猪卵母细胞体外成熟中添加PPi改变透明带泛素化水平及精卵结合能力

本研究主要目的是评价猪卵母细胞成熟培养中添加无机磷酸盐焦磷酸(PPi)对卵母细胞成熟、透明带泛素化水平及精卵结合能力的影响。试验设置对照组及0.1、1、5μg/m L 3个添加PPi处理组,检测卵母细胞成熟率、透明带泛素化水平及精卵结合情况。结果显示:1μg/m L PPi处理组卵母细胞成熟率为75.06%,显著高于对照组(P0.05);1μg/m L PPi处理组透明带泛素化水平显著高于其他各组(P0.05);1μg/m L PPi处理组透明带酶解时间为278.93 s,显著低于对照组(P0.05);1μg/m L PPi处理组精子黏附率为83.24,显著低于对照组(P0.05)。结论:PPi显著提高卵母细胞体外成熟率和透明带泛素化水平,降低透明带溶解时间和精子黏附率。     

红果肉海棠资源亲缘关系的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术,以部分苹果栽培种和苹果属野生种为参照,对23种红果肉海棠的亲缘关系进行了研究。在64对引物中筛选出4对进行选择性扩增,共得到94条有效谱带,其中多态谱带92条,多态谱带占97.9%。UPGMA聚类分析显示,30份供试材料的相似系数为0.63~0.95,在相似系数为0.65时,样品可划分为4组,A组中包括6种欧美海棠高原之火、路易莎、秀场、道格、钻石、红巴伦以及粉女士;B组中包括霍巴、丽丝、雷蒙、玛瑙、王族、粉芽、红丽、火焰、完美紫叶、印第安夏天等红果肉杂交种以及野生种新疆红肉苹果、花红和山荆子;C组包括印第安魔力、朱砂、三叶海棠、珠眉海棠、绚丽、凯尔斯、撒氏;D组包括新疆野苹果、富士苹果、嘎啦苹果。从分子水平揭示了它们之间的亲缘关系,为红果肉苹果杂交育种的亲本选配提供了理论依据。     

高效发挥乡镇动物卫生防疫监督职能的措施浅谈

总结了高效发挥乡镇动物卫生防疫监督职能的主要措施,即科学组织实施动物强制免疫、科学规范产地检疫管理、强化防疫监督管理等。旨在为加强乡镇动物卫生防疫监督工作提供参考。     

基于纳什均衡理论的生态补偿法律制度研究

在进行政府与接受补偿主体之间的纳什均衡博弈分析的基础上,运用纳什均衡理论,构建了生态补偿法律制度,以期通过博弈分析能够引导各方利益的最大化。     

人工生态湿地营建与植物群落建植施工方法

人工湿地是一种常见的水生态修复工艺,本工法在去污、自动布水、防渗和群落营建等方面进行强化,形成人工生态湿地营建与植物群落建植施工工法。详细介绍了该工法的适用范围、特点、工艺原理、工艺流程及操作要点,并进行了效益分析,以期为相关工程及人员提供参考。     

草甘膦对热带爪蟾胚胎发育的影响

[目的]探究草甘膦对热带爪蟾早期胚胎发育的影响及其敏感浓度。[方法]选择热带爪蟾(Xenopus tropicalis)作为模式生物,采用胚胎致畸试验(FETAX)测定草甘膦对热带爪蟾胚胎发育的致畸效应。[结果]草甘膦对爪蟾胚胎发育的半致畸浓度10~(-5)mol/L,胚胎发育后期则表现出不同类型的畸形,如小眼、围心腔水肿、腹方化、双尾、尾部弯曲等表型。当草甘膦浓度达到10~(-3) mol/L时,它对热带爪蟾胚胎有极显著的毒害作用,并伴有较高的致畸率和死亡率,其中特异性的表型为腹方化。[结论]草甘膦对热带爪蟾胚胎产生的毒性效应,严重影响胚胎发育正常进行;农业中草甘膦使用不当,随着生物富集效应,草甘膦对人类健康和生态环境有潜在危害。     

基于ITS条形码技术分析北京云蒙山杜鹃花属遗传多样性

为从分子生物学角度综合评价国内外杜鹃花属物种系统发育关系,采用北京云蒙山地区4个迎红杜鹃亚属的迎红杜鹃和1个杜鹃亚属的照白杜鹃为供试材料进行ITS序列测定,并与从Genbank数据库中得到杜鹃花属17种不同种源的ITS序列,对22种杜鹃花亚属供试材料ITS序列在选用K2模型,采用邻接法(neighbor-joining method)和最大似然法(maximum likelihood method)构建系统进化树,分析杜鹃花亚属中各种源的系统位置,将供试杜鹃花亚属分为2大类5小类。22种供试材料均按照所属亚属被分到了不同分支,分类结果与传统的形态学分类结果较为一致。通过ITS序列比对发现,杜鹃花属的22份供试材料序列的一致性为95.29%,说明杜鹃花属ITS序列具有较高的保守性。同时,杜鹃花属的22份供试材料ITS序列均有不同程度的变异,共有80个有效变异位点,这些变异位点可以作为杜鹃花属种源的DNA指纹特异识别位点。为探讨北京云蒙山杜鹃花属种源的分类地位提供分子证据,对系统分析云蒙山杜鹃花属野生杜鹃群落的遗传多样性以及特异种质的保护、利用和开发具有重要意义。     

3,4,5-三甲氧基苯甲醛标准样品的研制

研究了3,4,5-三甲氧基苯甲醛标准样品的制备、均匀性和稳定性及其定值试验。用3,4,5-三甲氧基苯甲醛工业品与亚硫酸氢钠溶液加成反应,经H2SO4酸化,结晶;再用乙醇溶解,纯水稀释重结晶,得到高纯度的3,4,5-三甲氧基苯甲醛标准样品。标准样品含量测定采用气相色谱面积归一化法,并通过了均匀性检验和稳定性检验(9个月)。经定值检测,3,4,5-三甲氧基苯甲醛标准样品的质量分数为99.42%±0.07%。     

稻鳖生态种养技术及效益分析

稻鳖生态种养是根据生态学原理与稻鳖共生、互利互惠的关系,通过稻田改造及运用相应的技术措施,使稻、鳖在同一稻田中共同生长发育,实现产品提质、效益增加、环境优化的一种新型综合生态种养技术。本文总结了稻鳖种养技术,包括基地规划、基地选择、稻田工程建设、水稻种植、鳖养殖等,并对效益进行了分析。     

家蚕整合素β2的表达、纯化及其免疫功能

【目的】 分析家蚕（Bombyx mori）整合素β2的序列和结构特征及其在家蚕感染病原菌后血细胞中的表达变化,检测其重组蛋白对不同病原相关模式分子识别和病原菌的凝聚作用,为进一步探究家蚕整合素β2的蛋白功能打下基础。【方法】 利用生物信息学对整合素β2的序列和结构特征进行分析,利用实时荧光定量PCR检测家蚕分别注射大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）后整合素β2在血细胞中的表达变化。通过PCR技术扩增获得整合素β2完整的胞外域片段,构建至pET22b原核表达载体后转化至E.coli Rosetta(DE3)表达菌株。经IPTG诱导获得重组蛋白,利用Ni-NTA亲和层析得到纯化的体外重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot对纯化获得的体外重组蛋白的纯度和质量进行检测。利用ELISA检测重组蛋白与两种不同病原相关分子模式LPS和PGN的结合情况,运用Western blot检测重组蛋白与不同病原微生物的结合情况,通过凝集试验检测重组蛋白对金黄色葡萄球菌的凝集能力,最后在个体水平探索重组蛋白在体内细菌清理中的作用。【结果】 家蚕整合素β2具有典型的β整合素亚基保守结构特征,即由一个较长的胞外域、一个单次跨膜结构域和一个较短的胞内域构成。家蚕整合素β2具有金属离子结合位点MIDAS、EGF结构域、半胱氨酸重复基序和NPxY等整合素典型的结构特征。实时荧光定量PCR检测结果表明家蚕在受到细菌感染后,整合素β2的表达发生显著变化。通过原核表达和蛋白纯化获得纯度较高的重组蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明纯化的重组蛋白纯度较高,可以用于后续试验。ELISA试验表明重组蛋白对LPS和PGN等病原相关分子模式具有较强的结合能力。细菌结合试验结果显示重组蛋白能够结合多种细菌,但与革兰氏阳性菌的结合能力要高于革兰氏阴性菌。细菌凝聚试验结果显示重组蛋白在Ca ²⁺的存在下对金黄色葡萄球菌具有较强的凝聚作用。细菌清除试验证实重组蛋白可以有效促进机体对外源入侵细菌的清理作用。【结果】 整合素β2具有典型的整合素β亚基的结构特征,可能具有识别病原相关分子模式,如LPS和PGN等的能力,通过与细菌的直接结合而实现对入侵病原微生物的凝聚作用,从而增强有机体的免疫能力,推测在家蚕免疫反应中发挥重要作用。