用单克隆抗体展示猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白在茵体表面的形态和分布

用猪链球菌2型江苏分离株HA9801全苗免疫BMb／c小鼠，取其脾细胞和Sp2／0细胞融合，以电泳纯溶菌酶释放蛋白(MRP)为抗原，间接ELISA筛选MRP抗体阳性孔并用有限稀释法单克隆化，剔除与胞壁杂蛋白交叉反应阳性的克隆，获得3株特异针对MRP的单克隆抗津细胞株3A3、4D5和6B4。将HA9801和HEp-2细胞共孵育，使细菌粘附于细胞表面，用3株MRP单克隆抗体联合介导FITC标记HA9801菌体表面的MRP，激光共聚焦显微观察，代表MRP的荧光图像显示，MRP是一线形表面大分子，一端锚定在细胞壁，另一端向空中伸展，其分布状态有单在和丛集2种。     

HoCP系列美国甘蔗种质资源育种价值评价

为了解美国引进的HoCP系列甘蔗种质资源的育种价值,本研究以HoCP00-1142、HoCP01-517、HoCP01-564、HoCP02-610、HoCP02-623、HoCP03-704、HoCP03-708、HoCP03-716、HoCP05-902、HoCP07-613、HoCP07-617和HoCP92-648等12个HoCP品系为核心亲本配置了73个杂交组合,采用家系评价方法,对12个HoCP系列亲本及其73个组合F1群体的株高、茎径、有效茎数、蔗糖分和蔗茎产量等5个主要性状的配合力效应值、经济育种值等参数进行估算。结果表明,5个性状中除了株高在母本间无差异,其他性状在母本、父本及组合间均存在显著差异。作为母本,11个亲本当中HoCP03-704的株高,HoCP02-623的茎径,HoCP02-610的有效茎数,HoCP07-617的蔗糖分及HoCP92-648的蔗茎产量一般配合力最高;而作为父本HoCP03-704的株高,HoCP02-623的茎径,HoCP07-617的有效茎数,HoCP03-708的蔗糖分及HoCP02-623的蔗茎产量的一般配合力最高。从经济育种值...     

猪链球菌2型MRP与FBPS部分片段串联基因的原核表达

根据猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)的基因序列,选取可能含有抗原决定簇的两片段,各设计合成一对引物,使之含有共同的酶切位点。通过T4DNA连接酶串联两片段,构建原核表达载体pET32a-mrp-fbps,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度,不同浓度IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳,表达约为80kD的融合蛋白。Westernblot结果表明重组蛋白可被SS2阳性血清所识别。证实串联表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,是重要的保护性抗原,本试验为进一步研究猪链球菌亚单位疫苗奠定了基础。     

施肥水平对甘蔗/大豆间作体系中植株 生长及养分积累的影响

采用盆栽方法研究了不同施肥水平下间作对甘蔗和大豆生长的影响以及间作优势。结果显示：间作大豆的各项植株指标与单作大豆差异不显著,不施肥可以刺激单作和间作大豆根系的生长,增加大豆根瘤数和根瘤重,而间作甘蔗各项指标大多数显著低于单作甘蔗,在不施肥的情况下下降幅度加大,但总根长两者间差异不显著;间作甘蔗的氮、磷、钾积累量均小于单作的甘蔗,以钾的降低幅度最大,而间作大豆仅在不施肥的情况下磷、钾的积累量显著低于单作大豆,氮素在四种处理间差异不显著;两种施肥水平下间作的土地当量比（LER）均大于1,说明间作有明显的优势,并且间作的氮、磷、钾总养分累积量高于单作,由此可见甘蔗与大豆间作优势不是表现在个体上,而是表现在提高土地利用率上。     

藏药甘青虎耳草总黄酮对小鼠抗炎作用的研究

目的:观察甘青虎耳草总黄酮的抗炎作用并对其机制进行初步研究。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、棉球致小鼠肉芽肿模型,观察甘青虎耳草总黄酮对小鼠的抗炎作用。结果:甘青虎耳草总黄酮能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀,甘青虎耳草总黄酮低剂量组、中剂量组和高剂量组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制率分别为21.76%,65.29%和75.295%;明显抑制冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增强,并且能有效抑制小鼠肉芽肿的作用。结论:甘青虎耳草总黄酮具有明显的抗炎作用。     

奶牛肺外结核病的综合诊断与病原分离鉴定

为揭示牛型提纯结核菌素(PPD)检测阳性牛与剖检肺脏病变不吻合的真实原因,综合运用皮内变态反应(SIT)、比较变态反应(SICCT)、IFN-γ试验,以及牛型PPD点眼反应、ELISA抗体检测等5种免疫学方法,对我国西部5个奶牛场进行牛结核病综合诊断,然后对锁定的后期感染牛进行扑杀、剖检,采集病料进行病理学和病原学诊断。结果显示:用5种方法综合检测确诊的95头后期感染牛中,有84头(88.42%)剖检可见明显结核病变,其中12头(14.29%)的病变发生在肺和肺门淋巴结,72头(85.71%)的病变发生在肝、脾、肠系膜淋巴结等肺外组织器官;95头后期感染牛中,有54头病料培养阳性;阳性菌经Xpert MTB/RIF和Enigma鉴定,均为牛分枝杆菌。该研究结果表明:我国牛结核病存在肺结核和肺外结核两种,因而增加了牛结核病的诊治难度;牛结核病确诊仅靠单一检测方法十分困难,需运用多种免疫学方法进行综合诊断;该结果可以解释目前出现的检测阳性与肺部剖检病变结果不一致的困惑。     

益生菌在肉鸡养殖中的研究进展

益生菌是一类定植于畜禽肠道和生殖系统内,通过改善宿主微生态平衡,发挥对宿主有益生态活性的微生物。该文通过综述益生菌的种类、制剂类型以及对在肉鸡上的应用,为畜牧养殖和动物保健提供新的发展方向。     

C型口蹄疫病毒VPI基因的克隆及真核表达载体的构建

应用PT-PCR扩增C型口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因,将其克隆到pMD18-T载体中,并对克隆载体和VP1基因进行序列分析。将VP1基因和选择标记基因——二氢叶酸还原酶（dhfr）基因插入真核表达载体pCI-neo中,对所构建的重组真核表达载体进行PCR扩增、酶切鉴定和序列分析。结果表明,VP1基因与GenBank中标准毒株（登录号EU553893）VP1的序列同源性为92.8%,VP1基因的真核表达载体pCI-VP1-D构建成功。     

布鲁氏菌MLVA-15分型方法的建立

为提高对我国布鲁氏菌流行菌株的鉴别分型能力,利用布鲁氏菌可变数目串联重复序列(VNTR)的多态性,建立了新的布鲁氏菌分型方法——MLVA-15。与传统的布鲁氏菌MLVA-16和BruMLSA21分型方法相比,新的MLVA-15分型方法对我国羊种布鲁氏菌流行菌株的区分能力有着显著的提高,能够满足布病流行病学调查中对病原追溯的需求。尝试利用不同VNTR位点组合来提高对布鲁氏菌的鉴别能力,为单一种型布鲁氏菌流行区域的布病病原学调查提供了新思路。     

鸡传染性支气管炎弱毒苗的毒力返强检测

将鸡传染性支气管炎疫苗毒接种10日龄鸡胚,并传至12代,观察鸡胚病变,于72 h收集尿囊液进行负染电镜观察和血凝试验.透射电镜观察到典型的冠状病毒颗粒,致鸡胚的典型病变作用和血凝活性随培养代次的增加显著增强.结果表明,该弱毒苗病毒毒力返强,存在安全隐患.