禽流感病毒N1和N2亚型神经氨酸酶RT-PCR鉴别方法的建立

针对家禽中流行较为广泛、危害相对大的禽流感病毒(AIV)N1、N2亚型神经氨酸酶基因设计了2对引物，建立了一种RT—PCR鉴别方法，其目的片段大小分别为358bp、377bp。经对A／goose／Guangdong／1／96(H5N1)、A／Turkey／England／N28／73(H5N2)、A／African starling／983／79(H7N1)和A／Turkey／Wiscosin／1／66(H9N2)病毒株的鸡胚尿囊液样品进行扩增，扩增片段的大小与预期大小完全相符。经对国内不同地区分离的16株AIV N1亚型和21株AIV N2亚型用RT-PCR方法检测，阳性检出率分别为87．5％(14／16)和95．2%(20／21)；对50份样品进行盲检，准确率为98％(49／50)。     

两株鹅源H6N2亚型禽流感广东分离株的全序列分析及致病性研究

为了解禽流感病毒(AIV)的变异情况,本研究对我国禽流感监测期间分离鉴定的两株鹅源AIVA/Goose/Guangdong/362/2009(H6N2)(GD/362/09)与A/Goose/Guangdong/244/2010(H6N2)(GD/244/10)进行全基因序列的测定和分析,并进行其对SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性试验。序列分析显示:HA裂解位点的序列为339PQIETR↓GLFG348,表明两株病毒均为低致病力AIV。HA和NA的核苷酸同源性分别为84.5%和98.9%,另外,序列分析结果显示,GD/244/10的PA、M基因分别与高致病性AIV(HPAIV)A/aquatic bird/Korea/w74/2005(H5N2)和A/duck/Hong Kong/140/1998(H5N1)的同源性最高,表明其内部基因来源复杂,可能与H5 HPAIV发生重组或有共同的来源。病毒对动物的致病性试验结果显示:两株病毒均不能在鸡体内有效复制,在小鼠的肺脏能够有效复制,但在小鼠的鼻甲内只能检测到GD/244/10。     

一株H10N7亚型禽流感病毒的分离鉴定及生物学特性研究

2013年,从秦皇岛野鸟林鹬体内分离到一株H10N7亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/Wood Sandpiper/Qinhuangdao/660-662/2013(H10N7)[简称WSP/QHD/660-662/2013(H10N7)]。本研究对该分离株的全基因序列进行测定,并对其进行致病性研究。基因组序列分析表明:该病毒的HA蛋白裂解位点为334PELMQGRGL343,属于低致病性AIV的分子特征,其HA基因与A/Duck/Hunan/S11205/2012(H10N3)的相似性达到97.90%,NA基因与A/Domestic Duck/Republic of Georgia/1/2010(H10N7)的相似性达到97.46%,内部基因与H9N2等多亚型AIV的相应基因节段具有较高的相似性,推测该分离株可能为一株多亚型流感病毒的重组株。对动物致病性试验结果显示:该病毒可以感染哺乳动物模型BALB/c小鼠,并且仅能够在鼠的肺脏和鼻甲骨粘膜上皮细胞中复制,表明该病毒分离株对小鼠也呈现低致病性。     

禽流感疫苗的选择及正确使用方法

首先是必须选择国家农业部批准的定点企业生产的合法疫苗，不仅企业要是合法的企业，其产品也必须是合法产品。比如说某个企业被允许生产H5N2亚型禽流感单苗，那么这个企业生产的其他禽流感单苗或联苗都是非法的。若使用了非法疫苗，不仅在免疫效果上得不到保证，而且还可能会出现疫苗的安全问题，更有甚者可能由于注射疫苗本身就会造成鸡群发病甚至死亡。其次是明确要预防的禽流感亚型。     

微生态制剂在养猪业中的应用

微生态制剂是在微生态理论指导下发展起来的一种新型活菌制剂。在饲料中添加适量的微生态制剂，可提高仔猪成活率，防止仔猪腹泻，加快猪的生长速度，改善饲料利用率，同时还可防治疾病。     

禽流感致病的分子基础及强弱毒鉴别诊断

高致病力禽流感(HPAI)被国际兽疫局列为Ⅰ类烈性传染病.我国农业部也将该病列为一类烈性传染病.高致病性禽流感一旦暴发会给养禽业带来毁灭性的危害,1983年美国禽流感和1995年墨西哥禽流感造成相当于现今10多亿美元的经济损失.     

高致病性禽流感免疫预防风险因素的确定及层次分析模型的建立

2003年底和2004年初，亚洲一些国家和地区暴发高致病性禽流感，各个国家和地区采取了不同的防控措施。在实践的工作中，国内外禽病工作者越来越认识到，单靠扑杀控制禽流感所付出的代价太昂贵，特别是发展中国家更缺乏这种经济实力。墨西哥、意大利将扑杀和免疫预防措施相结合的预防策略已经取得国际上的认可，因此，多种预防禽流感的疫苗在国内外市场上如雨后春笋。     

禽流感高免球蛋白的制备及应用研究

应用H9N2亚型禽流感病毒(AIV)油乳剂灭活苗6个不同剂量免疫30周龄SPF蛋鸡,通过血凝抑制(HI)和琼脂免疫扩散(AGP)试验监测血清及卵黄抗体消长规律,确定2.0 mL为最适免疫剂量。首免后第18天血清与卵黄中抗体同时升至第一高峰,此时加强免疫。二免后1周,效价达到第二高峰,用常规抽提法从高抗体滴度卵黄中提取高免球蛋白(IgY)。中和试验(NT)表明:IgY具有中和病毒感染的作用,且中和抗体滴度随HI滴度的降低而降低;给鸡肌肉注射后6 h能检测出血清的HI抗体,24 h达到峰值,维持7 d,第13天血清中HI抗体消失。104个EID50的AIV(H9N2)攻毒,同时用HI价为214的IgY的10倍系列稀释物分5组进行保护试验,确定HI价为214的IgY保护范围在100倍稀释与10倍稀释之间。IgY系列保护试验表明HI价28为完全保护的最低滴度;在攻毒的前1天及至攻毒后第5天接种IgY均能100%保护。攻毒保存期试验证明,所制得的高免球蛋白4 ℃可以保存6个月,-20 ℃可保存1年。     

2017年西藏拉萨市家禽禽流感抗体水平检测

为了解西藏拉萨市家禽禽流感抗体水平,2017年8月随机选择免疫过H5禽流感疫苗的8个规模养殖场、2个散养户、3个活禽交易市场,共13个群体,采集1 041份家禽血清样品进行H5、H7、H9亚型禽流感HI抗体检测。结果显示：H5亚型禽流感免疫抗体合格率为45.73%,H7、H9亚型抗体阳性率分别为21.13%、52.64%;养殖场、散养户和活禽交易市场的不同亚型抗体水平存在较大差异,规模化养殖场的H7亚型抗体阳性率最高（29.92%）,活禽市场的H5、H9亚型阳性率最高（78.16%、79.31%）,散养户的所有亚型抗体阳性率均最低。结果表明,拉萨市H5亚型禽流感疫苗免疫效果较差,特别是散养户,疫病发生风险较高,H7、H9亚型疑似自然感染率较高,应进一步查明原因,及时采取相应的措施,防止疫情发生。     

禽流感农业科技成果转化资金项目成效显著

“禽流感灭活疫苗产业化前期关键技术研究及中试”项目是2001年农业科技成果转化资金资助的第一批项目之一，该项目于2004年4月3日顺利通过验收。经过2年多的实施，该项目核心技术和生产条件均已成熟，项目熟化的产品对我国预防和控制禽流感发挥了巨大的作用。