转移抗猪瘟病毒核酶基因兔的研究

采用显微注射法，将构建的绵羊金属疏因（ｏＭＴ）基因启动子与抗猪瘟病毒核酶（ＨＣＶ－Ｒｉｂｏｚｙｍｅ．ＨＲ）基因融合的质粒ｐＭＨＲ＿（３２）线性ＤＮＡ分子约２００～４００个基因拷贝导入兔原核胚的雄原核中，１５９枚导入基因胚移植给９只受体兔，产仔２２只，移植成活率为１３．８％。２２只仔兔经聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和核酸探针杂交检测，６只体内整合有外源目的基因，整合率为２７．３％。再用１００个半数反应量（ＲＩＤ＿（５０））的猪瘟病毒Ｃ系兔化弱毒兔体攻毒，４只外源基因整合的实验兔能完全或部分抵抗ＨＣＶ弱毒攻击，不产生或无明显发热反应；而对照兔和６只ＨＲ基因未整合的实验兔不能抵抗ＨＣＶ弱毒攻击，出现特征性的稽留热型。逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＲＮＡ探针杂交检测４只转基因兔，两只肝中表达出ｏＭＴ－ＨＲｍＲＮＡ。认为微注射导入的外源ＨＲ基因在兔体内得到了整合和表达     

动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展

动物致病性RNA病毒，如登革热病毒(DEN)、猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)和风疹病毒(RUBV)等，可诱发人或动物产生严重的传染病。这些传染病在世界各地的间歇性暴发，给人类健康造成了严重影响，给畜牧业发展造成了巨大的损失。逆向遗传学的发展有力地推动了动物RNA病毒的研究，它的基本内容包括通过RT-PCR获得RNA病毒的全长cDNA分子，对该cDNA进行一定的基因工程操作后，利用     

牛黄牛胆汁理化检验与细菌分离鉴定

牛黄即牛的胆结石 ,是名贵中药材之一 ,有牛黄的牛平时较难见到。本文通过对 1例牛黄牛和 3例非牛黄牛胆汁的理化检验和细菌分离鉴定 ,分析了牛胆汁的物理化学改变和细菌感染与牛黄形成的关系 ,初步表明胆汁中糖蛋白、间接胆红素、胆固醇和钙离子含量的增加 ,磷脂含量的降低 ,以及胆汁的大肠杆菌和乳酸杆菌感染等 ,对促进牛黄生成有重要作用。     

ALV-J分离株Hrb-1 gp85基因蛋白的原核表达及多克隆血清的制备

禽白血病(Avian leukosis)是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的以造血细胞增生为主的一类传染病,对养禽业危害最大的是禽淋白细胞性白血病.禽白血病病毒属反转录病毒科C型肿瘤病毒属,其亚群特异性由病毒囊膜糖蛋白gp85决定.     

猪瘟病毒C-株(脾淋毒)3′-UTR的克隆和二级结构分析

根据已发表的CSFVC—株序列，设计合成了3′—UTR特异性PCR引物对F—R及半套式上游引物F′。从兔脾组织中提取总RNA，应用RT—PCR及Half—nested PCR，成功地扩增出了C-株3′—UTR，克隆到pMD-18T载体后进行了序列测定。与AID株、Alfort/187株、Brescia株、F114株、Eystrup株、Riems株和Shimen株的相应区段进行了序列比较分析，同源性分别为98．7％、98．2％、98．2％、98．7％、97．8％、97．8％和98．7％。C—株3′—UTR中存在一富含T的插入序列，可能是C—株在兔化致弱时产生的变异标记，对其二级结构具有较大影响。在其它疫苗株的3′—UTR不同位置，亦存在相似的插入序列，该序列可能与病毒的毒力有直接关系。     

重组猪瘟病毒E2基因逆转录病毒载体的构建及其表达活性

从实验感染兔脾组织中提取总RNA，应用RT—PCR得到了CSFVC-株结构蛋白E2基因，定向克隆于逆转录病毒载体pBABEpuro，经PCR、酶切和序列分析鉴定，获取阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒载pVSV—G共转染GP2—293细胞，收获假型病毒，并在Polybrene的介导下感染PK15细胞，嘌呤霉素筛选表达猪瘟E2基因的细胞株。通过细胞传代并结合PCR、免疫荧光及ELISA检测表明，所筛的细胞细胞系能稳定表达猪瘟E2基因，而且表达产物具有良好的生物学活性。     

用原位杂交技术对牛组织中FMDV RNA检测和定位

采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDVRNA进行了检测和定位。结果显示，接毒后7～28d4头牛舌上皮组织、7～21d的喉咽部有强阳性染色；接毒后35d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色；接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等其他组织中均没有阳性染色，表明牛舌上皮和喉咽部上皮组织中感染了FMDV，本研究为进一步阐明FMDV在宿主体内的持续感染机理提供极有价值的线索。     

中药对隐性乳房炎奶牛红细胞免疫粘附功能的影响

用黄芪、白芍、当归、川芎、蒲公英、王不留行、益母草等中药组方 ,对患隐性乳房炎泌乳黑白花奶牛进行阶段性添加试验 ,于试验前后测试红细胞 C3 b花环、红细胞免疫复合物花环及红细胞 C3 b花环促进率和抑制率 ,并检测隐性乳房炎转阴情况。结果表明 ,隐性乳房炎患牛红细胞免疫功能较低 ,用药后红细胞免疫功能明显提高。中药治疗隐性乳房炎的有效率达 83%。     

双峰驼诱导排卵因子（OIF）纯品稳定性及其空间构象的初步研究

应用岛津260紫外分光光度计分别扫描了不同条件下保存的诱导排卵因子（OIF）纯品和经解离液处理后OIF空间结构的变化，扫描结果表明，在含纯氮的冷环境中，该因子基本上仍可保留其结构与特性：该因子仍呈线状多肽，在空间结构上不存在氢键和二硫键。     

猪瘟C—株和野毒株p80基因的序列分析

利用RT-PCR及nPCR技术扩增出了C-株免脾组织毒和广西玉林野毒（GXYL）p80基因的一段长942bp的序列，并将其克隆互PMD-18T载体中，测定其核苷酸序列并推导出了相应的氨基酸序列，比较C-株，GXYL株和已发表的Alfort株、Brescia株相应核苷酸序列及氨基酸序列同源性，核茜酸同源性最低为87.46%，最高为98.08%，氨基酸同源性最低为94.27%，最高为98.09%，进一步证实了HCV p80基因的高度保守性。