哺乳动物体外受精若干问题

近10年来,家畜体外受精技术已取得了长足进展,特别是随着一系列生物高技术的发展,如DNA构建、转基因技术、胚胎干细胞的建立和克隆动物的产生,人们对生殖生物学领域的认识更加深入.可以预料,今后与胚胎学有关的技术将会得到更进一步的应用和发展.本文仅介绍有关体外受精研究的最新资料.     

肝素和钙离子载体诱导猪射出精子体外获能的研究

本文采用肝素和钙离子载体诱导猪射出精子体外获能,根据对去透明带仓鼠卵的穿透情况评价获能效果,并用台盼兰·姬姆萨染色观察精子的死活及顶体状态。结果表明,未经获能处理的猪精子不能穿透仓鼠卵,肝素和I-A均能诱导猪精子体外获能并引起顶体反应。经获能处理的精子,在授精后2小时穿透卵子,4小时开始形成雄原核,6小时形成发育良好的雄原核。肝素处理以100μg效果最好,穿透率达77.8%,有原核卵百分率达47.2%;I-A处理以0.3uM为宜,穿透率达66.7%,有原核卵百分率达42.4%。咖啡因与肝素和I-A具有协同作用,能提高精子的穿透能力。有顶体反应的活精子百分率与穿透率呈强正相关(肝素组:r=0.97,P<0.01;I-A组:r=0.94,P<0.01)。     

关于犬繁殖的若干问题

犬的繁殖有其自身的规律与特点,深入认识和了解犬的生殖规律与特点,开展犬生殖生理与繁殖技术的研究,科学地实施繁殖,是提高犬的繁殖力,加快犬的培育与品种改良步伐的基础与保证。 1 犬的生殖规律与特点 1.1 犬的性成熟与配种适龄     

草原红牛及其杂种牛群体遗传变异与肉用性能的微卫星标记研究

选用草原红牛、草原红牛与利木赞杂交后代作为试验牛群体，经过基因组DNA的提取、微卫星引物的PCR扩增、扩增产物的电泳分型、各座位等位基因分析以及基因频率、多态信息含量（PIC）和杂合度（H）的计算等步骤，从分子水平上分析了草原红牛及其杂交牛群体的遗传变异。在此基础上，以体重、体尺作为衡量牛生长发育的指标，以肉牛线性体型评分方法中的肌肉度线性评分性状和屠宰肉用性状作为衡量牛肉用性能的指标，运用SPSS软件分析了21个性状与8个微卫星标记的关系，发现了6个微卫星标记对试验牛群体某些生长发育性状和肉用性状存在正面或负面影响。     

草原红牛改良群体H-FABP基因SNP及其与肉质性状的相关分析

试验采用PCR-SSCP的方法对含1/2利木赞血缘的改良草原红牛的H-FABP基因5’-调控区进行SNP分析,并分析其多态性与改良草原红牛肉质性状的相关性。结果表明:改良草原红牛H-FABP基因5’-调控区存在多态位点,在136位点发生1个T碱基的插入突变,在142位点,发生了G→A转换。相关分析结果显示剪切力在AA和AB、BB基因型间差异极显著(P<0.01),AB与BB基因型间差异不显著(P>0.05),A基因对剪切力有负效应,其余肉质性状在不同基因型间差异均不显著(P>0.05)。表明H-FABP基因对改良草原红牛肉质嫩度有显著影响。     

我国胚胎生物技术产业化的趋势与展望

生物技术以其起点高、发展快、应用广、效益大而倍受世人瞩目。很多学者预言,２１世纪将是生物技术的世纪。世界各国投入了大量的物力、财力,集中了很多优秀人才来从事生物技术的研究。我国“８６３”计划中也将生物技术的研究列在首位。胚胎生物技术是动物生物技术的重...     

利用微卫星多态性进行绵羊杂种优势预测的研究

我国是世界养羊第一大国,绵山羊总数已达3亿只以上.近年来,肉羊业发展尤其迅速,羊肉的人均占有量已由1995年的1.70kg升至2003年的2.7kg.鉴于我国绵羊产肉量低且无肉羊专用品种,我国从国外陆续引入了德国肉用美利奴(简称德肉美,下同)、特克塞尔、萨福克、道赛特、杜泊等肉用品种羊,开展了广泛的杂交改良生产.如何才能发挥这些引入品种的最佳作用,又不破坏我国原有部分合理化的细毛羊生产结构,成为当前需解决的问题之一.根据这种情况,我们通过对微卫星多态性分析对德肉美等引入品种与小尾寒羊、东北细毛羊等地方品种的杂种优势进行了预测,对绵羊杂交方案优选进行了初步探讨.实验过程与结论如下.     

Ob基因对松辽黑猪肉质和胴体性状的影响

以松辽黑猪为研究对象,分析Ob基因对其肉质和胴体性状的影响。测定30头松辽黑猪的9个肉质性状和6个胴体性状,用PCR-RFLP方法检测Ob基因型。结果显示,松辽黑猪TT基因型平均膘厚比CT基因型低,而肌内脂肪含量、瘦肉率则显著高于后者(P<0.05),其他肉质和胴体性状在Ob基因型间没有显著差异(P>0.05)。结果表明,Ob基因的TT基因型对猪的肉质和胴体性状具有显著的正遗传效应。     

猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定

从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。     

AQP7基因第二外显子的单核苷酸多态性与牛精液品质的相关分析

采用PCR-SSCP技术分析了AQP7基因的第2外显子在西门塔尔牛和夏洛莱牛群体中的遗传多态性。结果表明:在所扩增的AQP7基因的第2外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有2种基因型AA型和AB型。对多态片段测序分析表明:在AQP7基因第2外显子中存在有一碱基A→G突变,导致编码氨基酸(天冬氨酸→丝氨酸)的改变。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡状态。用最小二乘法分析AQP7基因第2外显子不同基因型与西门塔尔牛和夏洛莱牛精液品质的相关性,发现AQP7不同基因型对冻精顶体完整率有极显著影响,AA型极显著高于AB型(P<0.01)。AA型的冻精活精子比率显著高于AB型(P<0.05),对其它性状的影响差异不显著。因此,西门塔尔牛和夏洛莱牛AQP7基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁。