牛结核ELISA方法的改进和优化研究

在传统ELISA基础上，对ELISA板的稳定系统、血清稀释液的显色系统、ELISA底物等流程进行了改进，建立了牛结核ELISA方法。阻断试验和交叉反应结果表明该ELISA方法具有较好的特异性；不同人多次重复试验，证明本方法的重复性好。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较

对临床上采集的899份猪血清样本。用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的间接ELISA进行检测．运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律。并扣国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测。结果表明。2种方法的符合率为91．73％。利用TG—ROC软件确定了自制的ELISA酶标板（NP—ELISA）的临界值。并标定试剂盒的特异性扣敏感性均为92．6％。ELISA的结果判定标准是：当以血清样本L为标准参考阳性血清时，样品与阳性血清的比值（S／P）小于或等于0．4为阴性；S／P在0．4与0．5之间为可疑；S／P大于或等于0．5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后，初步判定所建立的ELISA之所以出现较多的假阴性。可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。     

我国首例非洲猪瘟的确诊

2018年8月1日,辽宁省报告沈阳市一养猪户饲养的猪陆续发生不明原因死亡,病死猪剖检发现脾脏异常肿大,疑似非洲猪瘟病毒感染。国家外来动物疫病研究中心采集病料进行了检测,确诊为非洲猪瘟病毒核酸阳性,序列分析发现,其B646L/p72基因序列417个碱基与俄罗斯毒株100%匹配,与俄罗斯和东欧目前流行的格鲁吉亚毒株(Georgia 2007)属于同一进化分支。这是我国发现的首例非洲猪瘟。疫情来源有待进一步调查。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断

20 0 2年 10月胶东某规模化猪场发生以妊娠母猪流产、产死胎 ,仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病 ,经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、 PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)。现将该场 PRRS的诊治情况报告如下。1　发病情况及临床症状该场为自繁自养猪场 ,来诊时共存栏大小猪 90 0余头。母猪 12 4头 ,处于妊娠期的有 5 2头 ,其中初产母猪 15头。中大肉猪 4 0 0多头。据畜主介绍 ,该场2 0 0 2年 9月初即有 6头母猪分别于预产期前 3～ 7天左右开始流产 ,在这之前 …     

猪支原体肺炎流行病学和诊断技术研究进展

论文概述了猪支原体肺炎的病原学特性、流行病学和诊断方法的研究进展,并对猪支原体肺炎临床检测、血清学检测、分子生物学检测等检测技术的优缺点进行比较.在猪支原体肺炎预防控制方面,对上述检测技术和诊断方法的应用进行了讨论和展望,旨在为研究该病提供理论参考.     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断

2002年10月胶东某规模化猪场发生以娃振母猪流产、产死胎．仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病，经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)。现将该场PRRS的诊治情况报告如下。     

牛病毒性腹泻/黏膜病的诊断流行病学调查及防控

<正>牛病毒性腹泻/黏膜病(BVD/MD)是由黄病毒科、瘟病毒属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)引起的主要侵害牛、羊、鹿、牦牛等反刍动物及猪的一种重要传染病。临床上以发热、腹泻、黏膜糜烂、肺炎、蹄叶炎、流产或产畸型胎儿为主要特征。病毒引起的急性疾病称为牛病毒性腹泻,引起的慢性持续性感染称为黏膜病。该病于1946年由Olafson[1]等在纽约首次发     

热应激蛋白70-肽疫苗与传染性疾病免疫

热应激蛋白（heat stress proteins，HSPs）是机体受到应激原的刺激后产生的几族（如HSP70家族、HSP90家族等）高度保守的蛋白质，对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。其中HSP70家族的HSP70是研究最多的，因为它在大多数生物中含量最多，在细胞应激后生成最显著。HSP70是机体一种重要的非特异性细胞保护蛋白，具有多种生物学功能，如分子伴侣，抗细胞凋亡，抗氧化作用，此外在免疫反应中也起重要作用。HSP70-肽疫苗是HSP70和抗原多肽结合形成的复合物，它可以直接从肿瘤组织或肿瘤细胞系中提取得到，即HSP70-肽肿瘤疫苗；也可以采用生物工程技术的方法在体外表达HSP70，再与已知的抗原多肽交联得到。其中HSP70-肽肿瘤疫苗是研究最多的，已成为肿瘤研究的一个重要内容，HSP70-肽肿瘤疫苗的可行性在实验动物已得到证实，显示了良好的应用前景。     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅳ.与IDEXX ELISA试剂盒及Western blot的比较

利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的ELISA方法并组装成试剂盒，将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western—blot进行了符合率试验。试验结果表明，所研制的试剂盒与Western blot的符合率达97．67％以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测，其中有37份不相符合，用Western blot对这37份血清进行验证，有35份血清检测结果与自制的试刺盒检测结果一致。由此表明，自行研制的试剂盒，其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。     

牛海绵状脑病几种免疫学检测方法的比较

本文对免疫组化、免疫转印（Western-blotting)和酶联免疫吸附试验（ELISA）3种牛海绵状脑病（RSE）免疫学检测方法进行了综合比较。通过比较发现免疫组化及免疫转印法与标准品真实情况的符合率均为100%，ELISA的符合率稍差。免疫组化法操作简单、结果容易判断、价格低廉，是较适合我国使用的检测方法，用该方法对我国部分样品进行检测，结果均为阴性。