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2000年 7月份,江苏某个体鹧鸪养殖场,鹧鸪发病突然,发病鹧鸪排白色水样稀粪,肛门周围羽毛被粪便沾污,食欲停止,羽毛蓬松,翅膀下垂,头垂地,闭眼呈嗜睡状态,病程 3~ 7天,严重者衰竭死亡。发病病程较快,发病率很高,雏鹧鸪死亡率约为 10%。根据流行病学特点、临床症状、剖检病变、实验室检查等综合分析,诊断为鹧鸪传染性法氏囊病。 1临诊症状 为肉用鹧鸪群, 800只, 40日龄,未进行免疫接种;饲养密度为 45只 /m2,圈舍通气不良,有害气体 (如氨气等 )严重。发病突然,发病率高达 100%,至来本教研室诊断时,已死亡 85… 相似文献
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将充分菌毛化的大肠杆菌(C1976-79(pap )经4‰甲醛灭活作为免疫原免疫BALB/c小鼠,经淋巴细胞杂交瘤技术,用间接ELISA筛选获得FA1、FB11两株抗FB11菌毛单抗,其FLISA效价分别为18log2和15log2试管凝集价分别为8log2和6log2。免疫印迹实验表明:两株单抗均能与鸡大肠杆菌F11菌毛反应,识别分子量为18kD左右的菌毛蛋白。同时对猪病原性大肠杆菌进行检测,结果均无交叉反应。这表明F11菌毛是不同于K88、K99、987P、F41及F18等粘附素的一种大肠杆菌菌毛。 相似文献
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猪水肿病毒素A亚单位基因的克隆及表达的尝试 总被引:1,自引:0,他引:1
以聚合酶链式反应(PCR)技术从大肠杆菌TB1中扩增出猪水肿病毒素(SLT-IIe)的A亚单位基因的960bp。将此PCR扩增产物(slt-IIeA)在EcoRI和BamHI位点间克隆进质粒pUC18中,获得了重组质粒p18slt-IIeA,经MicroGenic computer program分析证明在其整个序列中含有与已发表的slt-IIe序列相同的序列,说明质粒p18slt-IIeA是含有 相似文献
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大肠杆菌F1菌毛表达条件的初探 总被引:1,自引:1,他引:0
F1菌毛在体外表达受到许多因素的影响。为了对F1菌毛的进一步研究,本试验以只产F1菌毛的菌株C600为对象,从培养基、温度、pH、通氧等条件进行了摸索,实验结果表明:培养条件的限制极为显著,在MD-1肉汤(pH6.8~7.2)中、37℃、静止培养48h可使F1菌毛获得较好表达;通入氧气将有利于F1菌毛的表达。 相似文献
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猪水肿病毒素B亚单位的表面表达 总被引:1,自引:0,他引:1
用聚合酶链式反应(PCR)技术,从大肠杆菌PPSLT-ⅡeB中扩增出猪水肿病素(SLT-Ⅱe)的B亚单位基因(slt-ⅡeB)的204bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架是质粒表达载体PZSPAX,并转化到大肠杆菌HB101中,筛选到含有slt-ⅡeB的重组质粒PZBSPAX。将重组质粒PZBSPAX进行序列分析,结果表明:重组质业PZBSAX中的插入民发表的slt-ⅡeB是一致的,证明PZBSPAX就是含有slt-ⅡeB的重组表达质粒。含有重组质粒PZBSPAX的大肠杆菌HB101命名为重组大肠杆菌PZBSPAX。通过在不同温度条件下、不同培养时间情况下、不同IPTG诱导条件下,利用荧光抗体染色证明重组大肠PZBSPAX可表面表达预 融合蛋白PP-SLT-ⅡeB-SPAX;利用SDS-PAGE、Western-blot对重组大肠杆菌PZBSPAX的表达进行了分析,结果表明重组大肠杆菌PZBSPAX表达的融合PP-SLT-lleB-SPAX与预期大小一致,且具有SLT-lleB的抗原性。 相似文献
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根据GenBank中已经发表的鸭肠炎病毒(DEV)基因组序列,在抗原性分析的基础上,设计5对引物,以DEV标准强毒株DPV-F37基因组DNA作为模板分别扩增DEV gB基因主要抗原域编码区(328~552 nt、667~1 164 nt和1 519~1 797 nt)和gC基因主要抗原域编码区(67~402 nt和472~837 nt).将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P1中获得重组表达栽体pGEX-6P1-gB1、pGEX-6P1-gB2、pGEX-6P1-gB3、pGEX-6P1-gC1和pGEX-6P1-g02.将重组表达载体转化至BL21宿主菌,经IPTG诱导,外源基因获得了良好表达,融合蛋白大小分别为35、45、37、38和40ku左右.以兔抗DEV多抗血清进行Western blot分析,抗血清与表达的5种融合蛋白均能发生特异性反应.结果提示所有表达出的目的蛋白均具有与天然蛋白相似的反应原性. 相似文献
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为揭示临床健康肉羊的产气荚膜梭菌感染概况,于2018年4-6月选择江苏地区肉羊养殖场30个,采集3~5月龄肉羊肛拭子样品892份.所有样品接种至梭菌增菌液,于厌氧条件下增菌培养后,以PCR进行产气荚膜梭菌的检测,并对部分检测为产气荚膜梭菌阳性的样品进行细菌分离.结果表明:175份(19.62%)肛拭子样品为产气荚膜梭菌阳性,提示临床健康肉羊的消化道可携带产气荚膜梭菌.数据分析表明,3、4、5月龄羊差异不显著,免疫羊与未免疫羊差异不显著.通过对分离的68株产气荚膜梭菌进行α、β、ε和ι毒素基因检测,确定了其中43株(63.24%)为A型产气荚膜梭菌,25株(36.76%)为D型产气荚膜梭菌,提示A、D型是江苏地区肉羊感染的主要产气荚膜梭菌类型. 相似文献
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大肠埃希氏菌F18菌毛结构蛋白与黏附特性的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
利用已表达的F18ab和F18ac菌毛各结构亚单位的融合蛋白(GST-FedA/ab、GST-Fe-dA/ac、GST-FedE、(;STFed-F/ab、GST-FedF/ac)分组肌肉注射健康家兔,制备抗FedA/ab、Fe-dA/ac、FedE、FedF/ab、FedF/ac多价血清。结果表明,所制备的5种抗Fed多价血清均能凝集F18ab^+。大肠埃希氏菌107/86株和F18ac^+大肠埃希氏菌8813株。利用抗大肠埃希氏菌F18菌毛主要结构亚单位FedA特异抗体和次要结构亚单位FedE、FedF特异抗体,研究了F18菌毛与小肠上皮细胞的黏附特性。结果发现,FedA抗体和FedE抗体单独和合并均不能抑制F18^+菌与小肠上皮细胞的黏附,而单用抗FedF抗体即能明显抑制F18^+大肠埃希氏菌与小肠上皮细胞的黏附,表明FedA和FedE与F18菌毛的黏附不具相关性,而FedF才是F18菌毛的黏附性结构亚单位。 相似文献
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从某湖羊养殖场发病死亡的成年湖羊的肾脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,形态特征与生化试验结果基本符合肺炎克雷伯氏菌的特征。药物敏感性试验显示,该分离菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢哌酮、卡拉霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氧氟沙星高敏,而对氟苯尼考、青霉素、苯唑西林、红霉素、四环素、多西环素、万古霉素、复方新诺明等药物具有耐药性。以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,将所测序列与GenBank中的序列进行BLAST比对,结果其与肺炎克雷伯菌的同源性高达99.9%以上,进一步确定该分离菌株为肺炎克雷伯菌。 相似文献