生物芯片技术的特点及其在兽医科学中的应用研究进展

生物芯片技术是21世纪的前沿生物技术,该技术是继基因克隆、基因测序和PCR技术后的又一次革命性的技术突破,现已成为生物技术领域的研究热点之一,它的最突出特点是高通量、高集成、微型化、平行化、多样化和自动化。正是这些优点,使得生物芯片技术日益广泛应用于生命科学研究的众多领域。文章主要对生物芯片的特点和现状、技术环节及其在兽医科学研究中的应用作一综述。     

低血清培养PK-15细胞及其增殖猪圆环病毒2型的研究

依次采用含60、30、20、10mL/L血清浓度的低血清培养基驯化PK-15细胞,并给驯化好的细胞上接种猪圆环病毒2型(PCV-2),以确定PCV-2在该培养体系下的生长情况。结果用含60、30、20mL/L血清浓度的低血清培养基各进行3代次驯化,PK-15细胞能完全适应且生长状态良好;当血清浓度降至10mL/L时,传代1次细胞无法保持良好状态,细胞出现贴壁较差、生长停滞等现象。各血清浓度培养体系中细胞生长曲线测定结果显示,在细胞培养的0、24、48、72、96h各组细胞密度与常规培养的对照组差别不明显。因此用该低血清培养体系培养PK-15细胞时,血清最低添加量为20mL/L。用该体系培养的PK-15细胞接种PCV-2后,通过荧光抗体染色测定病毒滴度。结果显示,低血清培养的PCV-2病毒滴度为10~(6.5)TCID_(50)/mL,与常规条件培养的PCV-2对照(病毒滴度为10~(6.375 )TCID_(50)/mL)差别不明显,表明该体系可用于PCV-2的增殖。表明研究建立了PK-15细胞低血清培养PCV-2体系,为PCV-2的相关研究奠定了基础。     

猪瘟疫苗质量的替代检验方法研究进展

国标的猪瘟疫苗效力检验、支原体检验、外源病毒检验等质量检验方法均存在试验周期长、操作繁琐、敏感性较低等缺点,随着现代免疫学与分子生物学技术的快速发展,猪瘟疫苗质量检验的新兴替代检验方法日臻发展和完善。论文就近年来针对猪瘟病毒的病毒含量测定、猪瘟疫苗效力检验、支原体检验、外源病毒检验等免疫学与分子生物学新兴检测方法的研究进展做一综述,以期为提高猪瘟疫苗的质量检验水平、保障猪瘟疫苗质量提供参考依据。     

肉仔鸡暴发绿脓杆菌病的诊疗

绿脓杆菌,广泛存在于自然界的土壤、水源和空气中,是一种条件性致病菌。垦利县某鸡场引进艾维菌父母代种雏暴发绿脓杆菌病,导致大批死亡。经我所确诊后,由于及时采取防治措施,控制了本病继续蔓延。现将诊疗情况报告如下。     

SPF鸡胚St3galⅠ基因的克隆及其在MDCK细胞中的表达

为了提高MDCK细胞表面禽流感病毒(AIV)受体的水平,以12日龄的SPF鸡胚为试材,通过反转录PCR扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因(St3galⅠ),并将回收的片段插入到pMD18-T载体中。酶切pMD18-T-St3galⅠ和pCI-neo质粒,将目的片段进行连接,构建含有St3galⅠ基因的真核表达载体。利用脂质体介导法转染MDCK细胞,在G418的筛选下,获得具有抗性的转基因细胞系。通过细胞克隆化培养和PCR检测,筛选可稳定表达St3galⅠ基因的细胞株。结果表明,从鸡胚中克隆的St3galⅠ基因成功的插入到pCI-neo质粒,从而实现真核表达载体pCI-neo-St3galⅠ的构建。在G418选择压力下,初步获得了稳转目的基因的MDCK细胞系。将抗性细胞混合克隆进行稀释,经选择后挑选出30个单克隆抗性细胞株。分别以转染细胞基因组DNA和总RNA为模板,经PCR检测显示,目的基因已整合入MDCK细胞的基因组中并可稳定的进行表达。     

基于SOA架构的气象为农服务信息系统研究

以自动站数据、雷达资料、天气预报和农气文献为信息资源,综合利用计算机技术、数据库技术和通信网络技术构建并设计开发"基于SOA架构的气象为农服务数据库和信息系统",系统通过Web网站、电子显示屏、触摸屏和手机短信等发布各类信息,与气象微博、"96121"等专业咨询服务无缝对接,可以满足气象资料在农业生产、科研、决策等多方面应用需求,构建了一个专家与用户紧密联系的系统平台,为农村、农业、农民对气象信息的获取提供了现代化的途径,开辟了气象为农服务工作的新思路。     

鸭嗜水气单胞菌病的病原分离与诊治

自2004年秋至2006年5月，山东省内一些肉鸭养殖场暴发多起与鸭病毒性肝炎相类似的传染病。该病在临床症状、病理变化等方面与鸭病毒性肝炎类似，极易误诊。用鸭病毒性肝炎高免卵黄／血清抗体治疗无效，甚至会加重病情，但在适量加入某些抗生素或抗菌素治疗时，有一定治疗效果。笔者多次分离病原，诊断为鸭嗜水气单胞菌病。     

哪些疾病可引起鸡群产蛋率下降?如何防治?

问:山东日照地区一位读者来信反映,他所饲养的5000只220日龄蛋鸡,产蛋率由原来的88%,下降至目前的70%。经检查,饲料没有任何质量问题。请问哪些疾病可引起鸡群产蛋率下降?如何防治?答:许多疾病能引起鸡群产蛋量的下降,各类疾病对鸡群产蛋率及鸡蛋品质的影响又各不相同,鸡群也表     

减蛋综合征中药佐剂灭活苗的研究——Ⅱ.EDS中药佐剂灭活苗保存期与免疫期试验

对研制的三批中药佐剂灭活苗,在室内进行了保存期及免疫期试验。结果表明,疫苗保存于15～18℃室温为4个月,4～10℃为一年,预防接种鸡无任何不良反应,接种后15～30天HI抗体水平达高峰,至240天下降为1:80～1:160,但经攻毒试验证明,疫苗仍保持良好的免疫效果,现将试验情况报     

禽霍乱＋大肠杆菌病 二联蜂胶灭活疫苗与油佐剂疫苗注射部位的动态病理组织学比较观察

用禽霍乱 大肠杆菌二联蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别胸肌注射免疫肉鸡，分别于免疫后7d、14d和28d剖杀，取注射部位的肌肉组织，常规石蜡包埋切片观察。结果为，蜂胶疫苗免疫组免疫后7d时，肌纤维轻度水肿，纤维间有大量淋巴细胞和巨噬细胞的浸润，巨噬细胞吞噬有蜂胶颗粒，14d时肌纤维则恢复正常；油苗注射组免疫后，7d时肌肉中度水肿，其间有大量油乳状疫苗残留，镜检可见肌纤维断裂、坏死，其间有较多较大的油囊，囊壁由大量增生的成纤维细胞、异嗜性粒细胞、巨噬细胞、小血管及淋巴样细胞组成，细胞增生持续存在到28d，最后形成肉芽肿结构。研究结果表明，蜂胶疫苗免疫后对局部组织学影响明显小于油苗注射组。