鸡去泛素化相关因子1基因原核表达载体的构建及表达

构建鸡去泛素化相关因子1(Chicken ubiquitin-related factor 1,chUAF1)的原核表达载体,并对表达产物进行鉴定.将提取的鸡法氏囊cDNA根据哺乳动物基因组的特性5'-端GC含量高3'-端GC含量低的特点设计2对引物,PCR获取2段基因片段.将两者用搭桥部分的酶切位点进行酶切,胶回收,连接成chUAF1基因全长,再将基因克隆入pMD18-T载体,酶切鉴定后,将chUAF1基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UAF1.转化BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达并鉴定.结果显示,所构建的chUAF1基因表达载体pET28a-chUAF1经PCR及DNA测序结果表明构建正确,SDS-PAGE鉴定在预期位置出现阳性条带.结果表明,已成功构建了pET28a-chUAF1原核表达载体,为下一步试验提供了依据.     

HSB色值法对万寿菊花色色彩取值研究

本试验以万寿菊W217、W203为试验材料,使用HSB(Hues-saturation-brightness)色调值取值方法对万寿菊花色进行研究.结果表明,HSB色调值取值方法要比传统目测色卡比色法、HSB显色法简单、准确,普通数码相机即可操作.相对于传统HSB法,HSB色值法对环境的光照强度要求低,在晴天背阴处、晴天室内北窗附近、日光灯、等环境下均可进行拍照试验.色彩范围宽,原色、间色、复色都可使用,不会出现同一色度值有多种颜色的现象.在实际花色、果色、叶色性状遗传试验中,HSB色值法可以提供比较稳定、准确、可信度高的试验数据.在遗传育种工作中具有重要的应用价值.     

浅议玉米新品种的成功上市

随着我国加入WTO和《种子法》的实施,玉米种业市场逐渐放开,国外的跨国种业集团公司纷给登陆中国种业市场,促进中国种业快速成长,各个公司基本都完成了品种资源储备,都在全力推出自己的新品种,品种竞争达到了灼热化程度。1玉米新品种推广的意义(1)优良新品种的丰产性、广泛的适     

RNA干扰技术及其在马立克病端粒酶研究中的应用

RNA干扰是一种在动植物中广泛存在的、由双链RNA诱发的、同源mRNA特异性沉默的过程,具有高特异性、高效性和可遗传性等特征.RNA干扰技术已成为分子生物学研究中最为活跃的热点之一.端粒和端粒酶系统可以调节细胞的增殖,通过抑制端粒酶的活性而抑制细胞的增殖是肿瘤治疗的新策略.文章综述了RNA干扰技术对端粒酶活性调节方面的...     

λgtl0 cDNA文库表达序列标签测定时模板处理方式

表达序列标签是揭示基因组容量的有效方法。在构建cDNA文库的基础上，对以λgtl0为载体进行表达序列标签到定时模板的处理方法进行了探讨。结果表明，以λ噬菌体DNA为模板直接测序比PCR产物经回收后为模板进行测序，其目标克隆的平均插入片段长度要长，但反应成功率低。以λ噬菌体浸提液为模板进行PCR并在产物回收后进行测序反应，可能是以λ噬菌体为载体构建文库的表达序列标签测定的最佳选择。     

程序性细胞死亡机理及相关基因

程序性细胞死亡（ＰＣＤ）是一种与“坏死”不同的主动性“细胞自杀”过程。其调控重要而复杂，是一个多基因参与的系统工程。它的实现严格地控制着细胞死亡和增殖的平衡，这一过程的失衡则会导致疾病的发生。本文仅就程序性细胞死亡及有关基因及其调控做一简介。     

猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列表达载体的构建及其转录水平的检测

构建猪肌生成抑制素(MSTN)成熟蛋白编码序列的克隆与表达载体，并对mRNA进行转录水平的检测，为获得较好的猪肌生成抑制素抗原、制备抗体打下良好的基础。猪MSTN基因的cDNA去除信号肽后，用PCR扩增的1．2kb目的片段与pMDl8-T载体连接，将克隆载体的质粒DNA与同样用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ限制性内切酶酶解的表达载体pET28a( )质粒定向连接，对筛选出的阳性克隆用酶切及测序法鉴定。对猪MSTN基因成熟蛋白编码序列进行反转录，对mRNA Northern杂交进行转录水平的检测。结果，所得到的序列与所设计的序列完全一致，表明成功地进行了猪MSTN基因编码序列的克隆及筛选；目的片段定向插入，阅读框架正确；RT-PCR成功地反转录得到约1．2kb的目的DNA片段，Northern杂交后对mRNA印迹放射自显影，见到清晰的1．2kb特异带。     

万寿菊种子发芽实验

以万寿菊品种芙蓉8号种子为材料,研究了万寿菊种子发芽最适的漫种时间、温度和处理方法。结果表明:采用标准法催芽时,万寿菊种子发芽最适的浸种时间是8h,最适温度是25℃;毛巾法处理的种子在同等条件下发芽势和发芽率都比标准法处理的种子要高,毛巾法的最佳催芽温度也是25℃。     

猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列真核表达载体的构建

从猪肌生成抑制素(MSTN)cDNA序列中设计引物。以pMD18-T-MSTN质粒为模板，PCR扩增猪MSTN成熟蛋白编码序列，该片段全长1095bp。将所得片段与pMD18-T载体连接，构建重组质粒pMT—mpMSTN，将其转化到大肠杆菌DH5a中，成功地筛选到阳性克隆。双酶切重组质粒pMT—mpMSTN和真核表达载体pcDNA3．1，连接目的片段与载体pcDNA3．1，转化大肠杆菌DH5a，经酶切、PCR及测序分析，表明成功地构建了真核表达质粒pcDNA3．1-mpMSTN。