荧光定量PCR检测2型猪圆环病毒方法的建立

通过克隆2型猪圆环病毒（PCV2）的开放阅读框2（0RF2）基因编码其核衣壳蛋白（Cap）的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的靶序列设计一对引物和一条TaqMan探针.对PCR反应条件优化后,对构建的标准阳性模板定量,然后1 0＆#215;倍比稀释进行荧光定量PCR（qPCR）扩增并制作标准曲线,初步建立了PCV2检测的qPCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0＆#215;102拷贝/μ L,线性范围为101 ～ 109,达9个数量级,并且具有很好的特异性.对起始浓度为1.0＆#215;108、1.0＆#215; 106、1.0＆#215;104拷贝/μL的标准品的最终实际测得CT均值分别为12.77、19.72和26.89;变异系数分别为0.25％、0.10％和0.13％,均小于1％,说明此方法具有良好的准确性和重复性.     

三例禽巴氏杆菌病的诊断

通过对广州郊区3个发病鸡场进行病原菌的分离培养、涂片镜检、生化特性鉴定、致病性、药敏等试验,结果表明,分离的5株菌为多杀性巴氏杆菌,诊断为禽巴氏杆菌病.其对壮观霉素、呋喃妥因、头孢三嗪均高度敏感,对卡那霉素、红霉素、新霉素、痢特灵、头孢噻肟均中度敏感,对四环素、氟哌酸、杆菌肽、链霉素、林可霉素、青霉素、庆大霉素均低度敏...     

28日龄鸡暴发IBD的诊断

传染性法氏囊病 (infectious bursal disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒引起的一种急性、高度接触性传染病 ,本病对 4～ 6周龄的鸡易感。本文将对广州市郊某养鸡饲养场饲养的一批 2 8日龄海兰鸡暴发 IBD的发病情况及一系列诊断报告如下。1　发病情况2 0 0 1年 4月初 ,广州市郊某养鸡场的一批刚出壳的海兰鸡 4 0 0只 ,饲养于经福尔马林熏蒸消毒过的鸡舍 ,笼养 ,并由专人饲养管理。于 7日龄时进行口服免疫传染性支气管炎疫苗 ,养至 2 8日龄时突然发病 ,第 1天死亡 5 0多只 ,第 2天死亡 30多只 ,第 3天死亡 2 0多只。2　临床症状鸡群大…     

细胞高密度培养关键技术研究进展

细胞高密度培养是指在人工条件下模拟体内生长环境,使细胞在细胞生物反应器中高密度生长,用于生产生物制品的技术。本文就细胞高密度培养技术中的细胞株筛选及改造、无血清培养基选择及适应、生物反应器、微载体选择等可能影响细胞存活率以及产物表达率的关键技术进行综述。     

广东鸭浆膜炎流行情况与防治对策

近年来广东省的茂名、湛江、佛山、中山、番禺等市县鸭场较多爆发鸭浆膜炎（鸭疫里氏杆菌病）,７～３０天龄鸭均见发病。发病率３０％～１００％,病死率３０％～８０％。临床表现主要是严重下痢、共济失调、心包炎、肝周炎、气囊炎。我们根据广东流行情况,采用药物防治与灭活苗免疫预防相结合的措施,取得了较好的防治效果,现总结如下：１　流行病学特征７～３０天龄鸭均见发病,以１２～２０日龄爆发较常见,个别地区８日龄见爆发。全年均见发病,３～１０月份是爆发季节。番鸭、樱头谷鸭极易感,麻鸭、水鸭也见发病。受污染的场地、水…     

番鸭“花肝病”的研究简报

1999年初至今 ,在广东省的三水、番禺、南海、中山 ,福建莆田等地多处番鸭场均发生一种临床上以缩头、厌食、拉白(绿 )痢为特征的流行病 ,其病变为肝、脾出现坏死点 ,肾肿大出血等。该病潜伏期较长、病程不一 :发病率为 5 0 %～90 %,死亡率 60 %～ 90 %,给广大养殖户造成较大经济损失。据其病变特征 ,群众形象地称之为番鸭“花肝病” ,因其病原尚待确定 ,我们也暂如此称之。目前国内外尚未见报道类似鸭病。我们对该病的发病情况作了调查 ,并进行了治疗试验、病例复制试验和病原的分离等工作 ,现简报如下。1　发病情况调查在广东省的三水、番…     

广东地区鸭黄病毒JM株的分离和初步鉴定

2010年4月以来,我国部分地区陆续发生以产蛋鸭产蛋急剧下降为特点的疾病。从广东省江门地区某鸭场的发病鸭群采集样品,接种鸭胚后分离到一株病毒,并命名为JM株,经RT-PCR检测为黄病毒核酸阳性。序列测定后分析显示,该分离株JM株与黄病毒属Tembusu病毒的对应序列相似性最高,其中与Tembusu病毒JS804株相似性最高达98%。结果表明,JM株为黄病毒,与该病鸭产蛋急剧下降有关。     

伪狂犬病活疫苗免疫猪血清抗体消长规律的研究

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)与中和试验(SN)方法,对伪狂犬病活疫苗免疫猪血清抗体水平进行监测,并对免疫猪和补充及对照猪进行伪狂犬病野毒抗体检测。结果表明伪狂犬病活疫苗免疫健康敏感猪7 d后抗体水平开始上升,35 d后达到高峰,高水平的免疫抗体维持时间长达2个月以上,之后逐步下降,直至试验结束(365 d)PRV-Ab仍呈阳性;而非实验对照猪血清自始至终PRV-Ab均为阴性;全部猪血清伪狂犬病野毒抗体皆为阴性。说明通过长时间的同栏饲养未发现伪狂犬病野毒感染。     

凝集试验检测兰氏D群链球菌血清抗体方法的建立

建立凝集试验,用于检测兰氏D群链球菌血清抗体.采用兰氏D群链球菌C55914株制成凝集试验抗原,制备的抗原与兰氏D群链球菌兔高免阳性血清、猪正常免疫阳性血清发生凝集反应,不与健康兔阴性血清及健康猪阴性血清发生凝集反应,与链球菌兰氏C群、兰氏E群、巴氏杆菌A群、B群阳性血清呈阴性反应.试验证明,凝集试验能够快速地检验出兰...     

猪链球菌病灭活疫苗(2型,HA9801株)的研制(Ⅴ)——猪链球菌2型灭活疫苗临床使用效果

广东永顺生物制药有限公司研制生产的猪链球菌2型灭活疫苗, 2005-2008年在全国十多个地区使用,证明该疫苗安全性好,副作用小,免疫效果可靠,是防控由猪链球菌2型引起的猪链球菌病的有力武器,具有非常重要的意义.