茄子生长素诱导基因SmIAA19的克隆和分析

以茄子单性结实品系‘D-10’为材料,以茄子单性结实差减文库中差异表达的EST片段Z732为依据,采用RT-PCR和RACE技术克隆获得了生长素诱导基因SmIAA19（登录号KP114221）的cDNA序列。该基因全长为800 bp,开放阅读框为558 bp,编码185个氨基酸。氨基酸序列比对结果表明该基因编码的氨基酸序列具有Aux/IAA基因家族的典型结构域和保守基本序列,在分子进化上与马铃薯距离最近,与番茄处于同一分支。qRT-PCR分析表明,在低温（门茄）和适温（四门斗）条件下,SmIAA19在单性结实和非单性结实的子房和果实发育过程中均有表达,单性结实品系中的表达量显著高于非单性结实品系,单性结实品系开花当天子房中的表达量最高,非单性结实品系在低温和适温条件下的表达量均保持在较低的水平。IAA含量检测结果表明,在不同结实性茄子品系的果实发育过程中IAA含量的变化趋势基本相同,在果实发育前期含量较高,且在低温（门茄）条件下,不同结实性果实中IAA的含量变化与SmIAA19基因的表达量变化相一致。SmIAA19基因可能与茄子的单性结实有关。     

噬菌体展示技术的研究进展

噬菌体展示技术是近年来在生物工程研究领域中发展起来的一项新技术,该技术将基因型和表现型有效地联系起来,是后基因组工程的有力工具。本文针对噬菌体展示技术中关键的两个环节--噬菌体载体的选择和噬菌体筛选技术的进展作了综述性的介绍。     

茄子TRV-VIGS体系的优化及SmIAA19基因功能初步分析

以经过改造的烟草脆裂病毒（Tobacco rattle virus,TRV）载体PYL156为工具,采用叶片注射法侵染茄子（Solanum melongena L.）叶片,通过表型比较、TRV病毒分子检测和荧光定量PCR技术分析,探究环境温度、植株大小、目的基因插入片段大小对茄子TRV-VIGS沉默体系的影响。结果表明,昼夜温度为（25 ± 3）℃和（20 ± 2）℃时,接种茄子幼苗子叶的植株沉默效果明显,侵染后植株叶片中目的基因表达量与阴性对照相比明显降低;早春日光温室和秋季日光温室条件下,侵染植株表型性状和基因表达量差异不显著。沉默片段大小为200 bp左右时目的基因的沉默效果最好;侵染茄子幼苗子叶期植株出现明显病毒斑,而接种6周龄真叶则无明显表型差异。用茄子生长素诱导基因（SmIAA19）为靶基因对其进行验证,结果表明显著抑制了SmIAA19的表达,其在叶片中的表达量和生长素含量均显著降低,表明SmIAA19是1个与生长素代谢途径相关的基因。     

气调保鲜对草莓贮藏期品质的影响

[目的]本研究旨在明确气调贮藏对草莓贮藏期品质的影响。[方法]以"红颜"草莓为材料,分别在0℃、4℃、0℃空气、0℃气调等条件下进行贮藏,定期取样检测贮藏期内果实失重率、硬度、色度、抗坏血酸含量和表型等各项品质指标后,对比各指标间的差异变化。[结果]在0℃,4%CO_2+10%O_2条件下贮藏的草莓的品质最佳,贮藏至第15天时失重率仅为0.24%,硬度为518.65 N,抗坏血酸含量为0.46μg·g~(-1),显著优于其他贮藏条件(P0.05),且能维持鲜亮的色泽、无病害发生,与对照相比货架期延长了7～9 d。[结论]0℃,4%CO_2+10%O_2处理是一种有效可行的草莓保鲜方法,可为草莓的贮运保鲜提供理论依据和技术参考。     

茄子全基因组InDel变异特征及分子标记开发和应用

选取4份圆茄(Solanum melongena L.)高代自交系进行全基因组重测序,鉴定出145 407个InDel,12号染色体InDel数最少(7 752),1号最多(19 738)。筛选出7 959个长度大于10bp的InDel位点,挑选均匀分布在基因组上的144个设计InDel引物并进行验证。利用26份茄子材料对144对InDel引物进行筛选,63对表现出稳定的多态性,比例为43.75%;主要等位基因频率为0.4038～0.9808,平均为0.7659;基因多样性指数(H_s)为0.0377～0.6501,平均为0.3217;多态性信息含量(PIC)为0.0370～0.5750,平均为0.2663,42个标记多态性信息含量大于0.200,多态性较好。当遗传距离为0.235时,将26份不同类型的茄子材料划分为2个类群。利用多态性信息含量高的前10个InDel标记构建了26份茄子材料DNA指纹图谱。另外,选择在亲本间具有多态性的InDel标记用于4个杂交组合的F₁代真实性鉴定,鉴定结果表明3个为真实杂交种,与田间鉴定结果吻合。     

猪肺炎霉形体培养技术简介

猪肺炎霉形体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)是猪地方性流行性肺炎(Swine enzootic pneumoniae,SEP,俗称猪喘气病),又称猪支气管肺炎(Mycoplasmal pneumoniae ofswine,MPS)的主要病原菌。该病是猪特有的一种接触性传     

制苗用鸡蛋中支原体污染的检测

本研究应用KM_2液体培养基培养法和姬姆萨氏染色法对来源于山西生物制品厂的两批可疑感染支原体的制苗用鸡蛋进行了检测。结果表明:第一批样品阳性检出率为71.4％;第二批样品阳性检出率为85.7％。由此说明,该试验方法作为支原体污染检测的常规方法使用于生产中具有重要的实践意义。     

蜂王浆中超氧化物歧化酶活力测定

本文以邻苯三酚自氧化法测得蜂王浆中具有较高的SOD活性,酶活力约为135U/g.其随贮藏期延长.酶活力逐渐下降,至第六天完全消失.但通过对同批冷冻保存一个月未融化过的蜂王浆中SOD活力测定,发现酶活力变化不大,保持原鲜王浆酶活力,其结果表明:引起蜂王浆中SOD活力下降的主要原因是由于反复冻融所致,由此可见SOD活力对温度较为敏感.本文以邻苯三酚自氧化法测得蜂王浆中具有较高的SOD活性,酶活力约为135U/g.其随贮藏期延长.酶活力逐渐下降,至第六天完全消失.但通过对同批冷冻保存一个月未融化过的蜂王浆中SOD活力测定,发现酶活力变化不大,保持原鲜王浆酶活力,其结果表明:引起蜂王浆中SOD活力下降的主要原因是由于反复冻融所致,由此可见SOD活力对温度较为敏感.     

猪肺炎支原体P46基因特异性噬菌体随机肽库的构建

通过构建猪肺炎支原体膜蛋白P46的噬菌体展示肽库,以筛选其特异性抗原表位。用DNase I随机消化法获取P46基因主要抗原序列(不含信号肽的编码序列)的随机片段,片段经与pBamHI Linker连接和BamHI酶切后,克隆到pC89 pⅧ型噬菌粒载体,重组噬菌粒转化感受态细胞XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,从而构建了P46基因特异性噬菌体随机肽库。结果,所建肽库含有约2.3×104个不同克隆,滴度约为1.3×1014PFU/mL。说明所建肽库具有较大库容和较好的多样性,可满足P46蛋白抗原表位的筛选。     

噬菌体展示库技术的研究及应用进展

噬菌体展示肽库技术是将外源蛋白质或多肽的基因表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,并在其表面展示,进而通过筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体,得到大量富集,从而获得目的多肽或蛋白质,在DNA序列分析后应用于实践中。本文叙述了噬菌体展示肽库技术的基本原理、主要构建途径、筛选方法及应用现状和展望。