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从副结核分支杆菌K-10菌株克隆出840 bp的hed基因片段,插入原核表达载体pET-32a(+),转化至Escherichia coliBL21(DE3),在0.8 mmol.L-1 IPTG诱导下进行表达,纯化重组蛋白,将其进行Western-blot分析、小鼠免疫试验,包被ELISA板,建立间接ELISA方法。结果显示:重组蛋白具有良好的抗原性,方阵滴定法确定了间接ELISA方法的抗血清最佳稀释度(100倍)和抗原包被浓度(4.4μg.mL-1),该方法具有较好的特异性和敏感性。 相似文献
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含GFP-Lac Z基因的伪狂犬病病毒上海株缺失株的构建 总被引:3,自引:0,他引:3
在伪狂犬病病毒(PRV)上海株gI和gE基因克隆鉴定的基础上,用BamHⅠ BstpⅠ去掉gE基因的5′端363bp,在缺失位置插入绿色荧光蛋白(GFP)和Lac Z基因,构建含双报告基因的PRV-SH转移载体pgEI-GFPZ。将psEI-GFPZ转染PRV-SH的BHK-21细胞,待出现80%病变后收获病毒,并以蚀斑法得到纯化的含Lac Z和GFP两种筛选标记的缺失了gE/gI的重组病毒株。 相似文献
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我国地域辽阔,不论是国际间或是国内的长途运输,对脑容量小、精神相对脆弱的鸵鸟来讲,保证安全尤为重要,然而长途运输毕竟是一种应激,一着不慎就会造成极大的损失,笔者在美国和国内遇到和经历的3次运输非洲鸵鸟有着深刻的经验和教训。1鸵鸟的生理特点鸵鸟是世界上... 相似文献
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