Marc-145细胞CD163基因克隆及其真核表达质粒构建

猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一.从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过Hind Ⅲ和Xho Ⅰ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定.结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达.这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据.     

FMD、CSF、PRRS3种疫苗不同组合对定安黑猪的免疫效果评价

为探索科学免疫接种方法,确定合理有效的免疫程序,以减少生猪的疫苗接种次数及应激反应,笔者设计了相关试验,以验证多重免疫同时进行的可行性。结果表明：采用猪口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病三种疫苗同时分点注苗组的效果到达了预期目标,可以推广应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒XH株感染性克隆的构建

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,本实验采用RT-PCR方法将PRRSV-XH株的基因组序列分为6个片段进行扩增,连接至低拷贝载体pOKQ中,获得全长cDNA克隆。将该克隆体外转录,经脂质体转染Marc-145细胞,观察细胞病变。经RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等试验验证,表明构建了具有感染性的PRRSV-XH株全长cDNA克隆。本实验为在分子水平上研究PRRSV的复制、致病机理和基因产物的功能等方面提供技术支持,并为构建新型病毒载体和开发安全有效的活病毒疫苗奠定基础。     

PRRSV 的病毒蛋白研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的病毒性疾病,给世界养猪业造成了极大的威胁.从猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、非结构蛋白和结构蛋白3个方面对PRRSV的病毒蛋白研究进展进行综述.     

不同免疫程序对仔猪接种猪传染性胸膜肺炎疫苗免疫效果的影响

为规模猪场制定科学合理的猪传染性胸膜肺炎免疫程序提供依据,试验研究了不同免疫程序对仔猪接种猪传染性胸膜肺炎疫苗免疫效果的影响。结果显示,仔猪经不同免疫程序接种猪传染性胸膜肺炎疫苗后,其免疫效果和增重存在差异。其中,30日龄首免、60日龄二免(G组)的猪传染性胸膜肺炎免疫程序的免疫效果最好,整个试验阶段未发现传染性胸膜肺炎感染猪,且该组猪的增重情况也较好,为112.15 kg;其次是35日龄首免、65日龄二免(A组),38日龄首免、68日龄二免(B组),35日龄首免、75日龄二免(D组),35日龄首免、70日龄二免(E组),35日龄首免、60日龄二免(F组);而42日龄首免、72日龄二免(C组)的免疫效果最差。     

猪瘟免疫失败的原因及防制

一、免疫失败的原因 (一)机体状况 1.母源抗体存在干扰:如果母猪在配种前或分娩前进行了免疫, 可将母源抗体通过初乳传给仔猪, 母源抗体对初生仔猪有保护作用, 但也会影响仔猪的免疫效果:即母源抗体的双重性.在给仔猪使用高质量的疫苗时,能否起到良好的免疫效果与母源抗体的效价有关.当母源抗体效价高时,     

ELISPOT的技术优势及其在动物免疫研究中的潜力

介绍了酶联免疫斑点技术(ELISPOT),比较了该技术与其他免疫检测技术相比的优势,展望了ELISPOT在动物免疫研究中的应用前景。     

一株猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定

为了对从湖南某发病猪场送检的血清中分离到的1株蓝耳病病毒进行鉴定,试验通过接种Marc-145细胞传代后产生明显而稳定的细胞病变,又经过RT-PCR及间接免疫荧光(IFA)检测成功验证;通过对分离株的ORF5基因的测序结果表明,ORF5核苷酸序列与欧洲型代表株LV株及北美经典毒株VR-2332、国内经典美洲株CH-1a的相似性分别为64.5%、87.4%、93.0%,说明其属于美洲型;而将NSP2高变区的测序结果与JXA1等高致病性变异株的Nsp2比较后发现,都在同一位置不连续缺失30个氨基酸。说明成功分离到1株北美型变异株,最终将其命名为PRRSV CZ-HN株。     

Marc-145细胞CD163基因克隆及其真核表达质粒构建

猪繁殖与呼吸综合征是危害养猪业重要传染病之一,CD163是猪繁殖与呼吸综合征感染易感细胞受体之一。从Marc-145细胞克隆出CD163基因并测序,再根据得到序列,应用Primer5.0软件设计引物,成功地扩增出带酶切位点CD163 ORF基因,通过HindⅢ和XhoⅠ双酶切位点将CD163基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1-myc-His中,获得重组质粒pcDNA3.1-CD163,并将重组质粒pcDNA3.1-CD163在BHK细胞上进行表达鉴定。结果表明,Marc-145细胞CD163蛋白在BHK细胞中得到了表达。这为进一步研究CD163受体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中作用以及与其他受体之间相互作用提供试验数据。     

鸡免疫抑制性疾病的免疫抑制机理研究

病毒感染机体后可直接或间接损害免疫系统的细胞,引起鸡群免疫应答功能不全,导致免疫抑制,使机体免疫力低下,造成疫苗免疫失败,并增加继发感染的发病率.本文针对鸡的几种主要病毒性免疫抑制性疾病的作用机理进行综述,但在临床实践中,多以二重感染或多重感染存在,还可以继发其他感染,如何预防和控制此类疾病还有待于进一步研究.