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[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础。[方法]依据GenBank上斑马鱼(AJ852023.1)和鲫鱼(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物; 采用100μg/ml PolyI:C体外分别处理草鱼肾细胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中 PKR 基因。[结果]处理12h时未扩增出PKR基因,处理36和48h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00%和81.48%。[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,PolyI:C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路。 相似文献
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试验旨在研究香菇多糖和甘油的不同浓度组合对湖羊精液冷冻保存效果的影响。将香菇多糖以0(L0)、0.5(L0.5)、1(L1)、4(L4)mg/mL与3%甘油(G3)、5%甘油(G5)分别进行组合,成为L0G3、L0.5G3、L1G3、L4G3、L0G5、L0.5G5、L1G5和L4G5。将这些组合分别添加到基础冷冻稀释液中,并加入精液冷冻保存,在解冻后检测精子活力、顶体完整率、总抗氧化能力(T-AOC),测定总谷胱甘肽(T-GSH)含量和丙二醛(MDA)含量。结果显示:基础冷冻稀释液中添加0.5 mg/mL香菇多糖,可显著提高了湖羊精子冷冻-解冻后精子活力(P<0.01)、顶体完整率(P<0.05)、T-GSH含量(P<0.01)和T-AOC(P<0.01),有效抑制MDA的生成(P<0.01),且L0.5G5组比L0.5G3组保存效果更好(P<0.01);而添加高浓度香菇多糖不利于湖羊精液冷冻保存。本试验中香菇多糖和甘油在提高湖羊精液冷冻保存效果方面不存在协同作用。这些结果表明,在稀释液中添加0.5 mg/mL香菇多糖和5%甘油可有效提高湖羊精液的... 相似文献
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一种改进的兔动脉采血方法 总被引:1,自引:0,他引:1
家兔是一种常用的实验动物,其体积小、繁殖快、便于饲养,是畜牧兽医学、医学等科学研究领域中所不可或缺的。多数实验中是要采其血液,来制备血清、血浆、血细胞等,故血液质量的好坏直接影响实验的准确性,而采血方法与技术又直接影响到血液的数量和质量。通常给家兔采血的方法有:耳缘静脉采血、心脏采血和耳动脉采血三种。耳缘静脉采血易于操作,对兔损伤较小,但耳缘静脉采血,采血量少,血管滑动不易固定,在寒冬或家兔处于安静状态时,血液回流缓慢,每次采血需要较长时间。心脏采血速度比较快,血流量较大,但经常采血对家兔心脏损伤较大,难以迅速… 相似文献
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采用转录组高通量测序方法,比较分析幼龄翘嘴红鲌精巢、卵巢组织中小RNA转录谱。结果显示,精巢、卵巢的小RNA分布的峰值分别为28、29 nt,与一般物种的22~24 nt有较大的差异;在小RNA库中,经比对注释的比例很低,分别为2.5%、2.1%。在比对注释的斑马鱼miRBase、斑马鱼ncRNA、piRNA、Rfam数据库中,精巢组织中被miRBase数据库注释的比例最高,为1.49%;而卵巢组织中被miRBase和piRNA数据库注释的比例接近,分别为0.94%和0.96%。比较表达量相对较高的共有miRNA分子,均是与胚胎发育相关的分子,且大多是精巢组织的表达量高于卵巢组织,这些miRNA分子在个体发育中可能具有重要意义。初步获得了翘嘴红鲌不同性腺组织的转录谱,为今后进一步分析小RNA在生殖发育中的调控作用奠定了基础。 相似文献