猪瘟病毒4种检测方法的比较

应用病毒分离鉴定、荧光抗体法、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和夹心ELISA 4种方法,分别对23份猪瘟病料组织中的猪瘟病毒(CSFV)进行了检测,并比较4种检测方法的优缺点。结果显示,病毒分离鉴定法准确性较高,诊断比较容易,但存在试验步骤繁琐,所需时间长的缺点;荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,特异性比较差;RT-PCR检测法具有快速、敏感等优点,特别是样品保存不理想时更有价值,利用套式PCR(nested-PCR)可以提高检测的特异性;夹心ELISA检测法具有快速、敏感等优点,但在样品保存不理想时会出现假阴性结果。     

TGF-β1基因真核表达载体的构建及在猪脐静脉内皮细胞中的表达

应用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞扩增转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）全基因,构建含有TGF-β1基因及EGFP报告基因的真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1。采用脂质体法转染体外培养的猪脐静脉内皮细胞（SUVECs）后,通过直接荧光观察pEGFP-C1-TGF-β1融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过RT-PCR、间接免疫荧光方法检测TGF-β1基因在SUVECs中的表达。结果在转染后1周观察到绿色荧光,RT-PCR、间接免疫荧光法检测TGF-β1表达均为阳性。本研究成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-C1-TGF-β1,且TGF-β1基因在SUVECs中获得表达。     

我国动物性食品卫生存在的问题及对策

在过去的20多年中,虽然我国养殖业生产有了很快的发展,畜禽饲养量和畜产品产量有了很大的提高,但我国的养殖业水平还不高,尤其是畜产品的卫生质量还存在着严峻的问题.虽然我国肉类总产量占世界肉类总产量的28%,但是我国出口的肉类仅占总产量的1%.我国的活猪、活鸡、冻肉的出口地方只有香港地区和东欧,而要向欧盟、日本、美国等地出口却非常困难,主要原因是我国畜产品的卫生质量不过关.要提高我国畜产品在国际市场的竞争能力和保障广大消费者的身体健康,就要从提高畜产品卫生质量入手,采取有效措施,从根本上解决我国动物性食品安全问题.     

油桐

<正> 油桐(Aleurites fordii Hemsl),又名婴子桐、虎子桐等,为大戟科油桐属落叶小乔木、干性木本油料树种。它枝叶繁茂、根系发达,耐干旱耐瘠薄能力较强,易于栽培,挂果早见效快,经济价值高,是浅山丘陵区较理想的水保经济林树种。主要分布于“两广”、“两湖”和河南、陕西等地。     

中华鳖脾淋巴细胞体外转化的实验条件研究

为确定MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测中华鳖脾淋巴细胞体外转化的条件,对脾淋巴细胞浓度和培养时间、丝裂原种类和浓度等影响因素进行优化.结果显示:2×106 cells.mL-1的脾淋巴细胞用10μg·mL-1Con A(伴刀豆蛋白A)诱导培养120 h或用5μg.mL-1 PHA(植物血凝素)诱导培养144 h,能获得良好的检测效果.研究表明,采用MTT法测定中华鳖脾淋巴细胞体外转化方便可行,可为中华鳖脾淋巴细胞体外转化方面的研究提供参考.     

山地花椒的丰产栽培

花椒是优质的调味佐料和木本油料树种。其适应性强 ,抗干旱 ,耐瘠薄 ,也是适合广大山区栽培的重要经济树种。近年来 ,井陉县发展花椒的积极性较高 ,栽培面积逐渐扩大 ,但栽培管理不善 ,许多园地经济效益较低。通过在生产实践中不断摸索 ,总结出了一套适合本地的山地花椒丰产栽培技术。1　科学建园花椒适应性强 ,对土壤要求不太严格 ,但喜光、喜钙 ,所以园地一般选择在地势开阔 ,背风向阳的石灰岩山地。土壤以质地疏松 ,保水保肥性强 ,透气良好 ,土层较厚 (不小于 5 0cm)的沙壤土和中壤土为好。建园时可选择适生、适销、结果性状良好的优良品…     

产单核细胞李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备与鉴定

【目的】制备抗产单核细胞李斯特菌溶血素O(LLO)的特异性单克隆抗体。【方法】用LLO重折叠的原核表达产物LLO-his免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞,与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA法筛选、多克隆及单克隆分离出阳性细胞株后,再用体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定其效价及相对亲和常数;用HBT单克隆抗体亚类鉴定试剂盒鉴定抗体亚型;常规方法制备染色体,观察细胞株染色体数目及标志染色体;Western blot检测抗体的特异性。【结果】获得了2株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为3F5-G3和2B4-C8,其腹水效价分别为1∶(1×105)和1∶(1×107);染色体分别为97±5和93±8条,且观察到标志染色体;相对亲和常数分别为0.49和0.26μg/mL;抗体亚类均为IgG1,轻链均为κ链。特异性鉴定结果表明,2种单克隆抗体均可与LLO蛋白发生特异性反应,而与载体蛋白不发生反应。【结论】获得了抗LLO的特异性单克隆抗体。     

NDV和IBV感染对肉鸡大肠杆菌病发病的影响

为了解新城疫弱毒苗和传染性支气管炎弱毒苗接种对肉鸡大肠杆菌病发病的影响。对8日龄肉仔鸡用不同剂量NDVclone-30株或IBV-H120株进行滴鼻及饮水,48h后相同途径接种2株不同“O”血清型的致病性大肠杆菌。结果表明,致病性大肠杆菌单独接种鸡死亡率在20%-25%之间,而NDVclone-30株或IBVH120株与致病性大肠杆菌联合接种鸡死亡率有明显增加达40%-75%。     

应用套入式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测蓝舌病病毒的研究

本实验建立了一种Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法。应用方法检测５株标准株蓝舌病病毒（Ｔ４、Ｔ１０、Ｔ１１、Ｔ１６、Ｔ２０）和５株国内蓝舌病病毒分离株（ＣＦ４、ＡＦ６、Ｚ１、Ｈ１、Ｇ１４）,检测结果均为阳性,而检测相关环状病毒（ＥＨＤ２、ＥＨＤ６、Ｉｂｒａｋｉ）,检测结果均生。研究证明,此方法可检测到３．５ｆｇ的ＢＴＶ－ＲＮＡ,灵敏度较高。该方法成功区分了蓝病病毒和相关环状病毒,比血清学方法更加优势,在临床