吉林地方特色肉牛发情周期内生殖激素变化规律研究

[目的]研究吉林地方特色肉牛发情周期体内生殖激素的变化规律,为提高国产特色肉牛繁殖效率提供理论依据。[方法]以吉林地区优质的草原红牛和延边黄牛,以及西门塔尔为试验对象,对发情周期内3个品种牛的血清与尿样中的孕酮、雌二醇,促卵泡素、促黄体素的变化进行测定和对比。[结果]发情第21天已孕与未孕肉牛的孕酮和雌二醇含量均存在极显著差异（P〈0.01）,促黄体素含量在发情当天与其他天相比有显著差异（P〈0.05）。[结论]通过检测肉牛发情早期血液中孕酮含量对发情鉴定及早期妊娠的诊断是切实可行的。     

松辽黑猪L-FABP基因外显子2多态性及与肉质性状的相关性分析

以松辽黑猪为研究对象,采用PCR-SSCP方法检测了肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)基因外显子2的多态性,并将不同基因型与肉质性状进行相关性分析.结果表明,在外显子2发现多态性位点,有AA、AT和TT三种基因型;测序发现在1760 bp处存在T→A的碱基突变.并导致了苯丙氨酸变为亮氨酸;该位点的多态性对松辽黑猪的大理石纹和IMF含量均有显著影响(P<0.05),大理石纹为AA型显著高于TT型(P<0.05),AT型与AA型,AT型与TT型之间差异均不显著(P>0.05);IMF含量为AA型和AT型显著高于TT型(P<0.05),AA型和AT型之间差异不显著(P>0.05);其他内质性状的不同基因型之间差异不显著(P>0.05).因此推断L-FABP基因可能是影响猪肉质性状的主效基因或是与影响肉质性状的QTL连锁的基因.     

梅花鹿颈背部异常松弛皮肤光镜组织学观察

本研究利用Weigert’s-Van Giesson染色法和Masson氏三色染色法分别对正常梅花鹿和颈背部皮肤异常松弛的梅花鹿皮肤中的弹性纤维和胶原纤维进行观察研究,探讨梅花鹿松弛皮肤组织学致病特点。结果表明,正常梅花鹿真皮网状层中有较多的弹性纤维有规律地平行排列,呈波浪状,染色均匀;真皮乳头层有少量弹性纤维垂直于表皮分布。皮肤松弛梅花鹿或是真皮乳头层中缺乏弹性纤维（大0号和79号鹿）,或是网状真皮层中弹性纤维严重发育不全,出现集聚、断裂现象（33号和79号）,且排列紊乱、呈不规则状（大0号）;正常梅花鹿皮肤胶原纤维在真皮层中呈多层规律性分布。皮肤松弛梅花鹿胶原纤维束比正常胶原束粗大、胶原纤维束减少、堆积、排列杂乱无序,胶原纤维间表现为严重的稀疏。这些现象与人类皮肤松弛症的皮肤组织学症状非常相似。     

牛性机能发育阶段与卵泡、黄体因素对卵母细胞体外成熟及体外受精的影响

利用屠宰母牛卵巢．对来自不同性机能发育阶段母牛的卵巢卵母细胞．不同状态卵巢卵泡的卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）进行了系列研究。结果表明．来自初情期、性成熟母牛卵巢的卵母细胞受精后的卵裂率（ ７４． ７％和 ８１． ５％）、囊胚率（ ２３．０％和 ２６． ８％）显著高于来自初情期前母牛卵巢卵母细胞的卵裂率（１８．８％）和囊胚率（１．８％）,Ｐ＜０．０５;有黄体卵巢的卵母细胞体外受精后的发育能力显著低于无黄体卵巢卵母细胞（卵裂率５８．０％：７９． ９％,囊胚率１３．％：２７．１％,Ｐ＜０．０５）;优势卵泡的有无对卵母细胞的卵裂率和囊胚率无明显影响。     

添加不同水平铁对吉戎Ⅱ系獭兔血液酶活力影响的研究

为了探索獭兔日粮中铁的适宜添加量,选用军需大学育种中心的50日龄吉戎Ⅱ系獭兔112只,将其随机分为7组,每处理3个重复,每个重复4只兔,试验期为60 d。对照组采食基础日粮,试验组在基础日粮的基础上,分别添加30,60,90,120,150,200 mg/kg FeSO4.H2O,进行饲养试验。在试验的第20,40,60 d对獭兔进行心脏采血,对其血液酶活力进行分析。结果表明:过氧化氢酶(CAT)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活力随铁水平的增加而增强,与对照组相比差异显著(P<0.05),但各试验组间差异不显著。在1~20 d和40~60 d以90 mg/kg添加量CAT和SDH的活力最高,在20~40 d以120 mg/kg添加量CAT和SDH的活力最高。组织中铁的沉积量随铁添加量的升高而增多,各组间差异显著(P<0.05)。     

分子标记在猪遗传育种上的应用

本文综述了分子标记在猪遗传育种上的应用,主要包括与繁殖、生长、胴体、肉质及抗病性状相关的分子标记。     

维生素E通过间隙连接蛋白Cx43对牛颗粒细胞凋亡及增殖的影响

本研究旨在研究维生素E对间隙连接蛋白Cx43的影响和其对牛颗粒细胞增殖与凋亡的作用及其机制。将从牛卵巢中分离获得颗粒细胞进行体外培养,用不同浓度的维生素E (0、25、50、100、200、500 μmol/L)处理细胞24 h。采用流式细胞术检测颗粒细胞的凋亡率、实时荧光定量PCR法检测凋亡标志基因BCL2/BAX、P53及Cx43 mRNA的表达变化、CCK8法检测颗粒细胞的增殖变化。结果表明:流式细胞术检测显示,与对照组相比,体外培养过程中添加100 μmol/L维生素E可显著抑制颗粒细胞凋亡(P<0.05),实时荧光定量PCR检测显示维生素E能引起BCL2/BAX、P53及Cx43基因表达显著变化(P<0.05),CCK8检测显示维生素E处理细胞24和36 h时可以显著促进颗粒细胞增殖(P<0.05)。此研究结果为深入解析维生素E通过影响颗粒细胞增殖、凋亡进而影响卵母细胞发育、成熟的机制及提高雌性动物繁殖能力提供了理论依据。     

延边黄牛GHR基因第8外显子一个新多态位点的发现

［目的］寻找可用于标记辅助选择的分子标记,为延边黄牛分子生物学选种提供依据。［方法］以46头纯种延边黄牛血样为试材,利用PCR-SSCP技术对GHR基因的第8外显子进行检测并测序,检测了延边黄牛群体内GHR的遗传变异。［结果］对扩增产物进行的SSCP检测发现,有3种基因型,分别为AA、BB、AB,其中AA、BB为纯合子,AB为杂合子。以AA和BB个体为样本的测序分析发现,有一个新多态性位点。GHR基因多态位点遗传分析表明,AA型个体较多,AB型和BB型个体较少。GHR基因的AA基因型效应在部分生长性状上优于其他基因型,差异达到显著水平。［结论］研究提示,GHR基因有可能作为延边黄牛生长性状的候选基因;在育种时应结合多个基因位点才能达到有效选育目的。     

胰岛素对犊牛肝细胞PC mRNA表达及其活性的影响

取单层培养72 h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0,5,10,20,50,100μmol/L的胰岛素(Insulin,INS),每个处理3个重复(每重复2孔),再培养12 h后分别提取RNA和制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源INS对肝细胞糖异生关键酶丙酮酸羧化酶(Pyruvate carboxylase,PC)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PC活性的影响。结果表明,一定浓度的INS显著抑制了肝细胞PC mR-NA表达,降低了PC活性。     

猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定

从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。