乙型脑炎病毒NS1和NS1-2A蛋白的真核表达及其差异性研究

为深入研究乙型脑炎病毒（JEV）NS1和NS1-2A蛋白的表达和免疫效果差异,本试验构建并扩增C-端含Flag标签的NS1和NS1-2A基因,利用T4 DNA连接酶分别连接到质粒pcDNA3.1（+）上,构建重组质粒pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag。将这两种真核表达质粒分别转染BHK-21细胞,利用RT-PCR、IFA和Western blotting检测NS1和NS1-2A蛋白在体外的表达情况,用pcDNA3.1-NS1-Flag、pcDNA3.1-NS1-2A-Flag和pcDNA3.1（+）免疫BALB/c小鼠,检测这两种蛋白在体内的表达差异。结果显示,试验成功构建了NS1和NS1-2A基因的真核表达载体pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag,IFA和Western blotting鉴定NS1和NS1-2A蛋白成功表达,重组质粒pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫小鼠后可诱发机体产生特异性体液免疫,pcDNA3.1-NS1-2A-Flag联合免疫组小鼠血清抗体效价和INF-γ细胞因子分泌水平比pcDNA3.1-NS1-Flag免疫组高,且与pcDNA3.1（+）空载体免疫组差异极显著（P<0.01）;pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫组小鼠体内的INF-γ分泌量会增多,免疫第4周达到最高后逐渐降低。pcDNA3.1-NS1-Flag和pcDNA3.1-NS1-2A-Flag免疫小鼠能够刺激JEV特异性抗体的分泌和增强机体的细胞免疫功能,且NS1-2A联合基因的免疫效果优于NS1单一基因,为进一步研究JEV的非结构蛋白功能、研发NS1和NS1-2A基因疫苗奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR 检测方法的建立

为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）与猪流感病毒（SIV）二重RT-PCR 方法,研究根据GenBank 登录的相关病毒基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上2 种病毒的RT-PCR 诊断方法,扩增的目的片段长度分别为364 bp（PRRSV）和981 bp（SIV）。通过实验证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性,对PRRSV 和SIV 的核酸检测最低浓度分别为 3.2×10-3 ng 和2.7×10-3 ng。应用该方法对32 、份临床样品进行检测发现PRRSV 阳性率为43.8%,SIV 阳性率为31.3%,二重感染率为9.4%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上2 种病毒提供了有力手段。     

应用六重PCR方法对猪流产死胎病原的快速检测

试验采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对贵州省贵阳市某猪场送检的死胎病料进行了PRV、PPV、PCV2、PRRSV、CFSV和JEV的快速检测,结果表明该猪场送检的流产死胎同时感染有PRV和PCV2,表明种猪场应重视繁殖障碍性病毒性疫病的免疫预防,否则将造成不必要的损失。     

规模化猪场猪常见病毒性腹泻的诊断及防治

规模化猪场猪常见猪病毒性腹泻,是由包括猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、流行性腹泻病毒(PEDV)和轮状病毒(RV),以及最新报道新发现的猪嵴病毒(PKV)和猪博卡病毒(PBoV)中一种或多种不同病毒单独或混合感染猪的机体后导致的腹泻与引起消化道生理机能紊乱的疾病。这些疫病在临床上的症状、流行病学及病理变化等方面十分相似,病猪表现出发病急、传播快、死亡率高等特点。每年冬春寒冷季节高发期,给规模化猪场带来重大经济损失。主要对规模化猪场猪常见病毒性腹泻的临床表现和预防措施进行了综述,为临床对病毒性腹泻的诊断及防治提供参考。     

浅谈大黄和巴豆的药理作用研究

大黄为蓼科植物药用大黄、掌叶大黄或唐古特大黄的干燥根及根茎。生用,或酒制、蒸熟、炒黑用,入脾、胃、大肠、肝、心包经。具有攻积导滞、泻火凉血、利胆退黄、活血祛瘀之功效。巴豆为大戟科植物巴豆的干燥成熟种子。生用、炒焦用或制霜用,入胃、大肠、肺经。具有泻下寒积,逐水退肿,祛痰,蚀疮之功效。本文就近年来对大黄和巴豆的药理作用的研究成果进行了综述,为大黄巴豆煎液药理作用的研究提供重要的理论基础。     

三种抗球虫药物对四川家兔球虫病的防治对比试验

2001年作者采用地克珠利、莫能菌素及氯苯胍3种抗球虫药物在四川某兔场进行了家兔球虫病的防治对比试验,本试验以死亡率、平均日增重及平均克粪卵囊数(OPG)3个指标综合评定这3种药物的抗球虫活性。试验结果表明,地克珠利(1mg/kg)、莫能菌素(30mg/kg)能有效地防治家兔球虫病,且有明显的促生长作用,而氯苯胍(100mg/kg)的防治效果较差。     

梅花鹿坏死杆菌病的诊治

<正>2013年7月份,贵州省某梅花鹿养殖基地饲养的梅花鹿发生蹄冠部及体表皮肤化脓、坏死,并形成瘘管、跛行行为特征的疾病。根据临床症状和实验室诊断,确诊为坏死杆菌引起的梅花鹿腐蹄病,现将诊断结果报道如下。1临床症状5头母鹿表现为精神不振,食欲减退,喜卧,不愿走动,行走时跛行,有痛感,一侧下肢不敢着地,呈"三角跳"姿势,且病鹿蹄部及体表皮肤出现肿胀、疼痛、化脓、坏死、溃疡并有恶臭浓汁等,初步诊断为由     

某猪场猪流行性腹泻和传染性胃肠炎混合感染的诊断

贵州省某规模化猪场仔猪突生呕吐、腹泻,为确定该猪场病猪发病的病因,通过调查了解该猪场病猪的临床表现,并对送检样品进行了病理剖解观察,初步判断该猪场发病猪疑似为猪流行性腹泻(PED)和猪传染性胃肠炎(TGE)感染.为了进一步确定病因,利用Primer 5.0和olig0 6.0分别设计扩增PEDV M基因和TGEVN基因的引物,进行RT-PCR扩增、电泳检测和序列测定,结果表明,该猪场发病猪为猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎混合感染.     

规模化猪场常见猪繁殖障碍病毒性疫病混合感染及其防制研究

通过综述近年来规模化猪场存在的猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病毒病(PR)、猪圆环病毒病(PC)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪细小病毒感染(PPVI)、猪乙型脑炎(JE)等常见繁殖障碍病毒性疫病混合感染情况的研究状况,同时对规模化猪场猪繁殖障碍性病毒病混合感染的主要原因进行了分析,并提出了规模化猪场猪繁殖障碍性病毒病混合感染现象的防制措施,以期为规模化猪场的健康养殖提供参考。     

乙型脑炎核酸疫苗的研究进展

乙型脑炎是一种严重威胁人畜健康的急性中枢神经系统传染病,也是重要的人畜共患的虫媒病毒病,被国际兽医局(OIE)列为B类传染病。该病对猪的致死率不高,但能引起怀孕母猪发生流产、死胎、木乃伊胎,公猪发生睾丸炎,育肥猪引起持续高热,仔猪常呈脑炎症状,直接影响猪群数量的扩大,对养猪业造成严重危害,也影响人类的健康。目前本病尚无特效疗法,主要依靠疫苗预防,世界卫生组织已把研究和开发防治乙型脑炎疫苗列为优先研究和开发的项目之一。本文主要对乙型脑炎病毒核酸疫苗目前的研究现状进行了综述,为乙型脑炎核酸疫苗的深入研究提供参考。