猫细小病毒CC-1株VPl基因克隆与序列分析

根据GenBank登录的猫细小病毒（CU-4）VP1基因序列,设计了1对引物,用PCR技术对VP1基因进行整体扩增,将扩增产物纯化后克隆入PGM-T载体,通过酶切、PCR和测序进行验证。结果表明,测序拼接得出VP1基因的序列长度约为2306 bp,该基因的ORF总长为2184 bp,编码727个氨基酸,应用DNAStar软件把所测得的序列与国内外代表性毒株的VP1基因编码区全长核苷酸序列和氨基酸序列进行比对分析,发现CC-1株与国内XJ-1株的核苷酸和氨基酸同源性均为99.3%。     

犬瘟热病毒核蛋白基因的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

应用RT-PCR技术特异扩增出犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)核衣壳蛋白基因(Nucleocapsid pro-tein,N)高度保守序列,克隆至质粒pMD18-T中获得重组质粒pMD18-T-N,测序结果证实了重组质粒的可靠性。将目的片段克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌BL21株,经1 mmol/L IPTG诱导,N基因融合蛋白获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析表明,表达产物的相对分子质量与预期的55 000相符。Western-blot检测表明,表达产物与CDV标准阳性血清呈阳性反应。在此基础上,初步建立了以纯化的N蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法。结果表明,大肠杆菌中表达的CDV N蛋白在免疫原性上与天然N蛋白具有较高相似性,可作为诊断用抗原,从而为进一步开发犬瘟热抗体检测试剂盒以及单克隆抗体、胶体金试纸条奠定了基础。     

松辽黑猪IGF-Ⅰ基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与生长和胴体性状的关联性

采用PCR-SSCP技术分析了IGF-Ⅰ基因的5’UTR、外显子4在松辽黑猪群体中的遗传多态性。结果在所扩增的IGF-Ⅰ基因的5’UTR中的2个目的片段均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第4外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在IGF-Ⅰ基因第4外显子中存在有1碱基A→G突变。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析IGF-Ⅰ基因第4外显子不同基因型与松辽黑猪生长和胴体性状的相关性,发现IGF-Ⅰ不同基因型对断奶后日增重有显著影响,AA型显著高于AB型和BB型(P<0.01)。AA型猪的瘦肉率显著低于AB型和BB型(P<0.01),而AA型猪的平均背膘厚显著高于AB型和BB型(P<0.01),对其他性状的影响差异不显著。结果表明,松辽黑猪IGF-Ⅰ基因应是影响生长和胴体性状的一个主效基因或与影响这些性状的主效基因紧密连锁。     

7种菌糠及其青贮饲料的营养价值和发酵品质

为挖掘食用菌糠饲料在肉牛产业中的应用潜力,本试验以7种常见食用菌(白灵菇、猴头菇、滑子菇、金针菇、平菇、杏鲍菇和榆黄菇)的菌糠为研究对象,分析各种菌糠及其青贮发酵后的营养价值和发酵品质。结果表明:金针菇菌糠的营养价值在7种菌糠中相对较高,猴头菇、金针菇和平菇的综合净能相对较高(5.16~5.36 k J/g DM)且发酵前后无显著变化;除滑子菇青贮菌糠和杏鲍菇青贮菌糠外,其余青贮菌糠均获得中等发酵品质。     

松辽黑猪×野猪杂交猪H-FABP mRNA基因的组织分布研究

[目的]研究松辽黑猪×野猪杂交猪H-FABP mRNA基因的组织分布,为探明该基因的生理功能提供依据。[方法]采用RT-PCR技术获得松野杂交猪的cDNA,经PCR扩增后对目的片段进行电泳鉴定和测序,检测H-FABP mRNA在松辽黑猪×野猪杂交猪组织中的分布情况。[结果]在选取的皮下脂肪、腹脂、乳腺、背最长肌、臂三头肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、回肠、十二指肠共12种组织中：H-FABP mRNA均有表达。[结论]H-FABP基因在组织中广泛分布说明了其功能的重要性及多重性。     

中国牦牛品种(类群)的遗传资源、生态特性、繁殖、饲牧管理与利用(3)

<正>7产品的生产和利用7.1牦牛乳与乳制品牦牛乳是母牦牛分娩后为哺育犊牛从乳腺中分泌的一种不透明稍带黄色或白色的液体,分为初乳、常乳、末乳和异常乳4种。初乳为产犊后7天内分泌的乳。这种乳加热时形成凝块豆腐状,不能用作乳制品的原料;常乳为产犊7天以后的乳,用作乳制品的原料;末乳为初冬(10月)至严冬(1月)所分泌的乳,不能用作乳制品的原料或供人食用,可任犊牛吸吮;异常乳为不适合饮用或用作乳     

促黄体素LHβ基因的单核苷酸多态性与牛精液品质的相关分析

采用PCR-SSCP技术分析了LHβ基因的5′UTR和3个外显子在西门塔尔、夏洛来等种公牛中的遗传多态性。结果在所扩增的LHβ基因的5′UTR 2个目的片段和外显子1、3中均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第2外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在LHβ基因第2外显子中1个碱基G突变为A。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析LHβ基因第2外显子不同基因型与西门塔尔和夏洛来精液品质的相关性,发现LHβ不同基因型对冻精畸形率和射精量有显著影响,对其他性状的影响差异不显著。结果表明,西门塔尔和夏洛来牛LHβ基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁。     

维生素A水平对獭兔生产性能及血液生化指标的影响

选用45日龄Vc-Ⅱ新品系獭兔54只,研究维生素A水平对獭兔生产性能及血液生化指标的影响。结果表明,在基础日粮中添加10000IU/kg维生素A可显著提高獭兔的日增重(P<0.05)、降低料肉比(P>0.05)、降低血清BUN含量(P<0.01)。建议VC-Ⅱ生长獭兔日粮中维生素A的添加量为10000IU/kg。     

不同锌水平对獭兔血液生化指标的影响

本试验研究了日粮锌水平对獭兔血液生化指标的影响，结果表明：日粮锌水平可显著降低血清SUN含量；可显著提高血清ALP、CuZn—SOD、GPT、AST活性，其中以添加80mg／kg锌时ALP、CuZn—SOD活性最强，继续添加到120mg／kg时，ALP活性趋于稳定，而CuZn—SOD活性下降。