.这两种病毒性疾病一直是危害世界养禽业的重要传染病,主要依靠接种疫苗进行防控.然而,随着这两种病毒的不断变异,疫苗接种也不能达到理想的保护效果.近两年来,黑龙江地区的一些养殖场多次发生了IBDV和IBV混合感染,导致大批幼龄鸡只发病死亡,造成巨大的经济损失.鉴于此,本试验将从当地分离的这两种疫病流行毒株制作成油佐剂灭活疫苗,对刚开产的蛋鸡进行多次加强免疫,制备抗IBDV-IBV二联高免卵黄抗体,尝试对当地发生的疫情进行有效控制.     

影响发动机润滑系统技术状态的因素分析

发动机润滑系统的性能对发动机功率及零件寿命影响极大.为此,对润滑系统性能的影响因素做以分析,从而找到保证其优良性能的办法.     

兰狐和银黑狐免疫球蛋白的提纯与鉴定

采用硫酸铵盐析和Agarose-Protein G亲和层析相结合的方法，从兰狐和银黑狐血清中提取和纯化了免疫球蛋白（IgG），应用SDS-PAGE分析表明：提纯的免疫球蛋白纯度高，重链和轻链的分子量分别为45ku和21ku左右；以犬瘟热病毒（CDV）为包被抗原的间接ELISA试验结果表明：提纯的蛋白免疫小鼠分别制备的抗兰狐和银黑狐免疫球蛋白抗体作为二抗检测CDV阳性血清具有良好的生物活性。本研究制备的高纯度的兰狐和银黑狐免疫球蛋白，对今后狐源CDV等疫病血清流行病学的调查、诊断试剂盒的开发及疫苗免疫效果的评价奠定了基础。     

貉IL-2基因的克隆与进化关系的分析

根据GenBank上已发表的犬科动物的白细胞介素-2（IL-2）基因序列，在开放阅读框架上下游的保守区域设计了1对引物。无菌采取貉血，使用淋巴细胞分离液分离外周血液中的淋巴细胞，加入ConA，于二氧化碳培养箱中培养48h后收集培养细胞。以培养细胞中提取的总RNA为模板，应用RT—PCR方法，扩增出貉的IL-2基因。分离纯化片段，连接T载体转化大肠杆菌并测序。结果表明：IL-2基因开放阅读框架全长486bp，编码155个氨基酸。该序列与大、狐等犬科动物的IL-2基因同源关系最近，与大熊猫、家猫的IL-2基因同源关系相对较近，与人、马、牛、绵羊的IL-2基因有一定的遗传距离，与禽类鸡的IL-2基因同源关系最远。     

空中番薯—无土栽培连续结薯技术

该技术利用深液流栽培技术种植番薯,大大提高了番薯块根的产量和品质,既可用于设施环境下块根类作物的周年生产,也可用于露地单茬生产,培养出的"番薯树"实现了"空中结薯",具有很好的观赏和科普价值。该文从品种选择、育苗、栽培管理等方面详细介绍了温室条件下空中番薯的栽培管理技术,以期为发展空中番薯栽培技术提供参考。