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根据猪生殖与呼吸综合征病毒已知序列设计了3对引物,采用RT—PCR方法分别扩增ORF3、ORF5和ORF6基因,并将其依次与真核表达质粒pcDNA4.0定向连接,构建了重组质粒pcDNA4.0-ORF6-ORF3-ORF5,经提纯后,给试验组小鼠后肢胫前肌注射,每只100big,2周后再注射1次。首免后每隔7d采血1次,用间接ELISA检测血清抗体水平并测定其中和抗体水平。结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生很高的ELISA抗体和中和抗体水平。 相似文献
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动物致病性RNA病毒,如登革热病毒(DEN)、猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)和风疹病毒(RUBV)等,可诱发人或动物产生严重的传染病。这些传染病在世界各地的间歇性暴发,给人类健康造成了严重影响,给畜牧业发展造成了巨大的损失。逆向遗传学的发展有力地推动了动物RNA病毒的研究,它的基本内容包括通过RT-PCR获得RNA病毒的全长cDNA分子,对该cDNA进行一定的基因工程操作后,利用 相似文献
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猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和边界病病毒(BDV)均为黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)的成员。它们在结构、抗原性和遗传上关系密切。据推测CSFV、BVDV和BDV是由一个共同的祖先为适应不同动物演变而来。BVDV和BDV可感染反刍动物和猪,CSFV仅 相似文献
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牛黄即牛的胆结石 ,是名贵中药材之一 ,有牛黄的牛平时较难见到。本文通过对 1例牛黄牛和 3例非牛黄牛胆汁的理化检验和细菌分离鉴定 ,分析了牛胆汁的物理化学改变和细菌感染与牛黄形成的关系 ,初步表明胆汁中糖蛋白、间接胆红素、胆固醇和钙离子含量的增加 ,磷脂含量的降低 ,以及胆汁的大肠杆菌和乳酸杆菌感染等 ,对促进牛黄生成有重要作用。 相似文献
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【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044 bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45 ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45 ku的FUT2蛋白。 相似文献