家蚕微粒子孢子对昆虫细胞的高效感染方法

家蚕微粒子孢子对昆虫细胞的高效感染方法曹广力，张志芳，季平，吴祥甫（苏州蚕桑专科学校）（中国农业科学院蚕业研究所）（中国科学院上海生物化学研究所）家蚕微粒子孢子的外壳主要由几丁质等组成，不经过特殊处理对培养细胞不具感染性。作者前报［１］在极为温和的条...     

桑树乳汁对14种细菌生长的影响

<正>在桑科植物中能入药的有构树、山荔子、柘树、无花果、榕树、薜荔、桑,其中能产乳汁的有构树、无花果、榕树、桑。对无花果乳汁的研究较成熟,无花果乳汁主要有抗菌和抑制肿瘤的作用。在桑的药用中,对桑叶、桑枝、桑白皮和桑椹也均有记载。如桑皮中白汁能治小儿口疮白漫,对蛇、蜈蚣、蜘蛛毒份有一定疗效。但未见有桑乳汁抑菌试验报导。本文用桑乳汁对部分细菌进行抑制试验,以作初步探索。     

白消安对性成熟公鸡睾丸发育的影响

将96只165日龄健康公鸡随机分为3组,分别行腹腔内单次注射法注射白消安0、50、60 mg/kg鸡重,分别在白消安处理后5、10、15、20、25、30 d研究其对鸡睾丸形态和曲细精管组织学方面的影响.结果表明,白消安(50 mg/kg、60 mg/kg)可显著降低鸡的睾丸质量并严重损伤鸡睾丸曲细精管和生精细胞,是制备精原干细胞移植受体的合适剂量.     

桑园土壤脲酶活性分析

针对施肥一致的桑园土壤,用比色法测定14个土样脲酶活性及土中氨浓度,并检测了土中微生物含量.结果表明,脲酶活性属中等偏低,样间脲酶活性差异较小,脲酶活性高低与细菌总量存在一定联系.     

基于DNA载体的RNAi抑制家蚕核型多角体病毒复制

基于DNA载体的RNA i技术可以较长时间高效地抑制基因的活性。利用家蚕核型多角体病毒ie-1基因启动子,构建了在细胞内能转录形成与ie-1基因+19~+446区域互补同源的发夹状dsRNA的RNA i DNA载体。研究结果表明,该载体DNA在体外、体内均能较好地抑制家蚕核型多角体病毒在细胞中的复制。     

家蚕SOCS-2基因的克隆与序列分析

SOCS基因是JAK/STAT信号通路的负调节基因.为了了解家蚕SOCS基因(BmSOCS)的遗传变异与进化,通过电子克隆获得了SOCS cDNA基因序列,结果显示家蚕基因组中至少存在4种BmSOCS基因,BmSOCS -2基因存在可变剪接.通过RT - PCR从家蚕中扩增得到1个BmSOCS -2基因(BmSOCS - 2A),测序结果表明,该792 bp片段含有完整的ORF,由4个外显子组成,编码263个氨基酸残基,分子量为28.8 ku.结构分析显示,BmSOCS - 2A有5个α螺旋结构,存在典型的SH2结构域和SOCS结构域.基因芯片数据分析显示,BmSOCS -2在家蚕雌雄性腺组织中表达量最高.进化分析表明,SOCS以不同种类聚类在一起,表明各种SOCS基因家族在各昆虫物种形成前就已产生.     

家蚕类mariner转座子相关序列分析

通过PCR克隆,从家蚕基因组中获得大小为975bp的DNA片段(登录号:EU352872),Blast搜寻结果显示,该片段DNA序列的52-449nt区域与野蚕mariner-like元件DNA(登录号:AB237562)的同源性达90%,推测为家蚕类mariner转座子相关序列,在乙酰胆碱酯酶基因的第5内含子、微卫星S1104-R序列、BmBRC-NZ3 mRNA终止码的下游序列、ErB·1基因的内含子均检测到家蚕类mariner元件相关序列的同源区,暗示家蚕类mariner元件在家蚕基因组中发生了多次转座,并在家蚕基因组的不同区域随着进化发生了歧化。     

罗氏沼虾白斑综合症病毒WSSV ORF147片段的克隆、表达与序列分析

白斑综合症病毒WSSV(White Spot Syndrome Virus),是严重危害虾类养殖业的主要病原之一.本实验根据已知南美白对虾WSSV ORF147序列设计1对特异性引物,从患疑似白斑病毒病的罗氏沼虾中提取总DNA,用PCR法扩增得到1特异性片段.将该片段克隆进pET-28a( )载体,测序表明该片段全长1 475 bp,最大开放式阅读框为1 380 bp,编码459个氨基酸,预计其相对分子质量为51.9 kDa;与GenBank登录的WSSV ORF147序列(登录号AF369029)进行比对,核苷酸同源性为99%,证实为WSSV ORF147片段.将该片段在大肠杆菌E coli中进行表达,能获得相应的特异多肽条带.根据测序结果推导WSSV ORF147多肽在N端有信号肽序列,并且在氨基酸序列的122～144区间形成跨膜螺旋区.     

以 WWSV ORF234片段诊断罗氏沼虾白斑病毒病及片段分析

根据GenBank中登录的对虾白斑综合症病毒(WSSV )全基因组序列中和ORF234相应的序列来设计1对引物, 从疑似病例的罗氏沼虾中提取总DNA, 并以此为模板, 经PCR扩增出约885 bp的特异性片段, 克隆进质粒载体pET- 28a( + ), 进行序列测定和分析。结果显示: 扩增序列共编码294个氨基酸, 预测的相对分子质量为34kDa, 与G enBank中登录序列的对应区域同源性达99%, 由此确认该罗氏沼虾患有白斑综合病毒病。该序列所编码的蛋白在22~ 96氨基酸位置有一段球状结构, 在142~ 272 氨基酸位置有一个与DUF1335 蛋白同源的将近130个氨基酸残基的保守区, 其功能未知。同时还对克隆出的片段进行序列分析和蛋白预测, 以进一步深入开展蛋白的功能及对该病毒病的防治的研究。     

乙醇固定中华绒螯蟹组织的DNA提取方法

由于ＲＡＰＤ技术简单、灵敏度高、设备要求不高、工作成本低和研究周期短等优点,已经在生物、医学领域被广泛地使用。张德春等[1]曾提出可用于ＲＡＰＤ分析的鱼类血样乙醇保存方法。考虑到乙醇固定标本应用范围广,且乙醇对ＤＮＡ的保护作用明显、时间长等优点,笔者直接采用75%的乙醇固定中华绒螯蟹(Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒｓｉｎｅｎｓｉｓ,河蟹)肌肉组织,初步研究了如何经乙醇固定的河蟹肌肉组织中提取ＤＮＡ的方法,作为进一步在分子水平研究河蟹基因的基本参考。以往未见有关这方面的研究报道。收稿日期:20000425基金项目:江苏省教委资助项目…